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GB/T15403—1994中华人民共和国国家标准大豆制品甲酚红指数的测定DeterminationofcresolredindexforSoyabeanproductsGB/T15403—1994本标准等同采用国际标准ISO5514—1979《大豆制品-甲酚红指数的测定》。1主题内容与适用范围本标准规定了大豆制品中甲酚红指数的测定方法。甲酚红指数大小，可以确定大豆制品制品的热处理程度。用甲酚红指数尤其可以评估是否烧煮烹制过度。本标准适用于大豆制品，对非纯大豆制品有一定局限性。2引用标准GB2905谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法3术语甲酚红指数：在规定的操作条件下，含有500mg粗蛋白质的大豆制品所结合的甲酚红毫克数。4原理甲酚红可与蛋白质分子特别是大豆蛋白质分子中的阳离子基团结合，大豆制品受热致使蛋白质变性时，阳离子基团增多，因此一定量的大豆制品可结合的甲酚红的量，即甲酚红指数可以评价大豆制品的热处理程度，特别是可以说明它是否已加热过度。取定量磨好的试样与甲酚红标准溶液混合。经过规定的反应时间后，用分光光度法测定溶液中残存甲酚红的浓度，再与甲酚红标准溶液的初始浓度相比，即可测得该试样的甲酚红指数。5试剂本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或纯度相当的水。5．1甲酚红标准液，0.1g/L称取0.1g甲酚红（HG3—3048），（准确至1mg）溶于40mL0.1mol/L的氢氧化钠溶液，定量转移到1000mL容量瓶中，加水至约800mL，加入100mL1mol/L盐酸，然后加水稀释至刻度，混匀。5．2氢氧化钠（GB629）溶液，0.02mol/L。5．3正己烷。6仪器设备6．1粉碎机：粉碎中不明显发热（如球磨机）；6．2筛：筛孔0.2mm（80目）；6．3分析天平：感冒0.0001g；6．4移液管：1mL，20mL；6．5磁力搅拌器：直径120mm；6．6离心机：3000r/min并备有聚乙烯离心管；6．7振荡机；国家技术监督局1994—12—30批准1995—07—01实施国家技术监督局1994—12—30批准1995—07—01实施GB/T15403—19946．8分光光度计，或带干涉滤光片的比色计。对于脂肪含量大于10%的样品则需用；6．9微型磨或研钵；6．10减压蒸除溶剂的装置（如旋转蒸发器）。7试样的制备用粉碎机（6.1）粉碎5～10g试样，使其全部通过（6.2）的筛孔。如样品的脂肪含量超过10%，可于微型磨或研钵（6.9）中，加入适量正己烷（5.3）进行粉碎或研磨，然后倾弃大部份溶剂，于60℃以下减压蒸发（6.10）至干。8分析步骤8．1粗蛋白质含量的测定依照GB2905所规定的方法测定粗蛋白质的含量（氮含量×6.25）。8．2甲酚红指数的测定称取一定量样品双份（精确到0.1mg），使其中蛋白质含量达100.0mg，分别置于50mL锥形瓶中。用移液管（6.4）分别加入20.0mL甲酚红标准液（5.1），于磁力搅拌器（6.5）上搅拌30min，然后将混合物移至离心管（6.6）中，离心，直至上清液清澈为止，一般在3000r/min下离心约20min。或在振荡机（6.7）上振荡30min，过滤，弃上初滤液。用移液管（6.4）吸取1.0mL上清液（或滤液）置于另一小锥形瓶中，加入20mL氢氧化钠溶液（5.2），混合，5～10min后，在分光光度计或比色计（6.8）上，波长570nm处，用光径为1cm的比色池，以水做参比，测定溶液吸光度A1，以同法测定同样条件下稀释的标准甲酚红溶液（4.1）的吸光度A2。9分析结果的表述甲酚红指数表示为每500mg粗蛋白质（氮含量×6.25）所结合的甲酚红毫克数。甲酚红指数10212×−=AAA式中：A1——与蛋白质反应后剩余甲酚红溶液吸光度。A2——稀释后标准甲酚红溶液的吸光度。如所测双样间的结果符合10的要求，取其算术平均值报告结果，最后结果保留一位小数。10重复性同一分析人员使用相同仪器设备，所测双样或相继测定结果间的相对相差不大于5%。附加说明：本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国农业分析标准化技术委员会归口。本标准由中国农业科学院分析测试中心负责起草。国家技术监督局1994—12—30批准1995—07—01实施GB/T15403—1994本标准主要起草人常碧影、梁冬生。国家技术监督局1994—12—30批准1995—07—01实施