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培养基配制技术目标•掌握培养基的配制原则以及注意事项。•熟悉微生物生长繁殖需要的营养成分。•了解常见菌种培养时培养基的选择。概述一、微生物的概念及种类（一）什么是微生物？是存在于自然界的一群体积微小、结构简单、肉眼看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观察到的微小生物。（二）微生物有什么特点？个体微小、结构简单、繁殖迅速、分布广泛、种类繁多、容易变异等特点（三）微生物根据结构、组成的不同可分为？1.非细胞型微生物小、无完整的细胞结构、只能在特定活细胞内增殖，DNA或RNA，如病毒、朊粒2.原核细胞型微生物裸露DNA团块、无核膜和核仁，缺乏完整的细胞器，如细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌3.真核细胞型微生物核膜、核仁和染色体，细胞器完整，如真菌非细胞型微生物腺病毒乙肝病毒噬菌体流感病毒HIVEbola病毒原核细胞型微生物螺旋体立克次体支原体衣原体真核细胞型微生物单细胞型真菌多细胞型真菌二、微生物与人类的关系•绝大多数微生物对人和动植物是有益的，有些则是必需的。自然界中N、C、S等元素循环农业,以菌造肥,以菌催长,以菌防病,以菌治病工业,微生物应用于食品、皮革、纺织、石油、化工、冶金等医药工业,利用微生物制造抗生素、维生素、辅酶、ATP等药物污水处理,利用微生物降解有机磷、氰化物等基因工程技术中提供多种工具酶和载体系统,创建有益的工程菌新品种微生物有少数微生物能引起人类和动、植物的病害如何鉴定微生物微生物纯种分离•将多种混杂微生物，经某种技术或方法分离成纯种的过程纯培养•在适宜条件下培养纯种获得的培养物（群体）培养基培养基的类型按营养物质来源划分•天然：是采用化学成分还不清楚或化学成分还不恒定的各种动植物和动物组织或微生物的浸出物、水解液等物质制成的•合成：用化学成分和数量完全了解的物质配制的•半合成培养基：采用一部分天然有机物作碳源、氮源和生长因子的来源，再适当加入一些化学药品以补充无机盐成分，使其更能充分满足微生物对营养的需要培养基的类型按物理性状划分：•固体培养基：适合于菌种和孢子的培养和保存，也用于有子实体的真菌类（香菇、白木耳）的生产培养基的类型按物理性状划分：•液体：80－90%是水，配有可溶性的或不溶性的营养成分，是发酵工业大规模使用的培养基培养基的类型按物理性状划分：•半固体：在液体培养基中加入0.5－0.8%的琼脂，用于鉴定细菌、观察细菌运动特征及噬菌体的效价滴度•抑制剂•作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待检菌的检出率•种类：•盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）。•染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、玫瑰红。•胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐。•抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素培养基的类型（作用）•选择培养基：在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基，称之为选择培养基。•分离培养用的培养基名称用途•SS琼脂培养基沙门氏菌和志贺氏菌属分离•麦康凯琼脂培养基（MacC）肠道致病菌分离•指示剂•作用：用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质和含氮化合物，产酸产碱的能力•常用的指示剂：•酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、复红、伊红、美蓝、孔雀绿等EMB培养基：大肠杆菌、产气杆菌分离鉴别培养基的类型按用途划分：•孢子培养基：是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基，要求能使菌体迅速生长，产生较多优质的孢子，营养不太丰富，常用的有麸皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基、琼脂斜面培养基•种子培养基：是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体，并使菌丝体长得粗壮，成为活力强壮的“种子”，一般采用营养丰富且完全的培养基•发酵培养基：供菌体生长、繁殖和合成产物之用，组成除有菌体生长所必需的元素和化合物之外，还要有合成产物所需的特定元素、前体和促进剂等培养基配制原则1、选择适宜的营养物质2、营养物质浓度及配比合适3、控制pH条件4、原料来源的选择5、灭菌处理1、选择适宜的营养物质•所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源2、营养物质浓度及配比合适•培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用.发酵过程中所用的一些前体物质产品前体产品前体青霉素G青霉素V金霉素灰黄霉素红霉素苯乙酸苯氧乙酸氯化物氯化物正丙醇核黄素类胡萝卜素L-异亮氨酸L-色氨酸L-丝氨酸丙酸盐β-紫罗酮-氨基丁酸邻氨基苯甲酸甘氨酸5、原料来源的选择•在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,特别是在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值.6、灭菌处理•要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌.对培养基而言,更是要进行严格的灭菌.对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15～30min可达到灭菌目的.步骤•称量-溶解-定容-调节PH-过滤-分装包扎-灭菌常用的四种培养基牛肉膏蛋白胨培养基高氏1号培养基豆芽汁葡萄糖培养基马铃薯葡萄糖培养基回顾•微生物培养基的类型•微生物培养基配制原则、配制步骤•常用的几种培养基的适用微生物•牛肉膏蛋白胨培养基中琼脂的作用