人绒毛膜促性腺激素检测方法及临床意义云南省红河州第一人民医院检验科李琼芬概念HCG组成宫外孕葡萄胎绒毛膜癌检测方法及原理临床意义概念HCG组成HCG是由α和β二聚体组成的糖蛋白激素。HCGα亚单位的氨基酸排列与黄体生成素(LH)的α亚单位相似,但是它们的β亚单位各不相同。因此为避免交叉反应,目前均采用抗β-HCG单克隆抗体进行特异的HCG检查。凡孕卵在子宫腔以外的任何部位着床者,统称为异位妊娠,习惯称为宫外孕。根据着床部位不同,有输卵管妊娠、卵巢妊娠、腹腔妊娠、宫颈妊娠及子宫残角妊娠等。在宫外孕中,以输卵管妊娠最多见,约占90%以上。宫外孕输卵管与卵巢宫外孕为绒毛基质微血管消失,从而绒毛基质积液,形成大小不等的水泡,形似葡萄,故称为葡萄胎(hydatidiformmole)。葡萄胎葡萄胎葡萄胎葡萄胎葡萄胎是一种高度恶性的肿瘤,继发于葡萄胎、流产或足月分娩以后,出现不规则阴道流血及转移灶症状,并有血HCG升高,应诊断为绒毛膜癌。其发病情况大约为0.001‰~3.6‰,少数可发生于宫外孕后,多为生育年龄妇女。偶尔发生于未婚妇女的卵巢称为原发性绒毛膜癌,在50年代,死亡率很高,近年来应用化学药物治疗,使绒癌的预后有了显著的改观。绒毛膜癌绒毛膜癌子宫绒毛膜癌重度出血检测方法顺磁性微粒化学发光免疫测定法——双抗体夹心法贝克曼仪器UniCelDxI800——β-HCG郑州安图试剂-仪器Lucy3——HCG检测原理AMPPD:3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐,是最新的超灵敏的碱性磷酸酶底物,反应速度快;是碱性磷酸酶的化学发光底物,断裂并发射光子AMPD:氨基甲基丙二醇化学发光免疫分析流程免疫学原理抗原、抗体特异性结小分子采用(一步、二步)竞争结合法大分子采用(一步、二步)夹心法磁性微粒子化学发光技术磁性微粒子d7u扩大表面积、增加灵敏性加快反应速度、迅速捕获抗原、抗体易于结合相、游离相的分离,提高准确性提高发光强度、快速达到稳定、持续发光进样系统反应池PMT放大器记录仪负高压检测系统电化学发光分析法仪器方框图PMT:光电倍增管如超出线性范围上线值时,必须按不同样本的需要,做不同倍数的稀释•检测值是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象,其中抗体过剩叫做前带效应,抗原过剩叫做后带效应。•钩状效应稀释方法先用早早孕试纸筛查,确定稀释倍数根据不同浓度的血清样本的需要,对血清作相应倍数的稀释,得出的实验结果,克服了HOOK效应对检测结果的影响,不影响绒毛膜促性腺激素增高的血清学检测值,保证了检测结果的准确性,提高了临床诊断的符合率,辅助临床用药监测、观察疗效及预后评价。临床意义诊断早期妊娠妊娠期间正常血HCG参考水平妊娠周数HCG(mIU/ml)0.2-1(2-7天)5-501-2(8-14天)50-5002-3(15-21天)100-50003-4(22-28天)500-100004-5(29-35天)1000-500005-6(36-42天)10000-1000006-8(43-56天)15000-2000002-3月(60-90天)10000-100000在受精卵植入子宫后24—48小时,就可以在血液中检测出来。在妊娠最初3个月血HCG水平每(2.2±0.5≈40.8-64.8小时)天约升高一倍。比如今天是234,如果后天测出来是450左右,就可认为是正常宫内早孕。(测量浓度为500mIU/ml的LH,HCG不高于5.0mIU/ml)郑州安图试剂-仪器Lucy3异常妊娠与胎盘功能的判断宫外孕时,由于输卵管肌层菲薄、滋养细胞发育不良,血供差,合体滋养细胞合成血HCG量显著减少,每天升高幅度也减少。如果连续两次增加速度缓慢,表明宫外孕或者胚胎不正常发育迟缓。故血HCG检查可作为与其它急腹症的鉴别。流产诊断与治疗:不完全流产如子宫内尚有胎盘组织残存,血HCG多次检查时,会出现忽高忽低或逐渐上升的情况;如血HCG仍维持高水平多不会发生难免流产;如血HCG逐渐下降,则有流产或死胎的可能;在保胎治疗中,如血HCG仍继续下降,说明保胎无效;如血HCG不断上升,说明保胎成功。因此,可作为保胎或吸宫治疗的参考依据。在产后4天或人工流产术后13天,血HCG应低于1000mIU/ml,产后9天或人工流产术后25天,血HCG应恢复正常。如不符合这一情况,则应考虑有异常可能。滋养细胞肿的诊断与治疗监测葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜癌及睾丸畸胎瘤等患者血HCG显著升高,有的可达到数百万mIU/ml。如果血HCG增加速度非常快,表明有葡萄胎的可能,必须紧密监测,当然也有可能是双胞胎。滋养层细胞肿瘤患者术后,如血HCG不下降或不转阴,提示可能有残留病变,这类病例常易复发,故需定期检查。小结:HCG检测的临床意义诊断早期妊娠宫外孕与胎盘功能的判断滋养细胞肿瘤的诊断和治疗监测不同方法、不同厂家的试剂,检测原理、线性范围不同避免钩状效应的发生小结:分析中的注意事项治疗前及疗效观察:病例姓名年龄(岁)病检诊断日期治疗前、后:HCG(mIU/ml)时xx29绒癌2013-11-282140800.002013-11-302360650.002013-12-10100061.262013-12-1352104.002013-12-213980.00曹xx26绒癌2013-11-7238920.092013-11-8488492.862013-11-13817986.422013-11-1824504.002013-11-236933.002013-12-12219.00李x17葡萄胎2013-11-141372020.002013-11-206339.00余xx45葡萄胎2013-12-122298690.002013-12-191100550.00谢谢!