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课时作业4微生物的实验室培养1．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A．培养基分装到培养皿后进行灭菌B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D．培养过程中每隔一周观察一次解析：在配制培养基过程中，通常先灭菌后倒平板，A错；转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线，B正确；接种后的培养皿应放入培养箱中进行培养，一般不需光照，C错；培养过程中应该每天或隔天定时观察，每隔一周观察一次时间太长，D错。答案：B2．在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是()A．作为碳源，为酵母菌提供能源物质B．作为碳源，用于酵母菌合成代谢产物C．作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸D．作为氮源，用于酵母菌合成代谢产物答案：C3．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用()A．固体培养基B．液体培养基C．加青霉素的培养基D．加入高浓度食盐的培养基解析：固体培养基主要用于微生物分离、鉴定等。液体培养基用于工业生产，加入青霉素的选择培养基能抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉菌，加入高浓度食盐可抑制多种细菌的生长，可分离得到金黄色葡萄球菌。本题没说明分离哪种细菌，故应用固体培养基。答案：A4．下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是()硝化细菌乳酸菌根瘤菌衣藻A能源NH3乳酸N2光能B碳源CO2糖类等糖类等CO2C氮源NH3N2N2NO3－D代谢类型自养需氧型异养厌氧型自养需氧型自养需氧型解析：本题综合考查了不同微生物的代谢类型及营养要求。从能源来看，乳酸菌需糖类等有机物供能；从氮源看，乳酸菌需要NH4＋、NO3－；从代谢类型看，根瘤菌为异养需氧型；从碳源看，硝化细菌与衣藻需CO2，乳酸菌和根瘤菌需要糖类等有机物。答案：B5．关于灭菌和消毒的不正确理解是()A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药物法答案：B6．对培养基、培养皿、接种环，实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是()①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤D．③④②①⑥⑤解析：培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。答案：A7．下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是()A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B．划线操作须在火焰上进行C．在5区域中才可以得到所需菌落D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌解析：本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。答案：D8．获得纯净培养物的关键是()A．将用于微生物培养的器皿、接种用具进行灭菌B．接种纯种细菌C．适宜环境条件下培养D．防止外来杂菌的入侵解析：获得纯培养都是围绕防止外来杂菌污染进行的。可以从两方面进行：一是无菌操作，二是获得纯种，其中一最关键。答案：D9．下表培养基配方中，能作为选择培养基的是()，能作为鉴别培养基的是()，能作为固体培养基的是()原料ABCD蛋白胨10g10g10g10g乳糖5g5g5g5g蔗糖5g5g5g5gK2HPO42g2g2g2g伊红0.4g美蓝0.065g琼脂20gNaCl20g蒸馏水1000mL1000mL1000mL1000mL解析：由表中内容看出，D组培养基中加入了较多的NaCl，培养基中加入某些化学物质可促进所需微生物的生长，抑制不需微生物的生长，因此应属选择培养基。A组培养基中加入了伊红和美蓝，可用以鉴定大肠杆菌，因此属鉴别培养基。而B组培养基中加入琼脂，能作为固体培养基。又从表中各数据看，所有物质均有严格的量的要求及种类的要求，因此配制培养基应遵循三大原则，即“目的明确”“营养均衡，有严格浓度配比”且要“调整好pH”。答案：DAB10．发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。消灭杂菌，获得纯种的方法不包括()A．根据微生物对碳源需要的差别，使用不同碳源的培养基B．根据微生物中缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸D．根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素解析：由于不同的微生物对碳源、氮源、无机盐、生长因子的需求不同，可以根据微生物的生长需求来配制特殊的培养基以获得单一纯种，也可以根据其对抗生素的敏感性不同，加入不同的抗生素来获得单一纯种。答案：C11．现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分如下表：成分KHSO4MgSO4·7H2ONaClCaSO4·2H2OCaCO3葡萄糖纯淀粉甲培养基含量0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培养基含量0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%－－用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们()A．甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌B．甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌C．甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌D．甲培养基适于分离异养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌解析：根据所提供的甲、乙两种培养基的成分分析，两者之间的主要差别是：甲培养基有葡萄糖和淀粉作为有机碳源和能源，也有少量的无机碳源(CaCO3)；乙培养基无有机碳源和能源。两者之间的共同点是：都不含氮源。说明这两种培养基分别适于培养异养型自生固氮微生物和自养型自生固氮微生物。答案：C12．下列有关细菌培养的叙述，正确的是()A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动解析：本题意在考查有关细菌培养的知识。菌落就是由单个细菌或同种细菌繁殖成的具有一定形态结构等特征的子细胞群体，所以单个菌落只含一种细菌；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌的生长而促进真菌的生长；破伤风杆菌的异化代谢类型属于厌氧型，通入氧气会抑制其生长；半固体培养基中可以观察细菌的运动。答案：D13．(2019年高考·课标全国卷Ⅲ)回答下列与细菌培养相关的问题。(1)在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是______________________。硝化细菌在没有碳源的培养基上________(填“能够”或“不能”)生长，原因是__________________。(2)用平板培养细菌时一般需要将平板________(填“倒置”或“正置”)。(3)单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是____________________。(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。解析：(1)细菌培养时常用牛肉膏蛋白胨培养基，牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素，蛋白胨能提供碳源、氮源、维生素，而葡萄糖不能提供氮源，NaNO3不能为微生物提供碳源。不同细菌生长繁殖所需要的最适pH是不同的，应该根据培养细菌的不同来调节培养基的pH。硝化细菌是化能自养型细菌，可以空气中的CO2为碳源，因此在没有碳源的培养基上能够生长。(2)在平板培养基上培养细菌时，一般需将平板倒置，这样可以防止皿盖上的水珠落入培养基。(3)不同种类的细菌所形成的菌落，在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定的特征，不同种细菌在一定培养条件下表现出各自稳定的菌落特征，可以作为菌种鉴定的重要依据。(4)使用后的培养基在丢弃前需进行灭菌处理，以免污染环境。答案：(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源(2)倒置(3)在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌14．下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表，据此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5g1g0.5g100mL(1)蛋白胨在培养基中的作用是__________________________________________。(2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的成分是________。(3)表中各成分含量确定的原则是________。(4)培养基配制好后，分装前应进行的工作是_____________________________________________________________________________________________________________。(5)从配制培养基直到培养完成，所采用的预防杂菌污染的方法是_____________________________________________________________________________________________________________。(6)在培养基凝固前要搁置斜面，其目的是______________________________________________________。解析：蛋白胨中有大量的蛋白质降解而成的多肽类等物质，因而在培养基中提供碳源、氮源和生长因子。微生物菌落的形成是在固体培养基上，所以此培养基还需加琼脂。营养成分含量必须依据所培养微生物的需要而定。配好后，必须先调pH，再分装，整个过程要严格无菌操作。答案：(1)提供碳源、氮源、生长因子(2)琼脂(凝固剂)(3)依据所培养微生物对各营养成分的需要量(4)调整pH(5)高压蒸气灭菌、灼烧接种环、酒精擦洗灭菌、在火焰旁接种、棉塞塞试管口等(6)扩大接种面积15．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为____________。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________________________________________________________________________。(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。解析：(1)为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：CV×M(接种计数结果平均值接种体积×稀释倍数)＝380.1mL×100＝3.8×107/L。(2)接种时接种环