NY 82.13-1988 果汁测定方法 脯氨酸的测定

NY82.13—1988中华人民共和国农牧渔业部部标准果汁测定方法脯氨酸的测定NY82.13—1988本标准等同采用国际果汁联盟IFJU分析法。No.49（1983）—脯氨酸的测定。1原理脯氨酸与水合茚三酮作用，生成有色络合物。用乙酸正丁酯提取，并在波长509nm范围内进行比色测定。2试剂2．1水合茚三酮（HG3—984—1976，分析纯）的乙二醇甲基醚溶液：3g/100mL。2．2醋酸正丁酯：分析纯。2．3甲酸（HB2093—1980）：分析纯，98～100%溶液。2．4无水硫酸钠（GB639—1977）：分析纯。2．5L‐脯氨酸：100mg/L。3仪器3．1分光光度计。3．2水浴。3．3具塞试管：25mL。3．4滤纸。3．5玻璃漏斗：ø6.5cm。3．6实验室用自动定时器。4测定程序4．1样品的制备脯氨酸含量大于50mg/L的样品应稀释。50～499mg/L稀释10倍；500～1000mg/L稀释20倍；小于50mg/L稀释2倍或5倍。4．2标准曲线的绘制将100mg/L的脯氨酸溶液，稀释到浓度为3、5、10、25、40、50、60mg/L。取上述溶液各1mL，按4.3程序测定吸光值。以吸光值为纵坐标，以脯氨酸浓度（mg/L）为横坐标，绘制标准曲线。4．3测定4．3．1取1.0mL试液于具塞试管中，加入1mL甲酸；2mL水合茚三酮溶液。摇匀。置于沸水浴中15min（水浴的液面要高于试管中的液面）。放在20℃水中冷却5～10min。4．3．2在试管中加入10mL乙酸正丁酯，盖好塞子。充分摇动，使有色溶液提取到有机液层。4．3．3溶液全部倾入到盛有一满勺无水硫酸钠的滤纸上。15min后，在509nm波长处，用1cm比色皿，测定滤液的吸光值。中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施NY82.13—19884．4空白试验空白试验中不加水合茚三酮，其他条件和测定程序与4.3相同。5结果的表示和计算脯氨酸含量可以直接由标准曲线得到。用mg/L表示，保留两位小数。原来样品稀释的倍数，在计算中必须考虑。附加说明：本标准由北京农业工程大学负责起草。本标准主要起草人：张坤英。中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施