搜索
NY82.11—1988中华人民共和国农牧渔业部部标准果汁测定方法果胶的测定NY82.11—1988本标准等效采用国际果汁联盟IFJU分析法。No.26（1964）—果胶的测定。1原理果胶物质是一种植物胶，用乙醇作为沉淀剂，可使其沉淀分离。全部沉淀用作果胶总量的测定，或经适当提取后，测定水溶性果胶。果胶的水解产物——半乳糖醛酸在强酸中与咔唑发生缩合反应。然后对其紫红色溶液进行比色定量。2试剂2．1乙醇（GB679—1980）：分析纯，95%溶液。2．2乙醇（GB679—1980）：分析纯，63%溶液。100mL蒸馏水与200mL95%乙醇（2.1）混合。2．3精制乙醇：1升95%乙醇（2.1）与4g锌粉和2mL浓硫酸共煮沸，置恒温水浴中回流10小时，用全玻璃仪器蒸馏。每1000mL馏出液中，加入锌粉和氢氧化钾（GB2306—1980，分析纯）各4g，进行重蒸馏。2．4氢氧化钠（GB629—1981）：分析纯，1M溶液。2．5浓硫酸（GB625—1977）：分析纯，与咔唑溶液不应产生颜色。2．6咔唑（指示剂级）：0.1%咔唑乙醇（2.3）溶液。用0.1g经升华提纯的咔唑溶解于精制乙醇（2.3）中，并稀释至100mL。2．7无水半乳糖醛酸（理论分子量为194）。3仪器3．1分光光度计。3．2实验室常用电动离心机：约3000r/min。备有50mL刻度离心管。3．3恒温水浴：30～100℃。3．4电动搅拌器。3．5容量瓶：100mL。3．6吸量管：1mL、5mL、10mL。3．7试管：25×200mm。4测定程序4．1果胶质的沉淀将15mL果汁（或4g浓缩汁加12mL水）置于50mL刻度离心管（3.2）中，加入95%热（75℃）乙醇溶液25mL，在85℃水浴中加热10min，充分搅拌。再加95%乙醇使总体接近50mL，离心15min，弃去上清液。在85℃水浴上再用63%乙醇洗涤沉淀。离心分离，弃去上清液。此步骤反复操作，直至清液中不再产生糖反应为止。4．2果胶总量提取液的制备将4.1制备出的果胶沉淀，全部洗入100mL容量瓶中。加入5mL1M氢氧化钠溶液，用水稀释至刻度，混匀。至少放置15min，并不时摇荡。过滤后，滤中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施NY82.11—1988液用于比色测定。4．3水溶性果胶的提取如欲测定水溶性果胶，可在4.1制备的果胶沉淀离心管中，加入5mL水，充分搅拌。补加水使总体积为35mL。用搅拌器强烈搅拌。离心分离15min。将提取液转移入100mL容量瓶中。重复水提取过程，再把水提取液并入同一容量瓶中。加入5mL1M氢氧化钠溶液，用水稀释至刻度。用于比色测定。4．4比色测定取大试管（25×200mm），吸移入1mL提取液（4.2）或（4.3）。在试样中，加入0.5mL0.1%咔唑乙醇溶液，并产生白色絮状沉淀，不断摇动试管，再加入6mL浓硫酸。立刻将试管放入85℃水浴里5min，再使之冷却15min。然后立刻用分光光度计在525nm波长处，用2cm比色皿测量吸光值。用试剂空白调零。4．5标准曲线的绘制4．5．1准确称取半乳糖醛酸100mg，溶解于水中，加入0.5ml1M氢氧化钠溶液，并定容至100mL，混匀。得1mg/mL的半乳糖醛酸原液。4．5．2移取上述原液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL，分别注入100mL容量瓶中，稀释至刻度，即得一组浓度为10、20、30、40、50、60、70μg/mL的半乳糖醛酸标准溶液。4．5．3用上述标准溶液，分别按（4.1）方法步骤测量。以测得的吸光值为纵坐标，每毫升标准溶液中的半乳糖醛酸的含量为横坐标，绘制标准曲线。5结果的表示和计算果胶的含量以mg/L或mg/kg为单位表示（不留小数位）。半乳糖醛酸简称GA，其含量可从标准曲线中查得，单位是μg/mL。按下式计算：在果汁中：μgGA×100mgGA/L=15在浓缩果汁中：μgGA×100mgGA/kg=4中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施NY82.11—1988附录A注意事项（补充件）A．1当果胶沉淀从果汁提取液里被离心分离时，往往在悬浮液里还剩有少许不溶性固体微粒。为了避免这一点，在第一次提取时，在离心管里加入大约1/2茶匙的滤纸悬浮物。A．2加硫酸所用的时间是非常严格的。如果在7秒钟内加入6mL，溶液的温度才能达到85℃，此时可以立即直立安放在85℃的水浴里。而且应预料到易变的颜色深度。A．3应用咔唑反应比色测定果胶时，其试样的提取液必须是不含糖分的提取液。糖分的存在干扰测定。应尽量洗涤除去糖分。A．4提取液中是否含糖可用糖分的穆立虚反应法检验。方法是：取提取液0.5mL注入小试管中，加入5%α‐萘酚的乙醇溶液2～3滴，充分混和，此时溶液稍有白色浑浊。然后，使试管稍稍倾斜，用吸管沿管壁慢慢加入浓硫酸1mL（注意水层与浓硫酸不可混和）。将试管稍予静置后，若在两液层的界面产生紫红色色环，则证明提取液中含有糖分。附加说明：本标准由北京农业工程大学负责起草。本标准主要起草人:孙晓光。中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施