NYT 2036-2011 热带块根茎作物品种资源抗逆性 鉴定技术规范 木薯

ICS65.020.20B04中华人民共和国农业行业标准NY／T2036—2011热带块根茎作物品种资源抗逆性鉴定技术规范木薯Technicalspecificationofstressevaluatingforgermplasmresourcesoftropicalrootcrops—Cassava2011-09-01发布2011-12-01实施中华人民共和国农业部发布NY/T2036—2011前言本标准按照GB／T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部农垦局提出。本标准由农业部热带作物及制品标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所。本标准主要起草人：李开绵、张振文、叶剑秋、闫庆祥、许瑞丽、欧文军、陆小静、黄洁、吴传毅、郑永清ⅠNY/T2036—2011热带块根茎作物品种资源抗逆性鉴定技术规范木薯1范围本标准规定了木薯(ManihotesculentaCrantz)种质资源苗期抗逆性（耐寒、抗旱和耐盐性）鉴定。本标准适用于木薯(ManihotesculentaCrantz)种质资源苗期抗逆性（耐寒、抗旱和耐盐性）鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY／T356木薯种茎NY／T1320农作物种质资源鉴定技术规程甘薯3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1抗逆性stresstolerance本规范所指的抗逆性是木薯种质苗期耐寒性（10℃低温）、抗旱性(30%的聚乙二醇-6000)和耐盐性(600mmol／LNaCl)。3.2干物质胁迫指数drymattertoleranceindex，DMTI指胁迫条件下木薯幼苗干物质重与对照木薯幼苗干物质重的百分比。3.3苗期seedlingstage指5cm高的植株占10%时作为苗期界定。参见附录A。4要求4.1材料和采样4.1.1材料按照NY／T356木薯种茎标准的规定选取一级木薯种茎为鉴定材料；选用100目石英砂经去离子水冲洗20次后自然凉干作为种茎苗期培养基质备用。4.1.2采样方式对照和处理均采用整株采样法，各重复分别称重，计算植株总生物量，取平均值，单位为千克(kg)。4.1.3样品干物质含量采样后，根据NY／T1320中干物质含量测定方法进行。4.2试验条件耐寒性鉴定在恒温培养箱中进行；抗旱、耐盐性鉴定在温室中进行。所有鉴定过程采用塑料花盆砂培种植方式，并采用Hoagland营养液提供生长期所需营养，Hoagland配制方法参见附录B。4.3鉴定方法4.3.1种质耐寒性鉴定1NY/T2036—20114.3.1.1鉴定步骤耐寒性鉴定采用反复低温胁迫法，具体操作步骤如下：第一步：鉴定材料准备将木薯种茎竖插种植在装有石英砂的漏底塑料花盆中，再用塑料盆垫底，防止漏水，共种植200株，待植株生长到苗期时开始进行鉴定。其中，每个试验材料分胁迫和非胁迫处理，均种植30株，3次重复，分别记为T1、T2、T3和CK1、CK2、CK3。第二步：实验条件低温胁迫的条件为10℃，相对湿度70%±5%，非胁迫的条件为25℃，室外盆栽，适当光照(约1000µmol／m2／s)。第三步：第一次低温胁迫—复温处理将试验材料移入温度10℃、相对湿度70%±5%的低温培养箱中进行低温胁迫处理，10d后立即停止低温胁迫，将植株移到培养箱外(25℃)正常生长，复温5d后，根据表1调查冷害级别和株数。第四步：第二次低温胁迫—复温处理第一次复温调查后再移回低温培养箱进行低温胁迫，当所有植株再度萎蔫，50%以上植株不同程度受害，甚至出现叶片脱落时停止低温胁迫，并移至培养箱外复温,复温5d后调查记录冷害级别，整株采样测定植株总生物量。植株冷害级别数据按表1的判定级别记录。表1植株冷害级别判定级别受害情况1不受害2少数嫩叶受害，嫩茎无受害31／2以下嫩叶受害，部分嫩茎受害41／2～3／4嫩叶和嫩茎枯萎，老叶脱落53／4以上嫩叶和嫩茎枯萎，叶片大量脱落，部分老茎受害6整株干枯死亡调查数据记录方式参见附录E。4.3.1.2结果计算按式(1)计算冷害指数：()CIIMcVHN×=×∑……………………………………（1）DII(ChillingInjuryIndex)——冷害指数；Mc——两次调查受害植株总数（株）；V——各冷害级数值；H——最高级数（级）；N——调查总株数（株）。计算结果精确到0.1。按式(2)计算干物质胁迫指数：DMTIcWcWtW−=……………………………………（2）式中：DMTI(DryMatterToleranceIndex)——干物质胁迫指数；Wt——处理样植株干物质重，单位为千克(kg)；Wc——对照样植株干物质重，单位为千克(kg)。2NY/T2036—2011计算结果精确到0.1。按式(5)计算耐寒性综合系数：根据NY／T1320附录G的系数转换方式,把CII、DMTI值按隶属函数在[0～1]的区间上进行转换。00≤α1l121()ccXUXααα−=−α1Xc≤α2…………………………………(3)10α2≤l式中：α1——min{Xc};α2——max{Xc};Xc——重复测得的CII。计算结果精确到0.1。00≤b1l121()ddXbUXbb−=−b1Xc≤b2………………………………(4)10b2≤l式中：b1——min{Xd};b2——max{Xd};Xd——重复测得的DMTI。计算结果精确到0.1。根据式(3).式(4)得如下：()()CTII2cUXUXd+=………………………………（5）式中：CTII(ChillingToleranceIntegrationIndex)——耐寒性综合系数。计算结果精确到0.1。按表2给出的评价标准进行耐寒性评价。表2耐寒性分级标准耐寒级别耐寒性综合系数耐寒性评价1≥70.0极强269.9～55.0强354.9～40.0中等439.9～25.0弱5＜25.0极弱4.3.2种质抗旱性鉴定4.3.2.1鉴定步骤抗旱性鉴定采用反复干旱胁迫法，具体操作步骤如下：第一步：鉴定材料准备将木薯种茎竖插种植在装有石英砂的漏底塑料花盆中，再用塑料盆垫底，防止漏水，共种植200株，待植株生长到苗期时取用。其中，每个试验材料分胁迫和非胁迫处理均种植30株，3次重复，分别记为T1、T2、T3和CK1、CK2、CK3。胁迫处理用含有30%的聚乙二醇-6000(PEG-6000)的Hoagland营养液作为干旱试验胁迫剂，用Hoagland营养液作对照，每次浇灌使用等体积溶液。干旱试验胁迫剂的配3NY/T2036—2011制参照附录C。第二步：实验条件整个干旱胁迫试验过程在防水大棚中进行，适当光照（约1000／µmol／m2／s）。第三步：第一次旱胁迫—复水处理干旱胁迫处理25d后立即停止干旱胁迫，开始复水。复水5d后，以幼苗叶片转为鲜绿色为存活标准，其他为受旱害。根据表3调查旱害级别和株数。第四步：第二次干旱胁迫—复水处理第一次复水后即停止供水，当所有品种再度萎蔫，上午叶片萎蔫下垂，多数植株不同程度整株枯死，50%以上植株叶片脱落时，开始第二次复水，复水5d后调查旱害数，整株采样测定植株总生物量。植物旱害级别数据按表3的判定级别记录。表3植株旱害级别判定级别受害情况l不受害21／3嫩叶呈失水萎蔫状31／2～2／3嫩叶呈失水萎蔫状，1／3成熟叶萎蔫并枯黄42／3以上嫩叶呈失水萎蔫状，1／2成熟叶萎蔫并枯黄5所有嫩叶呈失水萎蔫状，部分成熟叶全部枯黄，并开始脱落6植株叶全部枯死调查数据记录方式参见附录E。4.3.2.2结果计算按式(6)计算耐旱指数：()DTI100MdVHN×=××∑……………………………………（6）式中：DTI(DroughtToleranceIndex)——耐旱指数；Md——两次调查受害植株总数（株）；V——各旱害级数值；H——最高级数（级）；N——调查总株数（株）。计算结果精确到0.1。按式(7)计算干物质胁迫指数：DMTI100WcWtWc−=×…………………………………………(7)式中：DMTI(DryMatterToleranceIndex)——干物质胁迫指数；Wt——处理样植株干物质重，单位为千克（kg）；Wc——对照样植株干物质重，单位为千克(kg)。计算结果精确到0.1。按式(9)计算抗旱性综合系数：根据NY／T1320附录G的系数转换方式，把DTI值按隶属函数在[0～1]的区间上进行转换。00≤α1l121()ttXUXααα−=−α1Xc≤α2…………………………………(8)10α2≤l4NY/T2036—2011式中：α1——min{Xt}；α2——max{Xt}；Xt——重复测得的DTI。计算结果精确到0.1。根据式(8)、式(4)得如下：()()CTII2tUXUXd+=………………………………………(9)计算结果精确到0.1。按表4给出的评价标准进行抗旱性评价。表4抗旱性分级标准抗旱级别抗旱性综合系数抗旱性评价1≥70.0极强255.0～69.9强335.0～54.9中等420.0～34.9弱5＜20.0极弱4.3.3种质耐盐性鉴定方法4.3.3.1鉴定步骤耐盐性鉴定采用反复盐渗透胁迫法，具体操作步骤如下：第一步：鉴定材料准备将木薯种茎竖插种植在装有石英砂的漏底塑料花盆中，再用塑料盆垫底，防止漏水，共种植200株，待植株生长到苗期时取用。其中，每个试验材料分胁迫和非胁迫处理均种植30株，3次重复，分别记为T1、T2、T3和CK1、CK2、CK3。其中盐胁迫时用600mmol／LNaCl溶液作为盐试验胁迫剂,用去离子水作对照组，每次浇灌使用等体积溶液。盐胁迫试验胁迫剂配制参照附录D。第二步：实验条件整个试验过程在防水大棚中进行，适当光照(约1000µmol／m2／s)。第三步：第一次盐渗透胁迫—去渗透处理将培养好的植株移到防水大棚中，用含600mmol／LNaCl的Hoagland营养液浇灌，每两天1次，每次100mL;对照组用Hoagland营养液。盐处理10d后立即停止盐害胁迫，用Hoagland营养液反复淋洗20次，放置大棚中正常生长5d后，根据表5调查盐害级别和株数。第四步：第二次盐渗透胁迫—去渗透处理用含600mmol／LNaCl的Hoagland营养液浇灌处理7d后立即停止盐胁迫，用去离子水反复淋洗20次，放置大棚中正常生长5d后，按表5给出的盐害级别调查记录相对盐害数，开始整株采样测定植株总生物量。表5植株盐害级别判定级别受害情况1嫩叶无明屁盐害症状21／3嫩叶叶尖和叶缘呈失水萎蔫状31／2～2／3嫩叶叶尖和叶缘呈失水萎蔫状，并有焦枯42／3以上嫩叶叶尖和叶缘焦枯面积达1／35所有嫩叶叶尖和叶缘焦枯面积达1／2以下6植株叶全部枯死5NY/T2036—2011调查数据记录方式参见附录E。4.3.3.2结果计算按式(10)计算耐盐指数：()STI100MsVHN×=××∑……………………………………（10）式中：STI(SalinityToleranceIndcx)——耐盐指数；Ms——两次调查受害植株总数（株）；V——各盐害级数值；H——最高级数（级）；N——调查总株数（株）。计算结果精确到0.1。按式(11)计算干物质胁迫指数：DMTI100WcWtWc−=×……………………………………（11）式中：DMTI(DryMatterTolcranceIndex)——干物质胁迫指数；Wt——处理样植株干物质重，单位为千克（kg）；Wc——对照样植株干物质重，单位为千克(kg)。计算结果精确到0.1。按式(13)计算耐盐性综合指数：根据NY／T1320附录G的系数转换方式，把STI、DMTI值按隶属函数在[0～1]的区间上进行转换。00≤α1l121()ssXUXααα−=−α1Xs≤α2………………………………(12)40α2≤l式中：α1——min{Xs}；α2——max{Xs}；Xs