NYT 1751-2009 甜菜还原糖的测定

Ⅰ中华人民共和国农业行业标准NY/T1751—2009甜菜还原糖的测定Determinationofreducingsugarinsugarbeetroot2009-04-23发布2009-05-20实施ICS65．020B34华国国国中人民共和部发布NY/T1751—2009Ⅰ前言本标准由中华人民共和国国国部种植国管理司提出并归口。本标准起草单位：国国部甜菜品质监督检验测试中心、中国国国科学院甜菜研究所。本标准主要起草人：周芹、吴玉梅、耿贵、吴庆峰、倪洪涛、周建朝。NY/T1751—20091甜菜还原糖的测定1范围本标准规定了甜菜块根中还原糖含量的测定方法。本标准适用于甜菜块根中还原糖含量的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB／T6682分析实验室用水规格和试验方法GB／T10496—2002糖料甜菜3原理在沸腾条件下,还原糖与过量奥夫尼尔试剂反应生成相当量的Cu2O沉淀，冷却后加入盐酸使溶液呈酸隆，并使Cu2O沉淀溶解。然后加入过量碘溶液进行氧化，用硫代硫酸钠溶液滴定过量的碘，其反应式如下：硫代硫酸钠标准溶液空白试验滴定量减去其样品试验滴定量得到一个差值，由此差值便可计算出还原糖的量。4试剂与溶液除非另有说明，在分析中仅使用确认的分析纯试剂，试验用水应符合GB6682规定的三级水要求。4．1粉状碳酸钙(CaCO3)。4．2广泛pH试纸。4．3冰乙酸(CH3COOH)。4．4盐酸(HCl)。4．5盐酸溶液(6mol／L)：吸取50.0mL盐酸幔慢加入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。4．6盐酸溶液(1mol／L)：吸取84mL盐酸慢慢加入500mL水，用水定容至1000mL容量瓶中。4．7碘化钾溶液(250g／L)：称取碘化钾(KI)25.0g，溶于水，移人100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。4．8淀粉指示剂溶液(5g／L)：称取可溶性淀粉1.0g，加水10mL拌匀，缓慢加人190mL沸水，搅拌成透明液(或微沸2min，使溶液澄清)。此溶液于使用前配制。4．9重铬酸钾基准溶液：c(K2Cr2O7)＝0.005mol／L。称取1.4710g预先在120℃干燥至恒重的无水重铬酸钾,溶于水，移入1000mL容量瓶中，用水稀NY/T1751—20092释至刻度，摇匀。4．10乙酸锌溶液(219g／L)：称取21.9g乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]，溶于水，移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。4．11亚铁氰化钾溶液(106g／L)：称取10.6g亚铁氰化钾[KaFe(CN)6·3H2O]，溶于水，移人100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。4．12奥夫尼尔试剂：分别称取硫酸铜(CuSO4·5H2O)5.000g，酒石酸钾钠(C4H4O6KNa·4H2O)300.0g，无水碳酸钠(Na2CO3)10.0g及磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)50.0g，放入1000mL烧杯中，加入900mL左右水，放入沸水浴中使之溶解,并在沸水浴中保持加热杀菌2h,然后冷却至室温，移人1000mL容量瓶中,用水稀释至刻度,加入少量活性炭或硅藻土,摇匀，用中速定性滤纸过滤，贮存于棕色试剂瓶中。4．13硫代硫酸钠贮备溶液：称取硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O)20.00g及无水碳酸钠(Na2CO3)0.10g(或1mol／L氢氧化钠溶液1mL)，放入500mL烧杯中，用水(在正常大气压条件下煮沸30min，放凉)溶解，移入500mL容量瓶中，用水稀释至刻度,充分摇匀,贮存于棕色试剂瓶中，放置8d～14d后过滤备用。4．14硫代硫酸钠标准滴定溶液：c(Na2S2O3)＝0.0323mol／L。配制：吸取硫代硫酸钠贮备溶液(4．13)100.00mL，移入500mL容量瓶中，用无二氧化碳蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀，贮存于试剂瓶中。此溶液需要时配置，并用重铬酸钾标准溶液标定，校正其浓度。标定与校正：吸取重铬酸钾基准溶液[c(K2Cr2O7)＝0.005mol／L](4．9)20.00mL于250mL三角瓶中，加碘化钾溶液(4．7)10.00mL和盐酸溶液(4．5)10.00mL，将瓶盖严,摇匀,在暗处5min。用配制的硫代硫酸钠溶液滴定至黄绿色时，加淀粉指示剂溶液2mL，滴定至溶液突然由蓝色变为绿色时为滴定终点，记录消耗的Na2S2O3标准溶液体积，同时作空白试验。硫代硫酸钠标准溶液的浓度M1及其校正系数K1按公式(1)和(2)计算：11260.00520MVV×××＝…………………………………………(1)V1——滴定重铬酸钾标准溶液所用硫代硫酸钠溶液的体积，单位为毫升(mL)；V2——滴定空白溶液所用硫代硫酸钠溶液的体积，单位为毫升(mL)。110.0323MK＝…………………………………………(2)4．15碘溶液：c(I2)＝0.01615mol／L。称取碘化钾(无碘)20.00g,放入1000mL烧杯中，先溶解于水中,另称取纯碘4.1000g，溶解于碘化钾溶液，将溶液全部移入1000mL容量瓶中并加水至刻度，摇匀后，贮存于棕色试剂瓶中。5主要仪器设备5．1不锈钢刀。5．2高速组织捣碎机：转速12000r／min。5．3电热恒温水浴。5．41000W调温电炉和石棉网。5．5烧杯：容量100mL、250mL、500mL、1000mL。5．6漏斗：直径6cm、12cm。5．7定性滤纸：中速。5．8容量瓶：容量250mL、500mL、1000mL。NY/T1751—200935．9三角瓶：容量250mL。5．10试剂瓶：容量500mL、1000mL。5．11玻璃刻度吸管或移液器。容量1mL、2mL、5mL、10mL、20mL、50mL。5．12碱式滴定管：容量25mL；5．13分析天平：1000g，精确度0.01g；200g，精确度0.0001g。5．14秒表。6样品制备取样方法按照GB／T10496—2002中的5．1．3条款执行。将备检样品清洗干净，按照GB／T10496—2002中的4．1．2条款切削后,用不锈钢刀采用平分法将其逐渐分成1／16或1／32份,每个块根取一片,切成小碎块,要求小碎块的长、宽和高均不超过1cm,充分混匀，附卡片备检。每份试样量不少于1000g。称取上述试样100.00g，放入高速组织捣碎机中，用移液管移入100mL的水，以不低于12000r／min的转速将其捣成1：1匀浆。7分析步骤7．1试样溶液的制备：称取匀浆50.00g(相当于样品25.00g)，放入150mL烧杯中，含有机酸较多的材料加0.5g～2.0g粉状CaCO3(4．1)调至中性(广范试纸检试)。用水将样液全部转入250mL容量瓶中，并调整体积约为200mL。置80℃±2℃水浴保温30min，其间摇动数次，取出加入乙酸锌溶液(4．10)和亚铁氰化钾溶液(4．11)各5mL,冷却至室温后，加水接近刻度线，若液面有泡沫，可滴加数滴无水乙醇排除，最后用水稀释刻度。摇匀，过滤，得澄清试样溶液。7．2Cu2O沉淀生成：吸取20mL±0.05mL试样溶液(若样品还原糖含量较高时，可适当减少吸取的体积，补加水至20mL，使试样溶液中还原糖的量不超过20mg)，加入250mL三角瓶中。然后加入50mL±0.05mL奥夫尼尔试剂(4．12)，充分混合，用小漏斗盖上，在电炉上加热，使在2.5min左右沸腾，并继续准确煮沸5min，将三角瓶置于冷水中冷却至室温(不摇动)。7．3碘氧化反应：取出三角瓶，加入冰乙酸(4．3)1mL，在不断摇动下，准确加入5mL±0.05mL至30.00mL±0.05mL碘溶液(4．15)，其数量以确保碘溶液过量为准，用量筒沿三角瓶壁加入盐酸溶液(4．6)15mL，立即盖上小烧杯，放置约2min，不时摇动溶液。7．4滴定过量碘：用硫代硫酸钠标准滴定溶液(4．14)滴定过量的碘,滴定至溶液呈黄绿色出现时,加入淀粉指示剂2mL～3mL，继续滴定溶液至蓝色褪尽为止，记录消耗的Na2S2O3标准滴定溶液体积。7．5空白试验：按上述手续进行空白试验,除了不加试样溶液外,操作手续和应用的试剂均与测定时相同。8结果计算还原糖X，以还原糖的质量百分数表示，按公式(3)计算，计算结果精确到小数点后2位。()()134134550.00110025250KVVXKVVVV−−×××＝＝……………………(3)式中：K1——硫代硫酸钠标准滴定溶液[c(Na2S2O3)＝0.0323mol／L]校正系数；V3——空白试验滴定消耗的硫代硫酸钠标准滴定溶液体积，单位为毫升(mL)；V4——试样溶液样品滴定消耗的硫代硫酸钠标准滴定溶液体积，单位为毫升(mL)；NY/T1751—200940.001——系数(由mg换算成g)；25——试样的质量，单位为克(mL)；V5——所取试样溶液的体积，单位为毫升(mL)；250——试样浸提稀释后的总体积，单位为毫升(mL)。9精密度在重复条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于其算术平均值的5％。