NY 82.14-1988 果汁测定方法 柠檬酸的测定

NY82.14—1998中华人民共和国农牧渔业部部标准果汁测定方法柠檬酸的测定NY82.14—1988本标准等同采用国际果汁联盟IFJU分析法。No.22（1973）—柠檬酸的测定。1原理将各种有机酸以它们的钡盐形式分离以后，利用柠檬酸与重氮化的磺胺酸（即对－氨基苯磺酸）的特效反应，于420nm波长处比色测定。2试剂2．1柠檬酸（HG3—1108—1981）：分析纯。分子式：C6H8O7·H2O。2．2浓氨水（GB631—1977）：密度204=0.910，分析纯。2．3乙醇（GB679—1980）：分析纯，95%溶液。2．4冰乙酸（GB676—1978）：分析纯。2．5氢化钡（GB1617—1979）：分析纯，20%溶液。将20g纯的BaC12·2H2O用水溶解，定容至100mL。2．6洗涤液：将140mL蒸馏水与30mL（2.3）96%乙醇混合。2．7硫酸钠（京Q/HG10—2271—1982）：分析纯，7.1%溶液。将71g无水硫酸钠用水溶解，稀释至1L。2．8活性炭。2．9乙酸钠（GB694—1981）：分析纯，27%溶液。将270g无水乙酸钠用水溶解，稀释至1升。2．10亚硝酸钠（GB633—1977）：分析纯，2%溶液。将2g亚硝酸钠用水溶解，稀释至100mL，贮于棕色玻璃瓶中。2．11磺胺酸：分析纯，将1.5g磺胺酸溶解于50mL冰乙酸中，再用水稀释至250mL。剧烈摇荡。放置过夜。贮于棕色玻璃瓶中，长期稳定不变。2．12四乙酸铅（HG3—974—1976，分析纯）饱和溶液：在具塞玻璃瓶中，加入50g四乙酸铅（在加入时用冰乙酸润湿）和约250mL冰乙酸。摇荡。静置到未溶解的四乙酸沉降下来，得到透明的上清液。贮于棕色玻璃瓶中，长期稳定不变。上清液用完后，可加入冰乙酸再配制饱和溶液。2．13四乙酸铅（HG3—974—1976）：分析纯，1%溶液。吸取5.0mL四乙酸铅饱和溶液于250mL锥形瓶中，迅速加入50mL10%碘化钾溶液。在淀粉指示剂存在下，立刻用0.1M硫代硫酸钠溶液滴定。用量为αmL。2.25×1000取体积相当于mL四乙酸铅饱和溶液，用冰乙酸溶液（2.4）稀释至α1L。贮于棕色玻璃瓶中，长期稳定不变。注：试剂一定要很纯，在无柠檬酸存在时，用下述方法测定空白时，不应生成沉淀或产生颜色。2．14重氮盐溶液：在1mL亚硝酸钠溶液中(2.10)加入5mL磺胺酸溶液（2.11），中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施NY82.14—1998搅匀。3仪器3．1分光光度计3．2常用电动离心机。3．3离心管（硼硅酸耐热硬质玻璃）：40～50mL。3．4容量瓶：50mL、100mL。3．5移液管：1mL、5mL、10mL。4测定程序4．1标准曲线的绘制将250mg‐水合柠檬酸（2.1）溶解于7.1%硫酸钠溶液中，瓶稀释至100mL。将上述溶液，用7.1%硫酸钠溶液进一步稀释，其方法：5mL稀释至200mL5mL稀释至100mL5mL稀释至50mL10mL稀释至50mL20mL稀释至50mL这些稀释液相当于每升果汁含水量0.0625g、0.125g、0.250g、0.500g、1.0g‐水合柠檬酸（按4.2所述方法处理过的）。每份稀释液各取两份2.0mL于两个50mL锥形瓶中，标上记号a和b，再按4.3所述方法测定。曲线的零点是用2.0mL7.1%硫酸钠溶液置于锥形瓶a和b中（空白溶液α，用冰乙酸；试液b，用1%四乙酸铅溶液）。然后按4.3所述同样操作程序而得到的。连接所测定的各点，可得一条稍弯曲的曲线，曲线几乎通过坐标原点。4．2测定液的制备4．2．1吸移入5mL试液、1mL氨溶液、1mL氯化钡溶液于离心管中，用玻棒搅匀。两分钟后，加入15mL乙醇、搅匀。准确放置5min，离心3～4min。小心地轻轻倒出上清液，再按如下方法洗涤沉淀。用移液管吸取2mL洗涤液，边冲洗离心管上部，边转动。用顶端包有橡皮的玻棒搅拌，使沉淀与洗涤液混匀。用从2mL移液管里有力地喷出的洗涤液洗涤两次，以冲掉粘附于橡皮头上的沉淀。再次离心，轻轻倒出上清液，再如上述方法洗涤沉淀。4．2．2用大约10mL7.1%硫酸钠溶液，覆盖经洗涤的，为乙醇溶液润湿的沉淀。将离心管置于沸水浴中10min，搅拌。将含有硫酸钡沉淀的溶液，趁热转移至50mL容量瓶中，用硫酸钠溶液洗涤离心管。冷却。用硫酸钠溶液定容。转移至盛有0.2g活性碳的100mL锥形瓶中。放置5min，经细密滤纸过滤。该溶液含有稀释度为1:10的柠檬酸。4．3比色定量测定在标记a和b的两个50mL锥形瓶中，各吸移入10mL乙酸钠溶液。在a、b锥形瓶中各吸入20mL测定液（4.2）。往a瓶中加入2mL重氮盐溶液和5mL冰乙酸。往b瓶中加入2mL重氮盐溶液和5mL1%四乙酸铅溶液。立即将计时器准确定位在13min处。约5min后，把a和b瓶中的内溶物用折叠滤纸快速过滤。在即将到达13min前，将滤液转移至3cm比色皿中，a滤液作空白液，准确地在13min时，于420nm波长处测读吸光值。中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施NY82.14—1998注：若吸光值太高，可将4.1得到的测定液用7.1%硫酸钠适当稀释后，重复测定。结果计算时要考虑稀释度。5结果的表示和计算柠檬酸含量（以C6H8O7·H2O计）可以直接由标准曲线得到。一水合柠檬酸用g/L表示，保留两位小数。注：比色皿经常用络酸洗液清洗，因为经常使用时，比色皿内壁易吸附四乙酸铅，这层薄膜会导致不精确的结果。附加说明：本标准由北京农业工程大学负责起草。本标准主要起草人：张坤英。中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施中华人民共和国农牧渔业部1988－01－27发布1988－08－01实施