QB-T 3783-1999 食品添加剂 叶绿素铜钠盐

中华人民共和国国家标准食品添加剂叶绿素铜钠盐QB3783-1999FoodadditiveSodiumcopperchlorophyllin━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━本标准适用于有机溶剂提取蚕沙(即蚕粪)并经皂化、铜代所得的粉状叶绿素铜钠盐,在食品工业上作为着色用。分子式分子量铜叶绿酸三钠C34H31O6N4CuNa3724.17铜叶绿酸二钠C34H30O5N4CuNa2684.161技术要求1.1外观本品为墨绿色的粉末。易溶于水,略溶于醇和氯仿。水溶液透明、无沉淀。1.2项目和指标───────────────┬──────────项目│指标───────────────┼──────────pH│9.0～10.71％│E405nm≥│5681cm│消光比值│3.2～4.0总铜(Cu),％│4.0～6.0游离铜(Cu),％≤│0.025砷(As),％≤│0.0002铅(Pb),％≤│0.0005干燥失重,％≤│4.0硫酸灰分,％≤│36.0───────────────┴──────────2试验方法2.1鉴别2.1.1物理性状为墨绿色粉未。易溶于水,略溶于醇和氯仿,微溶于乙醚。偏酸性(pH6.5以下)。如果钙离子存在时则有沉淀析出。2.1.2吸收峰的测定取样品0.1g溶于水,并稀释至100ml。此液最大吸收峰为405nm与630nm,消光值之比E40jnm/E630nm为3.2～4.0。2.1.3铜钠离子试验()将样品灼烧灰化后溶于10m13N盐酸中,在水浴上加热使溶解,过滤后稀释至10mL,以此为试液,进行如下试验。a.取试液作焰色试验。开始呈绿色,后呈黄色。b.取试液5ml,加入0.1％二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液05mL时,产生褐红色沉淀。2.2pH用重蒸馏水把样品配成1％溶液,用酸度计测定其pH为9.0～10.7。2.3叶绿素铜钠盐百分消光系数及消光比测定2.3.1试剂和溶液磷酸盐缓冲液的制备：(pH7.5)取0.15M磷酸氢二钠(GB1263-77分析纯)21份与0.15M磷酸二氢钾(GB1274-77分析纯)4份混合。2.3.2仪器设备751分光光度计。仪器波长校正方法：标准液的配制：a.硫酸铜(CuSO4·5H2O)2Og用水溶解,加入硫酸lOml,用水稀释成1000ml,以水作空白对照。用1cm比色杯在分光光度计上测定：波长(nm)消光值6200.1125X6300.143→───×100=5％以下X为校正值。0.1436400.180b.铬酸钾(K2CrO4)(HG3-918-76)：分析纯,0.04g,以0.05N氢氧化钾溶液溶解,并以0.05N氢氧化钾溶液稀释成1000mL以水作空白对照,1cm比色杯在分光光度计上测定。波长(nm)消光值4000.396X404.70.288→───×100=5％以下X为校正值。0.2882.3.3测定手续称取经105℃干燥1小时的样品0.1g(称准至0.0002g)加水溶解,移入100ml容量瓶中加水至刻度摇刀。再将上述水溶液以pH7.5磷酸盐缓冲液,稀释100倍摇刀,即为0.001％溶液,用分光光度计测定,在15分钟以内以1cm的比色杯在405nm与630nm波长测定消光值(E),以缓冲液作空白对照。2.3.4计算公式2.3.4.11％E405nm=消光值×1000…………………………………(1)1cm()式中：1000──试样1mg折算到1g的系数。2.3.4.2E405nm消光比=─────……………………………(2)E630nm2.4总铜含量测定2.4.1试剂和溶液硝酸(GB626—78)：分析纯；硫酸(GB625─77):优级纯,比重1.835;柠檬酸铵-乙二胺四乙酸二钠溶液：柠檬酸铵20g及乙二胺四乙酸二钠(GB1401─78)5g溶于100mL水中；硫酸(GB625─77):2N溶液；氨水(GB631—77)：分析纯,1:1溶液；苯酚红(HG3—959─76):0.1％乙醇溶液；二乙基二硫代氨基甲酸钠(HG3—962─76)：O.1％溶液,贮存冰箱中可用一周；四氯化碳(GB688─79)：化学纯,或氯仿(GB682—78)：分析纯；铜标准试液：称取硫酸铜(GB665─78,分析纯)0.1964g,加2N硫酸溶解并定容至500ml,应用时再作10倍稀释,每毫升相当于铜lOμg。2.4.2操作方法2.4.2.1样品预处理称取样品0.lg(称准至0.0002g)于500ml凯氏烧瓶中,加水少许湿润,加硝酸15ml,放置片刻,沿瓶壁缓缓加入硫酸5mL,加热至瓶内液体出现棕色时,继续滴加硝酸至有机质全部分解,溶液应呈淡蓝色,放冷、加水50ml,继续加热除去残余硝酸,至产生白烟后维持5分钟,放冷、定容至lOOml,再将上述消化液稀释100倍备用,每毫升相当样品10μg。2.4.2.2测定方法精密吸取上述消化液20ml,置于125ml分液漏斗中。另精密吸取标准液O、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml(相当铜0、5、10、15、20、25μg)分别置于125ml分液漏斗中。各加2N硫酸至20ml,上述样品及标准液、空白液中各加柠檬酸铵-乙二胺四乙酸二钠溶液5ml及苯酚红指示剂3滴,混刀,以1:1氨水调至pH9(即由红变黄再变红),加入铜试剂1ml,准确加入四氯化碳或氯仿10ml,剧烈振摇2分钟,静置分层后,将四氯化碳或氯仿层用脱脂棉滤入2cm比色杯中,以0管调节零点,于波长440nm测消光值,绘制标准曲线。2.4.2.3计算A铜％=───────────────────×100……………………(3)120W×────×───×1000×1000100100式中：A──为样品测定微克数；W──称样重量,g。2.5游离铜测定2.5.1试剂和溶液盐酸(GB622—77)：lN溶液；其余同总铜测定试剂。2.5.2操作方法2.5.2.1样品处理：准确称取样品0.1g,加水约50ml溶解后,以lN盐酸调至pH4.0,定容至100ml过滤。2.5.2.2测定方法：同总铜。2.5.2.3计算：A×100游离铜％=────────────…………………………………(3)V2W×───×1000×1000V1式中：W──称样重量,g;V1──定容体积,mLV2──取样体积,mL;A──样品测定微克数。2.6砷含量测定2.6.1试剂和溶液盐酸(GB622─77)：分析纯；硝酸(GB626—78)：分析纯;硫酸(GB625─77)：优级纯,1:1溶液；碘化钾(GB1272—77)：分析纯,16.5％溶液;氯化亚锡(GB638—78)：分析纯,40％盐酸溶液；无砷金属锌(HGB3073─59):分析纯；乙酸铅棉花按GB603─77《制剂及制品制备方法》配制;砷标准溶液按GB602—77《杂质标准溶液制备方法》配制,稀释100倍后使用。1ml相当于0.001mg砷。2.6.2测定手续称取样品5g(准确至0.1g)放入500ml凯氏烧瓶中,加水适量使之溶解,加硝酸15ml,放置片刻,加硫酸10mL,玻珠数粒,加热至瓶中液体开始变成棕色时,不断沿瓶壁滴加硝酸至溶液呈蓝色或蓝绿色,放冷,加水约50ml,再加热至冒白烟5～10分钟后,放冷、转入100m1容量瓶中,冷后加水至刻度,摇刀,备用。精密吸取上述样品消化液50ml(相当原样品2.5g)置于150ml锥形瓶中。另精密吸取砷标准溶液0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL(相当砷0、2、4、6、8、10μg)分别置于150ml锥形瓶中。加水至40mL,并加1:1硫酸10mL于样品消化液、试剂空白液及砷标准溶液中,各加16.5％碘化钾溶液3mL,酸性氯化亚锡溶液0.5mL,混刀,静置15分钟。加入锌粒5g,立即分别塞上装有乙酸铅棉花的玻璃弯管,并使弯管尖端插入盛有银盐溶液4mL的10mL具塞刻度试管内,室温下反应1小时后取下试管,加氯仿补足4mL,再转入1cm比色杯中,以0管调节零点,于波长540nm测消光值,绘制标准曲线比较。2.6.3计算A×1000砷(mg/kg)=───────……………………………………(5)V2W×──×1000V1式中:A──测定用样品消化液中的砷含量,μg;W──样品重量,g;V1──样品消化液的总体积,mL;V2──测定用样品消化液的体积,mL。2.7铅含量测定2.7.1试剂和溶液氨水(GB63l—77),分析纯,1:1溶液；盐酸(GB622—77)：6N溶液；苯酚红(HG3—959—76)：0.1％乙醇溶液；柠檬酸铵:分析纯,20％溶液；盐酸羟胺(HG3—967—76)：化学纯,20％溶液；氰化钾：分析纯,10％溶液；氯仿(GB682－78)：分析纯；硝酸(GB626─78)：分析纯,1％溶液；双硫腙(HGB3343─60)：分析纯,称取双硫腙50mg,加氯仿至100ml。以此为贮存液,临用时取此液4.5mL,用氯仿稀释至100ml,此液在波长510nm分光光度计测定其透光率在70％左右。双硫腙应用液配制(70％透光率):10(2-1g70)1.55V=────────=────………………………………(6)EE式中：V──双硫腙贮存液毫升数；E──双硫腙贮存液在波长510nm的消光值。铅标准溶液(按GB602─77配制).稀释10倍后使用。1ml相当于0.01mg。2.7.2测定手续精密吸取上述砷测定时制备样品消化液20ml(相当于样品1g)及相同量的试剂空白液,分别置于125ml分液漏斗中,各加水至20ml,另精密吸取铅标准溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5m1(相当铅毫0、1、2、3、4、5μg)分别置于125ml分液漏斗中,各加1％硝酸至20ml,于样品消化液、试剂空白液及铅标准溶液中各加20％柠檬酸铵溶液2ml,20％盐酸羟胺溶液1ml,苯酚红指示液2滴,用氨水调节至红色,再各加10％氰化钾溶液2ml,混刀。各正确加入双硫腙应用液5ml,剧烈振摇1分钟,静置分层后,经脱脂棉将氯仿层滤入1cm比色杯中,以0管调节零点,于波长510nm测消光值,绘制标准曲线比较。2.7.3计算A×1000铅(mg/kg)=──────────…………………………………(7)V2W×───×1000V1式中：A──样品中的铅含量,μg;W──样品重量,g;V1──样品定容体积,mlV2──取样品消化液体积,ml。2.8干燥失重测定2.8.1测定手续取试样1g(称准至0.0002g)置于105℃烘箱中烘4个小时,冷却称重,反复至恒重。2.8.2计算G1-G2干燥失重％=─────×100……………………………(8)G式中：G1──皿加试样重,g；G2──干燥后皿加试样重,g;G──试样重,g。2.9硫酸灰分测定2.9.1试剂和溶液硫酸(GB625─77):分析纯。2.9.2测定手续精确称取样品1g(称准至0.01g)置已知重量的坩锅中,灼烧炭化,放冷,小心加入硫酸0.5～1mL,使之仅湿润,灼烧至干,然后移入高温炉中加热800℃至完全灰化为止,恒重。2.9.3计算G硫酸灰分％=──×100……………………………………………………(9)W式中：G──灰分重量,g;W──样品重量,g。3验收规则3.1本品应由生产厂的技术检验部门进行检验,生产厂应该保证所有出厂的产品均符合本标准的要求,每批出厂的产品都应附有质量证明书。3.2使用单位有权按照本标准规定的检验规则和试验方法对所收到的产品质量进行检验,检验其指标是否符合本标准的要求。3.3取样方法：每批样品以五瓶法采样。每瓶中取10g样品,将选取的试样迅速混刀,分装于两个清洁、干燥、有磨口塞的广口瓶中。瓶上粘贴标签注明：生产厂名称、产品名称、批号、取样日期。一瓶送化验室分析,一瓶密封保存6个月,以备仲裁分析用。3.4如果检验中有一项指标不符合本标准时,应重新自两倍量的包装瓶中选取样品进行核验,产品重新检验的结果,即使只有一项指标不符合本标准要求