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书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２０３０—２００７按实蝇属鉴定方法犐犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳犃狀犪狊狋狉犲狆犺犪犛犮犺犻狀犲狉２００７１２２４发布２００８０７０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前 言 本标准的附录Ａ、附录Ｂ、附录Ｃ、附录Ｄ、附录Ｅ为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国广东出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：王章根、陈定虎、管维、杨国海、莫我杰、曹小茂、黄昕恒。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２０３０—２００７按实蝇属鉴定方法１ 范围本标准规定了按实蝇属（犃狀犪狊狋狉犲狆犺犪Ｓｃｈｉｎｅｒ）鉴定方法。本标准适用于进口按实蝇寄主植物（参见附录Ａ）及其果实时对按实蝇属的鉴定。２ 术语和定义下列术语和定义适用于本标准，其他分类学术语参见附录Ｂ。２．１颊 犵犲狀犪犲头部侧面，复眼以下伸展至外咽缝的区域。２．２后头 狅犮犮犻狆狌狋头部的整个后面。２．３颜面 犳犪犮犲头部的前面，复眼间介于触角和口上片之间的区域。２．４肩板鬃 狊犮犪狆狌犾犪狉犫狉犻狊狋犾犲狊位于中胸背板前缘的鬃的统称。２．５前背侧鬃 犪狀狋犲狉犻狅狉狀狅狋狅狆犾犲狌狉犪犾犫狉犻狊狋犾犲狊位于肩胛与背侧板胛之间近中部的一对鬃。２．６后背侧鬃 狆狅狊狋犲狉犻狅狉狀狅狋狅狆犾犲狌狉犪犾犫狉犻狊狋犾犲狊位于背侧板胛端部的一对鬃。２．７前翅上鬃 犪狀狋犲狉犻狅狉狊狌狆狆犪犪犾犪狉犫狉犻狊狋犾犲狊位于中胸背板侧缘，前翅翅基正上方的一对鬃。２．８后翅上鬃 狆狅狊狋犲狉犻狅狉狊狌狆狆犪犪犾犪狉犫狉犻狊狋犾犲狊位于中胸背板后侧缘，翅基之上的一对鬃。２．９翅内鬃 犻狀狋狉犪犪犾犪狉犫狉犻狊狋犾犲狊位于中胸背后侧角，缝后侧黄色线条上的一对鬃。２．１０小盾前鬃 狆狉犲狊犮狌狋犲犾犾犪狉犫狉犻狊狋犾犲狊小盾片前方，近盾片后缘的一对鬃。１犛犖／犜２０３０—２００７２．１１小盾鬃 狊犮狌狋犲犾犾犪狉犫狉犻狊狋犾犲狊小盾片上的一对或两对鬃；又称小盾端鬃。３ 原理按实蝇属（犃狀犪狊狋狉犲狆犺犪）隶属双翅目（Ｄｉｐｔｅｒａ）、实蝇科（Ｔｅｐｈｒｉｔｉｄａｅ）、实蝇亚科（Ｔｒｙｐｅｔｉｎａｅ），长尾实蝇族（Ｔｏｘｏｔｒｙｐａｎｉｎｉ）。主要以幼虫随被害果实作远距离传播，有时蛹也可随果实的包装物和运输工具或寄主植物所附土壤传播。按实蝇属的形态特征、寄主植物、传播途径及生物学特性为制定鉴定方法提供了依据。４ 仪器、用具和试剂４．１ 仪器与用具体视显微镜、生物显微镜、干燥箱、冰箱、温湿度计、量筒、烧杯、培养皿、小型干燥器、指形管、剪刀、解剖刀、解剖针、昆虫针、载玻片、标签纸、三级台、三角纸、酒精灯、玻璃棉、养虫杯、养虫箱、防虫网罩、白瓷盘。４．２ 试剂１０％氢氧化钠（或１０％氢氧化钾）溶液、封片胶、苯酚、二甲苯、７５％乙醇、丙三醇、水合三氯乙醛、阿拉伯树胶粉、蒸馏水、保存液。４．３ 试剂的配制４．３．１ １０％氢氧化钠（或１０％氢氧化钾）溶液的配制称取氢氧化钠（或氢氧化钾）１０ｇ置于２００ｍＬ烧杯中，加入约８０ｍＬ的蒸馏水，搅拌溶解后再加蒸馏水定容至１００ｍＬ。４．３．２ 封片胶的配制称取阿拉伯树胶粉３０ｇ，加入５０ｍＬ蒸馏水（最好是温水以加速溶解）。溶解后，加入２００ｇ水合三氯乙醛及２０ｍＬ丙三醇，置于５５℃～６０℃的干燥箱内。１ｄ后，用玻璃棉过滤（过滤时仍置于５５℃～６０℃的干燥箱内进行）。４．３．３ 保存液的配制量取７５％乙醇１００ｍＬ，加入１ｍＬ丙三醇。５ 实验室鉴定５．１ 鉴定前的培养方法５．１．１ 卵或幼虫的培养将现场采集的卵和幼虫部分个体制成鉴定标本，其余个体继续用原寄主果实培养。具体的培养方法是：将带有卵或幼虫的寄主果实放在小号白瓷盘里，然后将小号白瓷盘放在装有自来水的大号白瓷盘内，再用防虫网罩住小号白瓷盘，罩的下方边缘浸没于大号白瓷盘内的水中，置于温度为２２℃～２８℃，湿度为５０％～９０％的环境中培养５ｄ～１０ｄ至幼虫老熟。５．１．２ 蛹的培养取一盛有半干湿（含水量约５％）洁净细砂的养虫杯，将现场检疫收集的或室内培养得到的蛹埋入距细砂表面３ｃｍ～５ｃｍ处（若是老熟幼虫则可直接将其置于细砂表面，幼虫自己会钻入砂中化蛹），然后置于养虫箱中培养，培养环境温度为２２℃～２８℃，湿度为５０％～９０％。５．１．３ 初羽化成虫的饲养成虫羽化后，悬挂相应寄主果实切片在养虫箱内供其取食，待成虫斑纹的色泽和大小稳定后（约需５ｄ），收集成虫置于冰箱冷冻层０．５ｈ～１ｈ，即可杀死成虫。２犛犖／犜２０３０—２００７５．２ 标本的预处理５．２．１ 成虫回软处理如果成虫虫体已干硬，在制作标本前应回软处理：取一小型干燥器，加入干净细砂约２ｃｍ，加水至漫过细砂表面约１ｃｍ，并滴加数滴苯酚以防标本腐烂，上层放待回软的成虫标本，密闭１ｄ即可。５．２．２ 成虫标本制备取００号昆虫针，借助三级台插入三角纸尖角近处，然后将针尖端从成虫中胸的腹面插入，再用４号昆虫针插入三角纸另一端两个角中央近边缘处，插上相应的标签。５．２．３ 成虫外生殖器封片标本的制作用解剖刀切取成虫标本的腹部，置于盛有１０％氢氧化钠（或１０％氢氧化钾）适量溶液的小烧杯中，浸泡１２ｈ（或煮沸３ｍｉｎ）后取出，用蒸馏水洗净，在体视显微镜下，用解剖针挑取所需的部位（阳茎或产卵器），制成玻片标本。５．２．４ 幼虫封片标本制备用昆虫针在幼虫体壁上刺戳数个小孔，置于盛有１０％氢氧化钠（或１０％氢氧化钾）适量溶液的小烧杯中，浸泡１２ｈ（或煮沸３ｍｉｎ）后取出，用解剖针将幼虫体中的残留物挤出，用蒸馏水洗净，在体视显微镜下挑取口钩、前气门和后气门等部位，制成玻片标本。５．３ 鉴定特征５．３．１ 实蝇科（犜犲狆犺狉犻狋犻犱犪犲）鉴定特征翅Ｓｃ脉突然朝前弯曲成近９０°，外弯段变弱，终于前缘脉的断裂处，Ｒ１脉的背侧有小鬃；ｃｕｐ室具一尖角延伸。５．３．２ 实蝇亚科（犜狉狔狆犲狋犻狀犪犲）鉴定特征ｃｕｐ室与ｂｍ室近等宽。后头鬃列均细长且通常为黑色。上前侧片为一缝所分离。中胸背板具肩板鬃。具３个受精囊。５．３．３ 长尾实蝇族（犜狅狓狅狋狉狔狆犪狀犻狀犻）鉴定特征触角芒短毛型。鬃序基本完全，但单眼鬃退化或缺如，背中鬃若存在则位置极后，接近翅上鬃之水平；上侧背片无长毛；翅Ｒ４＋５脉背面被小鬃至ｒ－ｍ横脉之后；Ｍ脉端部明显呈弧形向前弯曲，末端与Ｒ４＋５脉接近；ｃｕｐ室的后端角长度中等；雄性阳茎端具Ｔ形端骨片；雌性产卵器基节发达，其基部具翼状侧缘，翻转膜基部背面具大的鳞状齿。５．３．４ 按实蝇属的鉴定特征５．３．４．１ 成虫特征（参见附录犅、犆）５．３．４．１．１ 头部通常为橙色，但头顶、颊和后头有时褐色，颜面隆线常甚发达；单眼鬃细小呈毛状，上侧额鬃２对，下侧额鬃３对～４对；触角显短于颜，第３节末端圆钝，角芒短毛型。５．３．４．１．２ 胸部橙黄色到暗褐色，胸部色条和小盾片黄色；具肩鬃１，前背侧鬃１，后背侧鬃１，前翅上鬃１，后翅上鬃１，翅内鬃１，背中鬃１，小盾鬃２。５．３．４．１．３ 翅大多数种类有３条翅带：短的前缘带（Ｃ），此带终止于Ｒ１脉；“Ｓ”形带，位于翅中部；“Ｖ”形带，位于翅的外缘，由端前横带和后端横带组成；３条带之间常分离或相连接。Ｍ脉的端段强烈向前弯曲，ｃｕｐ室与ｂｍ室近等宽，ｃｕｐ室的后端角的长度中等，短于Ａ１＋ＣｕＡ２脉段。５．３．４．１．４ 腹部不具柄。雄虫背针突短、扁；雌虫产卵器管状，通常长形；翻转膜基部膨大，其背面有鳞状小齿；具３个受精囊。３犛犖／犜２０３０—２００７５．３．４．２ 幼虫特征（３龄）触角感觉器基节阔而坚硬，端节小、成圆锥形；下颚感觉器大而扁平，有两组界线明显，由小褶皮围绕的感器；口前叶愈合，在口钩上方形成一硬脊；口脊６条～１７条，脊列短，后缘锯齿状或非锯齿状；副板细小，壳形，通常为非锯齿状。口钩均无端齿。前气门淡琥珀色，中央凹陷，在突起的基部有９个～３７个长而硬的指突。肛叶大而突起，不具沟陷、具沟陷或呈双叶状；有时表面具清晰的刻纹。５．３．４．３ 重要种类形态特征参见附录Ｄ、附录Ｅ。６ 鉴定结果判定以成虫形态特征为主要鉴定依据，符合５．３．４．１特征描述的可鉴定为按实蝇属。成虫以外虫态的形态特征描述仅供参考。７ 标本保存７．１ 成虫标本及玻片标本的保存将制好的成虫标本或相应的玻片标本置于干燥箱中干燥数日，然后移入标本柜中保存，保存过程注意防潮和防虫。７．２ 幼虫、蛹标本的保存将采集到的幼虫和蛹用蒸馏水清洗后，投入６０℃±５℃热水中浸泡杀死，置于室温下冷却，再将冷却的幼虫（或蛹）置于保存液中保存。４犛犖／犜２０３０—２００７附 录 犃（资料性附录）按实蝇属部分寄主植物表犃．１ 按实蝇属部分寄主植物Ａｎａｃａｒｄｉｃｅａｅ 漆树科Ａｎｎｏｎａｃｅａｅ 番荔枝科Ｃｏｍｂｒｅｔａｃｅａｅ 使君子科Ｅｂｅｎａｃｅａｅ 柿科Ｆｌａｃｏｕｒｔｉａｃｅａｅ 大风子科Ｊｕｇｌａｎｄａｃｅａｅ 胡桃科Ｌａｕｒａｃｅａｅ 樟科Ｍｏｒａｃｅａｅ 桑科Ｍｙｒｔａｃｅａｅ 桃金娘科Ｏｘａｌｉｄａｃｅａｅ 酢浆草科Ｐｕｎｉｃａｃｅａｅ 石榴科Ｒｏｓａｃｅａｅ 蔷薇科Ｒｕｂｉａｃｅａｅ 茜草科Ｒｕｔａｃｅａｅ 芸香科Ｐｏｌｙｇｏａｃｅａｅ 蓼科Ｓａｐｉｎｄａｃｅａｅ 无患子科Ｓａｐｏｔａｃｅａｅ 山榄科犃狀犪犮犪狉犱犻狌犿Ｌ． 腰果属犕犪狉犵犻犳犲狉犪Ｌ． 芒果属犛狆狅狀犱犻犪狊Ｌ． 槟榔青属犃狀狀狅狀犪Ｌ． 番荔枝属犜犲狉犿犻狀犪犾犻犪Ｌ． 榄仁树属犇犻狅狊狆狔狉狅狊Ｌ． 柿树属犇狅狏狔犪犾犻狊Ｅ．Ｍｅｙ． 锡兰莓属犑狌犵犾犪狀狊Ｌ． 胡桃属犘犲狉狊犲犪Ｍｉｌｌｅｒ 鳄梨属犉犻犮狌狊Ｌ． 无花果属犈狌犵犲狀犻犪Ｌ． 番樱桃属犘狊犻犱犻狌犿Ｌ． 番石榴属犛狔狕狔犵犻狌犿Ｇａｅｒｔｎ 薄桃属犃狏犲狉狉犺狅犪Ｌ． 阳桃属犘狌狀犻犮犪Ｌ． 石榴属犆狔犱狅狀犻犪Ｌ． 榀檗属犈狉犻狅犫狅狋狉狔犪Ｌｉｎｄｌ． 枇杷属犉狉犪犵犪狉犻犪Ｌ． 草莓属犘狉狌狀狌狊Ｌ． 李属犕犪犾狌狊Ｍｉｌｌｅｒ 苹果属犘狔狉狌狊Ｌ． 梨属犚狌犫狌狊Ｌ． 悬钩子属犆狅犳犳犲犪Ｌ． 咖啡属犆犪狊犻犿犻狉狅犪Ｌ．＆Ｌｅｘ． 香肉果属犆犻狋狉狌狊Ｌ． 柑橘属犉狅狉狋狌狀犲犾犾犪Ｓｗｉｎｇｌｅ 金橘属犆狅犮犮狅犾狅犫犪Ｐ．Ｂｒｏｗｎｅ 海葡萄属犔犻狋犮犺犻Ｓｏｎｎ． 荔枝属犆犺狉狔狊狅狆犺狔犾犾狌犿Ｌ． 金叶树属犕犪狀犻犾犽犪狉犪Ａｄ． 铁线子属犘狅狌狋犲狉犻犪Ａｕｂｌｅｔ 桃榄属５犛犖／犜２０３０—２００７表犃．１（续）Ｓｔｅｒｃｕｌｉａｃｅａｅ 梧桐科Ｖｉｔａｃｅａｅ 葡萄科Ｃａｒｉｃａｃｅａｅ 番木瓜科Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ 葫芦科Ｐａｓｓｉｆｌｏｒａｃｅａｅ 西番莲科Ｓｏｌａｎａｃｅａｅ 茄科犜犺犲狅犫狉狅犿犪Ｌ． 可可树属犞犻狋犻狊Ｌ． 葡萄属犆犪狉犻犮犪Ｌ． 番木瓜属犆犻狋狉狌犾犾狌狊Ｎｅｃｋ 西瓜属犆狅犮犮犻狀犻犪Ｗ．＆Ａ． 红瓜属犆狌犮狌犿犻狊Ｌ． 香瓜属（甜瓜）犆狌犮狌狉犫狌犪Ｌ． 南瓜属犔犪犵犲狀犪狉犻犪Ｓｅｒ 葫芦属犕狅犿狅狉犱犻犮犪Ｌ． 苦瓜属犘犪狊狊犻犳犾狅狉犪Ｌ． 西番莲属犆犪狆狊犻犮狌犿Ｌ． 辣椒属犔狔犮狅狆犲狉狊犻犮狌犿Ｍ． 番茄属犛狅犾犪狀狌犿Ｌ． 茄属６犛犖／犜２０３０—２００７附 录 犅（资料性附录）按实蝇属成虫特征图犅．１ 头部（前面观）（仿犠犺犻狋犲等）图犅．２ 胸部（背面观）（仿犠犺犻狋犲等）７犛犖／犜２０３０—２００７图犅．３ 翅（仿犠犺犻狋犲等）图犅．４ 雌成虫产卵管构造（腹面观）（仿犠犺犻狋犲等）８犛犖／犜２０３０—２００７附 录 犆（资料性附录）实蝇科重要实蝇属检索表１ 触角显长于颜，第３节至少３倍于宽，角芒裸。鬃序退化不全。缺少单眼鬃、单眼后鬃、肩鬃、沟前鬃、背中鬃和腹侧鬃。翅上３条径脉（Ｒ１、Ｒ２＋３和Ｒ４＋５）极为接近，翅斑较简，代表型仅包括前缘带和臀斑各１条，ｃｕｐ室的后端角狭长，至少为Ａ１＋ＣｕＡ２脉段长度的１．５倍。腹部第５背板具腺斑１