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书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２９５９—２０１１昆虫常规检疫规范犚犲狇狌犻狉犲犿犲狀狋犳狅狉狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲狅犳犻狀狊犲犮狋２０１１０５３１发布２０１１１２０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前 言 本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局。本标准主要起草人：廖力、吴长坤、乐海洋、徐淼锋、张卫东、喻国泉。Ⅰ犛犖／犜２９５９—２０１１昆虫常规检疫规范１ 范围本标准规定了出入境昆虫的常规检疫方法以及昆虫灭活、标本制备、鉴定、结果复核、样品保存等方面的要求和规范。本标准适用于出入境可能携带或传播昆虫的植物、植物产品、土壤、包装材料、运输工具或其他生物、物品或材料中昆虫的常规检疫。２ 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ２０４７８ 植物检疫术语３ 术语和定义ＧＢ／Ｔ２０４７８界定的以及下列术语和定义适用于本文件。３．１昆虫 犻狀狊犲犮狋所有昆虫组成节肢动物门昆虫纲（Ｉｎｓｅｃｔａ），具有如下主要特征：———体躯的环节分别集合组成头、胸、腹三个体段；———头部为感觉各取食的中心，具有３对口器附肢和一对触角，通常还有复眼及单眼；———胸部是运动的中心，具有３对足，一般还有２对翅；———腹部是生殖中心，其中包含着生殖系统和大部分内脏，无行动用的附肢，但多数有转化成外生殖器的附肢；———从卵中孵出来的昆虫，在生长发育过程中，通常要经过一系列显著的内部及外部体态上的变化，才能转变为性成熟的成虫。这种体态上改变称为变态。３．２检疫（管制）物 狉犲犵狌犾犪狋犲犱犪狉狋犻犮犾犲认为需要采取植物检疫措施的任何能藏匿或传播有害生物的植物、植物产品、储存场所、包装物、运输工具、集装箱、土壤以及其他生物、物品或材料。３．３寄主植物 犺狅狊狋狆犾犪狀狋寄生物（特指寄生性昆虫）赖以生存的植物。４ 原理根据检疫需要及检疫物类别，遵循昆虫不同的生物学特性、发生规律以及寄主植物特点进行检疫。１犛犖／犜２９５９—２０１１５ 检测仪器、用具和试剂５．１ 检测仪器体视显微镜、软Ｘ光机、光照培养箱。５．２ 用具手持放大镜、手电、毛刷、扦样袋、指形管、柴刀或斧头、锯子、规格筛、白瓷盘、黑底玻璃盘、镊子、解剖针、解剖刀、养虫笼、养虫杯、培养皿、三角瓶、玻片、专用毒气瓶、昆虫针（００，０，１，２，３，４，５各种型号）、三级台、标签纸、回软缸、展翅板、整姿台、透明纸等。５．３ 试剂乙醇、碘化钾、碘酒、氢氧化钠、高锰酸钾、氯化钠、二甲苯、冰醋酸、甲醛、丙三醇、加拿大树胶等。６ 检疫物类别６．１ 植物类栽培植物、野生植物及其种子、种苗和其他繁殖材料等。包括植株、苗木、果实、种子、砧木、接穗、插条、叶片、芽体、块根、块茎、鳞茎、球茎、花粉、细胞培养材料等。６．２ 植物产品类来源于植物未经加工或已经加工的产品，包括粮谷类、豆类、棉麻类、油料类、纤维类、烟草类、茶叶等饮料原料类、糖和制糖原料类、植物性调料类、饲料类、木材类、竹藤草柳类、籽仁干果类、干菜类、鲜果类、蔬菜类、中药材类、饲料类、植物性包装及铺垫材料类等。６．３ 其他检疫物类土壤类、废纸类、植物性有机肥料类、植物性废弃物类、植物性下脚料类、动物干品类、装载容器类、包装材料类、运输工具类等。７ 常规检疫方法７．１ 直接检查７．１．１ 总则根据检疫物类别，携带合适的用具，采取适当的方法，对进出境检疫物实施昆虫检疫。用肉眼或手持放大镜直接检查有无昆虫，或用挑检、抖动、击打、剖检、剥开等不同方法进行检查。检疫时注意观察物品有无为害状，如腐烂、虫孔、虫瘿、蛀孔、排泄物以及白蚁、蚂蚁为害形成的泥线、泥被等；注意检查寄主植物最易被浸染的地方；注意检查检疫物最易藏带昆虫的地方。针对不同检疫物采用以下方法。７．１．２ 植物、种苗等繁殖材料的检疫方法植物、种苗等繁殖材料的检疫主要注意检查叶片有无症状，如虫孔、卷叶、虫瘿、潜道等，查看叶鞘、芽缝处等较隐蔽的地方以及根部有无根瘤等为害状。２犛犖／犜２９５９—２０１１７．１．３ 水果、蔬菜、瓜类等植物的检疫方法水果、蔬菜、瓜类的检疫主要注意观察表面有无虫孔或水渍状腐烂，注意检查梗洼、胴部、果蒂、果脐等部位有无害虫隐藏。７．１．４ 植物产品及其他检疫物的检疫方法用肉眼或手持放大镜直接检查样品有无昆虫，或根据需要将样品倒入白瓷盘或黑底玻璃盘，用镊子或挑针进行挑选检查，豆类的检查要特别注意观察表面是否有虫卵或半透明的“小窗”（老熟幼虫或蛹存在的标志）。对不能确定否为昆虫或昆虫残肢疑似物放入培养皿在体视镜下镜检。７．１．５ 木材、竹藤草柳等的检疫方法木材、竹藤草柳等的检疫主要注意检查有无虫孔、排泄物等，敲击木材听声音是否空洞，竹藤柳类可根据韧性来判断，被害藤料韧性差，易折断；击拍藤、草、柳制品，使隐藏的害虫跌落，必要时用工具进行剖检。７．１．６ 包装物等的检疫方法包装物等的检疫主要注意检查袋的内壁、包角、包缝处等易藏带昆虫的地方，也可采用击拍的方式使隐藏的害虫跌落。７．１．７ 集装箱等运输工具的检疫方法集装箱等运输工具的检疫主要注意检查角落、缝隙处；检查温度较高的昆虫喜欢栖息的地方。７．２ 过筛检查按样品颗粒大小，选用合适孔径规格筛，取适量样品，用回旋法过筛，回旋次数一般不少于２０次，把筛上物和筛下物分别倒入白瓷盘或黑底玻璃盘进行挑选检查。一般粮谷类、豆类、干果类、植物性调料类、茶叶等饮料原料类、中药材类、土壤等适用于此方法。７．３ 剖开检查当样品有虫孔、排泄物等为害状及其他可疑症状，或怀疑可能带有隐蔽性害虫时进行剖开检查。一般木材类、竹藤柳类、粮谷类、中药材类、豆类、水果瓜菜类、动物干品类等适用于此方法。７．４ 染色法检查用不同的化学药品进行染色，根据蛀入孔的颜色与寄生物颜色不同区分有无害虫。方法如下：将样品放入１％碘化钾溶液或２％碘酒溶液中，使样品全部沉浸在染色液内，并轻轻晃动，使样品表面与染色液充分接触。２ｍｉｎ后，将样品取出放在０．５％氢氧化钠或氢氧化钾溶液内固定１ｍｉｎ，然后用清水漂洗３０ｓ，蛀入孔显褐色至深褐色，挑取有虫孔的样品进行剖检。一般粮谷类、豆类钻蛀性害虫适用于此方法。７．５ 比重法（漂浮法）检查用不同溶液的不同比重区分有无害虫。方法如下：将样品放入清水或氯化钠溶液中，样品与溶液的容积比为１∶５，充分搅拌后，静置８ｈ～１２ｈ，捞取上层漂浮物进行直接检查或解剖检查。一般粮谷类的钻蛀性害虫、土壤中害虫、蔬菜、干菜类及糖类、制糖原料类的蚜虫、螨类等适用于此方法。３犛犖／犜２９５９—２０１１７．６ 软犡光机透视检查将样品摊成薄薄的一层，放在软Ｘ光机工作台上或铺在胶带纸上，通过透视观察或拍摄相片，将带虫的样品挑出，再进行解剖。一般粮谷类、豆类的钻蛀性害虫适用此方法。７．７ 饲养检查当检查到幼虫或怀疑有卵或幼虫的样品时用此方法。常规方法如下：将适量样品放置在光照培养箱，温度设置在２５℃左右饲养３ｄ～５ｄ或更长时间，再进行检查。进行昆虫饲养时要注意防止昆虫逃逸。一般水果类、蔬菜类、苗木类、豆类、粮谷类、中药材类适用于此方法。针对不同的昆虫种类及寄主类别，昆虫的饲养方法不尽相同，具体方法可参照不同种类昆虫的检疫鉴定方法标准。８ 昆虫样本的灭活及防逃逸的措施８．１ 昆虫常规灭活方法８．１．１ 热处理方法灭活可采用微波、热水处理等方式进行昆虫灭活，要注意温度与时间的掌握，以杀死昆虫又不至于破坏昆虫的完整性为准。８．１．２ 毒气灭活将活的昆虫放入专用的昆虫毒气瓶以杀死昆虫，使用时要注意防护措施，保证人体安全。８．１．３ 酒精灭活将活的昆虫放入７５％或更高浓度的酒精浸泡直至杀死昆虫。８．２ 防止昆虫逃逸的措施任何时候，都要注意做到严防昆虫逃逸，现场截获的昆虫要及时放入密封瓶或密封袋，有条件的情况下要及时采取适当的方法灭活昆虫。对截获的活的幼虫要连同寄主或检疫物放入密封的样品袋内及时送往实验室以便进一步饲养。对携带有昆虫的样品要放入耐受性好、密闭、防渗漏、具有防交叉污染的样品袋中，苗木要放入专门的防虫网箱。样品在传递过程中要能够保持昆虫原有的完整性及样品的稳定性，防止昆虫逃逸、扩散，确保样品真实、安全、及时传递到实验室。９ 昆虫标本的制作与保存９．１ 针插标本制作成虫一般采用针插法进行标本制作。方法如下：选用合适的昆虫针插入昆虫体驱的适当部位，通常鞘翅目昆虫插在右翅的前端，在中后足之间穿出来；半翅目的昆虫插在中胸小盾片的略微偏右方；直翅目昆虫常插在前胸背板的右侧后方；膜翅目与鳞翅目的昆虫常插在中胸的中央；蜻蜓目、双翅目昆虫，宜在中胸背板中央稍偏右插入，留出完整的背中线。将昆虫针刺穿虫体后，用三级台确定昆虫、标签的各级高度。４犛犖／犜２９５９—２０１１９．２ 浸渍标本的制作幼虫一般以浸渍法进行标本制作，方法如下：虫体在浸渍前，最好使虫体绝食一定时间，使体内排泄干净，然后投入开水或温水中煮，直到虫体硬直为止，取出冷却，再投入幼虫保存液，幼虫保存液配方参见附录Ａ。９．３ 玻片标本的制作有些微小的昆虫，需对虫体不同部分做成玻片标本用生物显微镜进行观察鉴定，玻片标本制作方法如下：根据需要取下昆虫肢体部位，置于１０％左右氢氧化钠或氢氧化钾中煮一定时间去除内容物，用蒸馏水冲洗若干次，根据需要，依次用３０％、５０％、７０％、８０％、９０％、９５％、１００％浓度的酒精进行脱水，每级脱水时间１０ｍｉｎ以上，脱水后的标本置于二甲苯中透明，透明后用加拿大树胶进行封片，放置在通风处进行２周～４周时间自然干燥。９．４ 标本保存针插标本放入标本盒内进行保存，专人保管，注意防潮及防虫。浸渍标本保存主要注意容器的密封性，定期观察，及时补充保存液。玻片标本放置在专门的玻片盒内进行保存，注意防虫。１０ 鉴定昆虫鉴定目前主要采用形态学方法，通过查找标准、参考资料、对照标本等，采用肉眼、光学显微镜观察、解剖鉴定等方法确定昆虫的科、属、种分类地位。１１ 复核鉴定结果的复核由国家质量监督检验检疫总局授权的单位或专家负责。１２ 样品及虫样保存１２．１ 发现检疫性昆虫的样品，至少保存１８５ｄ，以备复验、谈判和仲裁之用；昆虫按第９章方法做成合适的标本，注明必要信息，按９．４的方法保存，保存日期至少１年以上。１２．２ 发生纠纷或诉讼的保存样品，需保存至纠纷或诉讼终结时止。１２．３ 样品保存期满后需进行灭活处理。５犛犖／犜２９５９—２０１１附 录 犃（资料性附录）幼虫常用保存液配方犃．１ 乙醇丙三醇保存液乙醇（７５％）∶丙三醇＝１００∶０．５～１最常用的永久性保存液。犃．２ 乙醇甲醛冰醋酸混和液乙醇（８０％）∶甲醛∶冰醋酸＝１５∶５∶１主要用于保存虫体内部组织，适用于虫体的内部解剖。缺点是易于使虫体发黑，日久发生少量深沉。犃．３ 卡莱氏（Ｋａｈｌｅ）幼虫混合液乙醇（９５％）∶甲醛（４０％）∶冰醋酸∶蒸馏水＝１５∶６∶２∶３０此液可用于幼虫放入永久保存液前浸泡，一般浸泡２４ｈ～２８ｈ。犃．４ 保色浸渍液纯白糖∶冰醋酸∶甲醛∶蒸馏水∶甘油＝３ｇ∶５ｍＬ∶５ｍＬ∶１００ｍＬ∶１０ｍＬ此液用于保存绿色、黄色、红色幼虫效果较好。６犛犖／犜２９５９—２０１１参 考 文 献 ［１］ 姚文国．中国进出境植物检疫手册．中华人民共和国动植检局，１９９６．［２］ 管制和，尤制平，周尧，等．昆虫学通论［Ｍ］．北京：中国农业出版社，１９８０．［３］ 陈乃中．中国进境植物检疫性有害生物［Ｍ］．北京：中国农业出版社，２００９．犛犖／犜２９５９—２０１１