搜索
书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２２２７—２００８进出口动物源性食品中甲氧氯普胺残留量检测方法 液相色谱质谱／质谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犿犲狋狅犮犾狅狆狉犪犿犻犱犲狉犲狊犻犱狌犲犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊狅犳犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犔犆犕犛／犕犛犿犲狋犺狅犱２００８１１１８发布２００９０６０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布食品伙伴网书书书前 言 本标准的附录Ａ和附录Ｂ均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国海南出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：卓海华、林正锋、禤开智、陈文慧、徐莉、徐志伟。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２２２７—２００８食品伙伴网进出口动物源性食品中甲氧氯普胺残留量检测方法 液相色谱质谱／质谱法１ 范围本标准规定了进出口动物源性食品中甲氧氯普胺残留量测定的液相色谱质谱／质谱分析方法。本标准适用于猪肉、猪肝、鸡肉、鸡肝、鱼、虾及鸡蛋中甲氧氯普胺残留量的检测和确证。２ 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法（ＧＢ／Ｔ６６８２—２００８，ＩＳＯ３６９６：１９８７，ＭＯＤ）３ 方法提要试样用乙腈提取，提取液经酸性氧化铝柱净化，浓缩定容后，用液相色谱质谱／质谱检测和确证，外标法定量。４ 试剂和材料所有试剂除特殊注明外，均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。４．１ 乙腈：液相色谱级。４．２ 甲醇：液相色谱级。４．３ 甲酸：液相色谱级。４．４ 无水硫酸钠：经６５０℃灼烧４ｈ，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。４．５ ２０％甲醇溶液：准确量取２０ｍＬ甲醇于１００ｍＬ容量瓶中，用水定容至１００ｍＬ。４．６ ０．２％甲酸溶液：准确量取２ｍＬ甲酸于１Ｌ容量瓶中，用水定容至１Ｌ。４．７ 甲氧氯普胺标准品（Ｍｅｔｏｃｌｏｐｒａｍｉｄｅ，ＣＡＳ号：３６４６２５，分子式：Ｃ１４Ｈ２２ＣｌＮ３Ｏ２）：纯度大于等于９９％。４．８ 标准储备液（１００μｇ／ｍＬ）：准确称取适量甲氧氯普胺标准品，用甲醇配制成浓度为１００μｇ／ｍＬ的标准储备液，该标准储备液置于４℃冰箱中避光密封保存可以使用３个月。４．９ 标准工作液（１００ｎｇ／ｍＬ）：根据需要取适量标准储备液，用甲醇配制成１００ｎｇ／ｎＬ的标准工作液，该标准工作液置于４℃冰箱中避光密封保存可以使用１个月。４．１０ 酸性氧化铝柱：３ｍＬ，５００ｍｇ。４．１１ 微孔滤膜：０．２０μｍ，无机系。４．１２ 聚丙烯离心管：具塞。５ 仪器和设备５．１ 液相色谱质谱／质谱仪：三重四极杆质谱检测器，配电喷雾离子源（ＥＳＩ）。５．２ 高速组织捣碎机。１犛犖／犜２２２７—２００８食品伙伴网５．３ 电子分析天平：感量分别为０．１ｍｇ和０．０１ｇ。５．４ 旋涡混合器：３０００ｒ／ｍｉｎ。５．５ 离心机；４０００ｒ／ｍｉｎ。５．６ 氮吹仪。６ 试样制备和保存６．１ 猪肉、猪肝、鸡肉、鸡肝、鱼、虾试样制备从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约５００ｇ，用高速组织捣碎机充分捣碎均匀。６．２ 禽蛋试样制备从所取全部样品中取出有代表性样品，去壳，取可食部分约５００ｇ，搅拌均匀。６．３ 试样保存制备好的试样存放于密封洁净容器中，于－１８℃以下避光冷冻存放。制样操作过程中应防止样品受到污染或甲氧氯普胺的含量发生变化，制样温度不应高于４０℃，制样后应立即测定。７ 测定步骤７．１ 提取称取２ｇ试样（精确至０．０１ｇ），置于５０ｍＬ聚丙烯离心管中，加入２ｇ无水硫酸钠（４．４），５ｍＬ乙腈（４．１），于旋涡混合器上３０００ｒ／ｍｉｎ旋涡３０ｓ，４０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，上清液转移至另一试管中，残渣再加入５ｍＬ乙腈，重复上述操作一次，合并提取液。７．２ 净化用３ｍＬ乙腈活化酸性氧化铝柱（４．１０），将提取液以小于１ｍＬ／ｍｉｎ的流速过酸性氧化铝柱，再用２ｍＬ乙腈洗涤酸性氧化铝柱一次，收集全部流出液，于４０℃下用氮气吹干，用２０％甲醇（４．５）溶液溶解定容至１．０ｍＬ，过０．２０μｍ微孔滤膜（４．１１），供液相色谱质谱／质谱分析。７．３ 测定７．３．１ 色谱条件ａ） 色谱柱：Ｃ１８柱，规格为２５０ｍｍ×４．６ｍｍ（内径），５μｍ，或性能相当者；ｂ） 流动相和洗脱程序：见表１；表１ 流动相和洗脱程序时间／ｍｉｎ甲醇／％０．２％甲酸溶液／％０．００２０８０４．００７０３０８．００７０３０８．１０２０８０１４．００２０８０ ｃ） 流速：０．５０ｍＬ／ｍｉｎ；ｄ） 柱温：３０℃；ｅ） 进样量：５０μＬ。７．３．２ 质谱条件ａ） 离子源：电喷雾离子源ＥＳＩ，正离子模式；ｂ） 扫描方式：多反应监测（ＭＲＭ）；ｃ） 监测离子（ｍ／ｚ）：３００．５／１８４．１（定量），３００．５／２１２．１，３００．５／２２７．０；２犛犖／犜２２２７—２００８食品伙伴网ｄ） 雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气。使用前应调节仪器参数使质谱达到最佳状态，参考条件参见附录Ａ。７．３．３ 液相色谱质谱／质谱测定７．３．３．１ 定性测定按照液相色谱质谱／质谱条件测定样品和基质标准工作溶液，如果检测的质量色谱峰保留时间与标准品保留时间相差不超过±０．２５ｍｉｎ，定性离子对的相对丰度（相对于最强离子丰度的强度百分比）与浓度相当基质标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表２规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。表２ 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度／％＞５０＞２０～５０＞１０～２０≤１０允许的最大偏差／％±２０±２５±３０±５０７．３．３．２ 定量测定根据试样中被测物的含量情况，选取响应值相近的基质标准工作液一起进行色谱分析。基质标准工作液和待测液中甲氧氯普胺的响应值应在仪器线性响应范围内。在上述色谱条件下，甲氧氯普胺的保留时间约为８．９０ｍｉｎ。标准溶液的选择性离子流图参见附录Ｂ中的图Ｂ．１。７．３．４ 空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。８ 结果计算用液相色谱质谱／质谱数据处理软件或者按式（１）计算样品中待测物的含量：犡＝犃×犮×犞犃ｓ×犿×１０００……………………………（１） 式中：犡———试样中残留药物含量，单位为毫克每千克（ｍｇ／ｋｇ）；犃———样液中药物的峰面积；犮———基质标准溶液中药物的浓度，单位为纳克每毫升（ｎｇ／ｍＬ）；犞———样液最终定容体积，单位为毫升（ｍＬ）；犃ｓ———基质标准溶液中药物的峰面积；犿———最终样液所代表的试样质量，单位为克（ｇ）。注：计算结果需扣除空白值。９ 测定低限、回收率９．１ 测定低限本方法中测定鸡肉、鸡肝、鱼、虾及鸡蛋中甲氧氯普胺的测定低限均为０．００２ｍｇ／ｋｇ，测定猪肉、猪肝中甲氧氯普胺的测定低限均为０．０１０ｍｇ／ｋｇ。９．２ 回收率回收率的实验数据（在不同添加浓度范围内）见表３。３犛犖／犜２２２７—２００８食品伙伴网表３ 回收率数据样品名称添加浓度／（ｍｇ／ｋｇ）回收率／％鱼０．００２８６．０～１１９．５０．００５７４．４～８９．４０．０１０７５．５～８９．８虾０．００２８０．１～１０１．５０．００５９４．３～１０４．００．０１０７２．２～８８．１鸡肉０．００２７９．５～１１０．８０．００５８０．２～１０２．００．０１０８５．０～１０３．５鸡肝０．００２６７．０～８０．５０．００５８１．５～１１３．００．０１０７９．９～９９．７鸡蛋０．００２６３．３～７９．００．００５６８．１～７０．６０．０１０７０．２～８７．７猪肉０．０１０７０．５～１０３．５０．０３０８１．８～１０８．５０．０５０８４．０～９１．１猪肝０．０１０７０．３～７９．００．０３０７０．４～７９．８０．０５０８８．５～９５．８４犛犖／犜２２２７—２００８食品伙伴网附 录 犃（资料性附录）液相色谱质谱／质谱法仪器参数与监测离子１） 参考条件：ａ） 扫描方式：正离子扫描；ｂ） 气帘气（ＣＵＲ）：４１．３７ｋＰａ（６．００ｐｓｉ）；ｃ） 雾化气（ＧＳ１）：８２．７４ｋＰａ（１２．００ｐｓｉ）；ｄ） 辅助加热气（ＧＳ２）：４５．００Ｌ／ｍｉｎ；ｅ） 碰撞气（ＣＡＤ）５５．１６ｋＰａ（８．００ｐｓｉ）；ｆ） 离子源喷雾器电压（ＩＳ）：４０００．００Ｖ；ｇ） 喷雾针温度（ＴＥＭ）：４７０．００℃；ｈ） 其他质谱参数见表Ａ．１。表犃．１ 参考质谱参数待测物Ｑ１ｍ／ｚＱ３ｍ／ｚ去簇电压／Ｖ碰撞能量／Ｖ碰撞室出口电压／Ｖ甲氧氯普胺３００．５ａ１８４．１ａ３８．０４３．４１２．９３００．５２１２．１３８．０４４．９１４．８３００．５２２７．０３８．０２７．２１５．８ａ为定量离子对。１） 非商业性声明：附录Ａ所列参考质谱条件是在ＡＰＩ３０００型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。５犛犖／犜２２２７—２００８食品伙伴网附 录 犅（资料性附录）甲氧氯普胺标准品选择性离子流图 ａ）ｂ）ｃ）ｄ）图犅．１ 甲氧氯普胺（２狀犵／犿犔）标准品的选择性离子流图６犛犖／犜２２２７—２００８食品伙伴网犉狅狉犲狑狅狉犱犃狀狀犲狓犃犪狀犱犪狀狀犲狓犅狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲犻狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犮犺犪狉犵犲犱狅犳狋犺犲犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犃犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀犃犱犿犻狀犻狊狋狉犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲’狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犎犪犻狀犪狀犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲’狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犿犪犻狀犾狔犱狉犪犳狋犲犱犫狔犣犺狌狅犎犪犻犺狌犪，犔犻狀犣犺犲狀犵犳犲狀犵，犡狌犪狀犓犪犻狕犺犻，犆犺犲狀犠犲狀犺狌犻，犡狌犔犻，犡狌犣犺犻狑犲犻．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狉狅犳犲狊狊犻狅狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犳狅狉犲狀狋狉狔犲狓犻狋犻狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅犿狌犾犵犪狋犲犱犳狅狉狋犺犲犳犻狉狊狋狋犻犿犲．犖狅狋犲：狋犺犻狊犈狀犵犾犻狊犺狏犲狉狊犻狅狀，犪狋狉犪狀狊犾犪狋犻狅狀犳狉狅犿狋犺犲犆犺犻狀犲狊犲狋犲狓狋，犻狊狊狅犾犲犾狔犳狅狉犵狌犻犱犪狀犮犲．７犛犖／犜２２２７—２００８食品伙伴网犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犿犲狋狅犮犾狅狆狉犪犿犻犱犲狉犲狊犻犱狌犲犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊狅犳犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犔犆犕犛／犕犛犿犲狋犺狅犱１ 犛犮狅狆犲犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狊狆犲犮犻犳犻犲狊狋犺犲犿犲狋犺狅犱狅犳犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犿犲狋狅犮犾狅狆狉犪犿犻犱犲狉犲狊犻犱狌犲犻狀犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犪犾犳狅狅犱犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犫狔犔犆犕犛／犕犛犿犲狋犺狅犱．犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犪狀犱犮狅狀犳犻狉犿犪狋犻狅狀狅犳犿犲狋狅犮犾狅狆