搜索
书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２２３０—２００８代替ＳＮ０２０３—１９９３进出口食品中腐霉利残留量的检测方法气相色谱质谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狆狉狅犮狔犿犻犱狅狀犲狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狅狅犱犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犌犆犕犛犿犲狋犺狅犱２００８１１１８发布２００９０６０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前 言 本标准代替ＳＮ０２０３—１９９３《出口酒中腐霉利残留量检验方法》。本标准与ＳＮ０２０３—１９９３相比主要变化如下：———删除了ＳＮ０２０３—１９９３的“２ 抽样和制样”，增加了“５ 试样制备与保存”；———测定方法由气相色谱法改为气相色谱质谱法；———扩大了检测方法适用的样品基质范围。本标准的附录Ａ为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国湖南出入境检验检疫局、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、中华人民共和国浙江出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国新疆出入境检验检疫局。本标准主要起草人：李拥军、黄志强、王正良、颜鸿飞、张莹、王美玲、王明泰、丁慧瑛、沈崇钰、尚德军。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：———ＳＮ０２０３—１９９３。Ⅰ犛犖／犜２２３０—２００８进出口食品中腐霉利残留量的检测方法气相色谱质谱法１ 范围本标准规定了进出口食品中腐霉利残留量的气相色谱质谱检测方法。本标准适用于茶叶、脐橙、板栗、葡萄酒、洋葱、小米、蜂蜜、鱼肉、鸡肝、猪肝中腐霉利残留量的测定和确证。２ 方法提要试样采用丙酮正己烷振荡提取，石墨化碳黑固相萃取柱或中性氧化铝固相萃取柱净化，气相色谱质谱仪测定和确证，外标法定量。３ 试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水。３．１ 正己烷：重蒸馏。３．２ 丙酮：重蒸馏。３．３ 氯化钠。３．４ 无水硫酸钠：经６５０℃灼烧４ｈ，置干燥器中备用。３．５ 丙酮正己烷溶液（１＋２，体积比）：取１００ｍＬ丙酮，加入２００ｍＬ正己烷，摇匀备用。３．６ 丙酮正己烷溶液（１＋１，体积比）：取２００ｍＬ丙酮，加入２００ｍＬ正己烷，摇匀备用。３．７ 腐霉利标准物质（Ｐｒｏｃｙｍｉｄｏｎｅ，Ｃ１３Ｈ１１Ｃｌ２ＮＯ２，ＣＡＳ号：３２８０９１６８）：纯度大于９９％。３．８ 腐霉利标准储备溶液：准确称取适量的腐霉利标准物质，用丙酮配制成１０００μｇ／ｍＬ标准储备液，再根据检测要求用正己烷稀释成适当浓度的标准工作溶液。标准溶液避光于４℃保存，保存期为６个月。３．９ 石墨化碳黑固相萃取柱：３ｍＬ，１２５ｍｇ，或相当者。３．１０ 中性氧化铝固相萃取柱：３ｍＬ，１２５ｍｇ，或相当者。４ 仪器和设备４．１ 气相色谱质谱联用仪，配电子轰击离子源（ＥＩ源）。４．２ 组织捣碎机。４．３ 粉碎机。４．４ 分析天平：感量０．０００１ｇ４．５ 涡旋混匀器。４．６ 固相萃取装置，带真空泵。４．７ 离心机：５０００ｒ／ｍｉｎ。４．８ 离心管：１５ｍＬ。４．９ 刻度试管：１５ｍＬ。４．１０ 微量注射器：１０μＬ。１犛犖／犜２２３０—２００８５ 试样制备与保存５．１ 试样制备５．１．１ 水果或蔬菜取有代表性样品５００ｇ，将其可食用部分切碎后（不可用水洗），用捣碎机将样品加工成浆状。混匀，装入洁净的盛样容器内，密封并标明标记。５．１．２ 茶叶、板栗、小米取有代表性样品５００ｇ，用粉碎机粉碎并通过２．０ｍｍ圆孔筛。混匀，装入洁净的盛样容器内，密封并标明标记。５．１．３ 蜂蜜取有代表性样品量５００ｇ，对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀；对有结晶析出的蜂蜜样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过６０℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温，在融化时应注意防止水分挥发。装入洁净的容器，密闭，标明标记。５．１．４ 鱼肉、鸡肝、猪肝取有代表性样品５００ｇ，取可食部分经捣碎机充分捣碎均匀，装入洁净的盛样容器内，密封并标明标记。５．２ 试样保存茶叶、葡萄酒、蜂产品、粮谷类等试样于０℃～４℃保存；水果蔬菜类和肉及肉制品类等试样于－１８℃以下冷冻保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。６ 测定步骤６．１ 提取对于茶叶、板栗、蜂蜜、小米样品，称取１ｇ试样（精确至０．００１ｇ）。对于脐橙、葡萄酒、洋葱、鱼肉、鸡肝、猪肝样品，称取２ｇ试样（精确至０．００１ｇ）。将称取的试样置于１５ｍＬ离心管中，加入１ｇ氯化钠，加入２ｍＬ水，于混匀器上混匀３０ｓ，放置１５ｍｉｎ。加入３ｍＬ丙酮正己烷溶液（３．５），在混匀器上混匀２ｍｉｎ。３０００ｒ／ｍｉｎ离心１ｍｉｎ，吸取上层萃取液于另一试管中。再分别加入３ｍＬ丙酮正己烷（３．５）溶液重复提取两次，合并萃取液。６．２ 净化６．２．１ 茶叶、脐橙、板栗、葡萄酒将石墨化碳黑固相萃取柱（柱内填约１ｃｍ高的无水硫酸钠层）安装在固相萃取的真空抽滤装置上，先用４ｍＬ丙酮正己烷ＲＹ（３．６）预淋洗萃取柱，弃去全部预淋洗液。将６．１提取液加入到石墨化碳黑固相萃取柱中，待提取液全部流出后，再用３ｍＬ丙酮正己烷混合液（３．６）洗脱萃取柱，保持流速１．５ｍＬ／ｍｉｎ，收集全部流出液，４５℃下氮气流吹至近干。用正己烷定容至０．５ｍＬ，供ＧＣＭＳ测定。６．２．２ 洋葱、小米、蜂蜜、鱼肉、鸡肝、猪肝将中性氧化铝固相萃取柱（柱内填约１ｃｍ高的无水硫酸钠层）安装在固相萃取的真空抽滤装置上，先用４ｍＬ丙酮正己烷混合液（３．６）预淋洗萃取柱，弃去全部预淋洗液。将６．１提取液加入到中性氧化铝固相萃取柱中，待提取液全部流出后，再用３ｍＬ丙酮＋正己烷混合液（３．６）洗脱萃取柱，保持流速１．５ｍＬ／ｍｉｎ，收集全部流出液，４５℃下氮气流吹至近干。用正己烷定容至０．５ｍＬ，供ＧＣＭＳ测定。６．３ 测定６．３．１ 气相色谱质谱条件ａ） 色谱柱：ＨＰ５ＭＳ石英毛细管柱，３０ｍ×０．２５ｍｍ（内径），膜厚０．２５μｍ，或相当者；ｂ） 色谱柱温度：初始温度１００℃，保持１ｍｉｎ，以１０℃／ｍｉｎ升至２８０℃保持１１ｍｉｎ；２犛犖／犜２２３０—２００８ｃ） 进样口温度：２５０℃；ｄ） 色谱质谱接口温度：２８０℃；ｅ） 载气：氦气，纯度大于等于９９．９９５％，１．０ｍＬ／ｍｉｎ；ｆ） 进样量：１μＬ；ｇ） 进样方式：无分流进样，１ｍｉｎ后开阀；ｈ） 电离方式：ＥＩ；ｉ） 电离能量：７０ｅＶ；ｊ） 检测方式：选择离子监测方式（ＳＩＭ）；ｋ） 监测离子（ｍ／ｚ）：９６，２５４，２８３，２８５；定量离子：２８５；ｌ） 溶剂延迟：８ｍｉｎ。６．３．２ 色谱测定与确证根据样液中腐霉利的含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液，对标准工作液和样液等体积参插进样，测定标准工作溶液和样液中腐霉利的响应值均应在仪器检测的线性范围内。在相同实验条件下，样品中待测物质的质量色谱保留时间与标准工作液相同，并且在扣除背景后的样品质量色谱中，所选离子均出现，经过对比所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比，其值在允许范围内（允许范围见表１）则可判定样品中存在对应的待测物。在上述色谱条件下，腐霉利的保留时间约为１４．５５ｍｉｎ，其监测离子（ｍ／ｚ）丰度比是９６∶２５４∶２８３∶２８５＝１００∶５∶３７∶２４。气相色谱质谱色谱图参见附录Ａ图Ａ．１和图Ａ．２。表１ 使用气相色谱质谱定性时相对离子丰度最大容许误差相对丰度（基峰）／％＞５０＞２０～５０＞１０～２０≤１０ＧＣ／ＭＳ时相对离子丰度最大允许误差／％±１０±１５±２０±５０６．４ 空白实验除不加试样外，均按上述测定步骤进行。６．５ 结果计算和表述用色谱数据处理机或按式（１）计算试样中腐霉利的含量：犡＝犃×犮ｓ×犞犃ｓ×犿……………………………（１） 式中：犡———试样中腐霉利的残留含量，单位为毫克每千克（ｍｇ／ｋｇ）；犃———样液中腐霉利的峰面积；犮ｓ———标准工作液中腐霉利的浓度，单位为微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；犃ｓ———标准工作液中腐霉利的峰面积；犞———样液最终定容体积，单位为毫升（ｍＬ）；犿———最终样液所代表的试样量，单位为克（ｇ）。注：计算结果须扣除空白值。７ 测定低限和回收率７．１ 测定低限本方法腐霉利在脐橙、葡萄酒、小米、蜂蜜和鱼肉中的测定低限均为０．０１ｍｇ／ｋｇ；在鸡肝中的测定低限为０．０１５ｍｇ／ｋｇ；在茶叶、板栗和猪肝中的均为０．０２５ｍｇ／ｋｇ；在洋葱中为０．０５ｍｇ／ｋｇ。７．２ 回收率样品的添加浓度及回收率的实验数据见表２。３犛犖／犜２２３０—２００８表２ 样品的添加浓度和回收率数据样品名称添加浓度／（ｍｇ／ｋｇ）回收率／％茶叶０．０２５８１．９～１０２．２０．０５８３．０～１０１．６０．１７３．７～８９．８脐橙０．０１８０．１～９９．４０．０２７８．５～９９．８０．５８６．１～９９．４板栗０．０２５８６．４～１０３．７０．０５９０．２～１０６．９０．１７９．９～９９．７葡萄酒０．０１９１．６～１０９．７０．０２８２．２～１００．５０．１８６．７～９８．６洋葱０．０５９４．５～１０６．７０．１９３．９～９９．７０．５８２．０～１０６．３小米０．０１８９．９～１０２．９０．０２９０．１～９９．２０．１８０．８～９４．５蜂蜜０．０１８３．９～９４．７０．０２８４．５～９９．８０．１８８．５～９５．８鱼肉０．０１８３．８～１０７．１０．０２８９．６～１０４．３０．１８６．８～９９．９鸡肝０．０１５８１．１～１００．１０．０３８０．８～１０４．９０．０６７６．６～９９．６猪肝０．０２５９２．８～１０２．８０．０５７７．５～９９．２０．１８１．４～９７．２４犛犖／犜２２３０—２００８附 录 犃（资料性附录）腐霉利标准物质总离子流色谱图和质谱图图犃．１ 腐霉利标准物质的总离子流色谱图图犃．２ 腐霉利标准物质的质谱图５犛犖／犜２２３０—２００８