搜索
书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２１６６—２００８危险品急性吸入毒性试验方法犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犪犮狌狋犲犻狀犺犪犾犪狋犻狅狀狋狅狓犻犮犻狋狔犳狅狉犱犪狀犵犲狉狅狌狊犵狅狅犱狊２００８０９０４发布２００９０３１６实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前 言 本标准修改采用联合国经济合作与发展组织（ＯＥＣＤ）化学品测试方法Ｎｏ．４０３《急性吸入毒性试验》（１９８１）。本标准与ＯＥＣＤ化学品测试方法Ｎｏ．４０３相比，存在以下差异：———对ＯＥＣＤ化学品测试方法Ｎｏ．４０３进行了编辑性修改；———增加了前言部分。本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出。本标准由国家认证认可监督管理委员会归口。本标准负责起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。本标准参加起草单位：中化化工标准化研究所、江南大学、天津市检验检疫科学技术研究院。本标准主要起草人：李宁涛、张园、庞震、于智睿、赵琢、张江萍。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２１６６—２００８危险品急性吸入毒性试验方法１ 范围本标准规定了危险化学品急性吸入毒性试验的试验设备、试验器材和试剂、试验样品要求、试验动物、试验步骤和试验结果。本标准适用于对危险化学品进行急性吸入毒性的测定。２ 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的文件，其最新版本适用于本标准。ＧＢ１４９２４．１ 实验动物 配合饲料通用质量标准ＧＢ１４９２５ 实验动物 环境及设施ＧＢ１５１９３．３—２００３ 急性毒性试验卫生部《化学品毒性鉴定技术规范》（２００５）联合国《关于危险货物运输的建议书·规章范本》（第十四修订版）３ 术语和定义联合国《关于危险货物运输的建议书·规章范本》（第十四修订版）确立的以及下列术语和定义适用于本标准。３．１毒性物质 狋狅狓犻犮狊狌犫狊狋犪狀犮犲经口、吸入或与皮肤接触后可能造成人类死亡或严重受伤、损害人类健康的化学物质。３．２急性吸入毒性犔犇５０值 犪犮狌狋犲犻狀犺犪犾犪狋犻狅狀狋狅狓犻犮犻狋狔犔犇５０使雌雄成年白鼠连续吸入１ｈ后，最可能引起这些试验动物在１４ｄ内死亡一半的蒸气、烟雾或粉尘的浓度。４ 试验设备４．１ 动式吸入染毒设备动式吸入染毒试验场所应有机械通风系统保证染毒柜内空气保持新鲜，其氧含量不低于１９％，二氧化碳含量不超过３％，温度维持在２２℃±２℃范围内，相对湿度为３０％～７０％，每小时换气３次～４次，气流速度不宜过大，染毒柜内空气稍呈负压，以防止受试物外溢。４．２ 静式吸入染毒设备根据动物种属数量与染毒时间，确定容器容积。温度维持在２２℃±２℃范围内，相对湿度为３０％～７０％。５ 试验器材和试剂５．１ 器材动式或静式吸入染毒柜、动物秤。１犛犖／犜２１６６—２００８５．２ 试剂苦味酸酒精饱和液。６ 试验样品要求６．１ 样品适用条件固态物质其总重量的至少１０％应为可吸入范围的粉尘，即粉粒的气体动力直径≤１０μｍ；液态物质如果在运输密封装置泄漏时可能产生烟雾，应进行急性吸入毒性试验。６．２ 样品准备不论是固态物质还是液态物质，准备用于吸入毒性试验的样品的９０％以上（按质量计算）应在规定的可吸入范围内。７ 试验动物首选健康成年大鼠（１８０ｇ～２２０ｇ）或小鼠（１８ｇ～２２ｇ），也可选用其他敏感动物。同性别各剂量组个体间体重相差不得超过平均体重的２０％。每个浓度组至少１０只动物，雌雄各半。试验前动物要在试验环境中至少适应３ｄ～５ｄ时间。试验动物饲养条件应符合ＧＢ１４９２４．１和ＧＢ１４９２５有关规定。８ 试验步骤８．１ 剂量和分组各剂量组间距大小以兼顾产生毒性大小和死亡为宜，通常以较大组距和较少量动物进行预试。正式试验至少设置三个浓度，通过预试验选用１０％～４０％动物死亡浓度为低浓度组，４０％～６０％动物死亡浓度为中浓度组，６０％～９０％动物死亡浓度为高浓度组，并设对照组。８．２ 染毒方法８．２．１ 染毒条件在染毒装置中，按照设计剂量浓度染毒１ｈ或４ｈ。染毒装置温度应为２２℃±２℃，相对湿度３０％～７０％。染毒期间应禁食。８．２．２ 动式吸入染毒按设计规定的各浓度组将试验动物分别放置入染毒柜中，启动通风系统和受试物发生器，染毒柜每小时换气３次～４次，染毒时，染毒柜内应确保至少有１９％的氧含量和均衡分配的染毒气体。一般情况下，为确保染毒柜内空气稳定，试验动物的体积不应超过染毒柜体积的５％。同时应注意防止受试样品爆炸。受试物按规定浓度使动物连续吸入４ｈ，切断受试物发生器，动物终止吸入染毒，继续通风１５ｍｉｎ，而后停止通风，取出动物进行观察。８．２．２．１ 受试样品处理气体受试样品，经流量计与空气混合成一定浓度后，直接输入染毒柜。易挥发液体受试样品，通过空气鼓泡或适当加热促使挥发后输入染毒柜。若受试样品现场使用时采取喷雾法时，可采用喷雾器或超声雾化器使其雾化后输入染毒柜。８．２．２．２ 动式染毒浓度计算染毒浓度一般应采用动物呼吸带实际测定浓度，每半小时一次，取其平均值。各测定浓度值应在其平均值的２５％以内。若无适当的测试方法，也可采用式（１）计算染毒浓度：犮＝［犞０×ρ／（犞１＋犞２）］×１０６……………………………（１） 式中：犮———染毒浓度，单位为毫克每立方米（ｍｇ／ｍ３）；犞０———气化或雾化受试样品的量，单位为毫升（ｍＬ）；ρ———受试样品密度，单位为克每毫升（ｇ／ｍＬ）；２犛犖／犜２１６６—２００８犞１———输入染毒柜风量，单位为升（Ｌ）；犞２———染毒柜容积，单位为升（Ｌ）。８．２．３ 静式吸入染毒将动物放入染毒柜中，再将滴有液体受试物的滤纸或蒸发皿放在柜内上方位置，密闭染毒柜，启动风扇使气体混匀，到达规定时间后打开染毒柜取出动物，在动物房内饲养并进行观察。８．２．３．１ 染毒柜容积．染毒柜容积以每只染毒小鼠每小时不少于４．３５Ｌ空气计，每只大鼠每小时不少于３０．５Ｌ计。８．２．３．２ 染毒浓度的计算染毒浓度一般应采用实际测定浓度。在染毒期间一般可测４次～５次，求其平均浓度。在无适当测试方法时，可用式（２）计算染毒浓度：犮＝（犞０×ρ／犞１）×１０６……………………………（２） 式中：犮———染毒浓度，单位为毫克每立方米（ｍｇ／ｍ３）；犞０———加入受试样品的量，单位为毫升（ｍＬ）；ρ———化学品密度，单位为克每毫升（ｇ／ｍＬ）；犞１———染毒柜容积，单位为升（Ｌ）。９ 试验结果９．１ 中毒表现观察观察试验动物的中毒表现，具体项目见《化学品毒性鉴定技术规范》附录１Ａ《啮齿类动物中毒表现观察项目表》。对死亡动物进行尸检。观察期结束后，处死存活动物并进行大体解剖，如有必要，进行病理组织学检查。９．２ 计算犔犆５０值记录染毒期间每只试验动物症状的出现次序、时间和严重程度以及死亡时间。采用霍恩氏法来计算ＬＣ５０值。方法见ＧＢ１５１９３．３—２００３附录Ａ。９．３ 结果处理如果染毒１ｈ就能获得吸入毒性结果，应将１ｈ试验值除以时间因子换算成４ｈ等效值，对于气体和蒸气时间因子取２，对于粉尘和烟雾时间因子取４。犛犖／犜２１６６—２００８