书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖/犜2095—2008进出口蔬菜中氟啶脲残留量检测方法高效液相色谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犮犺犾狅狉犳犾狌犪狕狌狉狅狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狏犲犵犲狋犪犫犾犲狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犎犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺犻犮犿犲狋犺狅犱20080717发布20090201实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前 言本标准的附录A是资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国浙江出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人:刘海山、陈笑梅、石蕾、池浩超、汤杭燕、杨磊。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖/犜2095—2008进出口蔬菜中氟啶脲残留量检测方法高效液相色谱法1 范围本标准规定了蔬菜中氟啶脲残留量检测的制样和高效液相色谱测定方法。本标准适用于黄瓜、萝卜、荷兰豆中氟啶脲残留量的检测。2 方法提要用乙腈提取试样中的氟啶脲,经弗罗里硅土柱净化,用配有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪测定,外标法定量。3 试剂和材料除另有规定外,试剂均为分析纯,水为重蒸水或去离子水。3.1 乙腈:液相色谱级。3.2 正己烷:液相色谱级。3.3 乙醚:液相色谱级。3.4 氯化钠。3.5 无水硫酸钠:650℃灼烧4h,在干燥器内冷却至室温,贮于密封瓶中备用。3.6 洗脱液:正己烷+乙醚(2+8,体积比)。3.7 脱脂棉。3.8 弗罗里硅土:100目~200目,粒度:0.075mm~0.15mm,650℃灼烧4h,使用前一天130℃活化4h,在干燥器内冷却至室温,加1%的水脱活备用。3.9 净化柱:200mm×15mm(内径)玻璃柱,底部填约5mm高脱脂棉和20mm高无水硫酸钠(3.5),10g弗罗里硅土,顶端加20mm高无水硫酸钠,使用前用20mL正己烷淋洗。3.10 氟啶脲标准品:纯度大于等于99.0%。3.11 氟啶脲标准储备溶液:准确称取适量氟啶脲标准品,用甲醇配制成100μg/mL标准储备液。0℃~4℃储存(有效期6个月)。3.12 氟啶脲标准工作溶液:根据需要,将标准储备液(3.12)用甲醇稀释至适当浓度的标准工作溶液。4 仪器和设备4.1 高效液相色谱仪,配有二极管阵列检测器。4.2 均质器。4.3 旋转蒸发仪。4.4 混匀器。4.5 离心机(4000r/min)。5 试样制备与保存从混合原始样品中缩分出1kg,取可食部分,经组织捣碎机捣碎,均分成两份,装入洁净容器内,作为试样,密封,并标明标记。将试样置于-18℃以下冷冻保存。在制样操作过程中,应防止样品受到污1犛犖/犜2095—2008染或发生残留物含量的变化。6 测定步骤6.1 提取称取5g试样(精确至0.01g),置于100mL烧杯中,加入30mL乙腈,10000r/min均质2min。提取液过滤至50mL塑料离心管中,用15mL乙腈分两次洗涤烧杯和均质器,洗涤液与滤液合并。在滤液中加入氯化钠,剧烈振摇后,离心(4000r/min)5min,收集有机相。下层水相再用20mL乙腈萃取一次,合并有机相,在45℃水浴中用旋转蒸发仪减压浓缩至干。6.2 净化残渣用洗脱液(3.6)溶解洗涤三次,每次5mL。将溶液全部移入净化柱(3.9)中,用100mL洗脱液(3.6)洗脱。收集洗脱液,在35℃水浴中用旋转蒸发仪减压浓缩至干,用流动相(乙腈+水=60+40,体积比)定容至1.0mL,溶液过0.45μm滤膜后供高效液相色谱分析。6.3 测定6.3.1 色谱条件a) 色谱柱:C18柱,5μm,250mm×4.6mm(内径),或相当者;b) 流动相:梯度洗脱条件见表1;c) 流速:1.0mL/min;d) 检测波长:258nm;e) 进样量:20μL。表1 梯度洗脱条件时间/min水/%乙腈/%0.0040608.00208014.00208015.00406020.0040606.3.2 色谱测定根据样液中氟啶脲含量,选择浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氟啶脲的响应值均应在仪器检测的线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定。在上述色谱条件下,氟啶脲的保留时间约为17.3min。标准品的色谱图见附录A中图A.1,标准品的紫外光谱图见附录A中图A.2。6.4 空白试验除不加试样外,均按上述步骤进行。7 结果计算和表述用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中氟啶脲含量,计算结果须扣除空白值。犡=犃×犮×犞犃s×犿……………………………(1) 式中:犡———试样中氟啶脲的残留量,单位为毫克每千克(mg/kg);犃———样液中氟啶脲的峰面积;犮———标准工作液中氟啶脲的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);2犛犖/犜2095—2008犞———样液最终定容体积,单位为毫升(mL);犃s———标准工作液中氟啶脲的峰面积;犿———最终样液所代表的试样量,单位为克(g)。8 测定低限和回收率8.1 测定低限本方法对蔬菜中氟啶脲的测定低限为0.05mg/kg。8.2 回收率回收率见表2。表2 液相色谱法测定黄瓜、萝卜和荷兰豆样品中氟啶脲的回收率样品基质添 加 浓 度0.05mg/kg0.10mg/kg0.20mg/kg2.0mg/kg黄瓜86.5%~102.0%87.5%~103.2%86.8%~103.2%83.3%~106.9%萝卜88.7%~104.2%87.5%~102.3%87.6%~102.9%92.1%~108.5%荷兰豆86.6%~102.1%87.4%~105.7%88.4%~102.8%82.6%~107.4%3犛犖/犜2095—2008附 录 犃(资料性附录)标准品色谱图和紫外光谱图图犃.1 氟啶脲标准品的液相色谱图图犃.2 氟啶脲标准品的紫外光谱图4犛犖/犜2095—2008犉狅狉犲狑狅狉犱犃狀狀犲狓犃犻狊犪狀犻狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓.犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犮犺犪狉犵犲狅犳犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犃犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀犪犱犿犻狀犻狊狋狉犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲’狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪.犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犣犺犲犼犻犪狀犵犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲’狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪.犜犺犲犿犪犻狀犱狉犪犳狋犲狉狊狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲犔犻狌犎犪犻狊犺犪狀,犆犺犲狀犡犻犪狅犿犲犻,犛犺犻犔犲犻,犆犺犻犎犪狅犮犺犪狅,犜犪狀犵犎犪狀犵狔犪狀,犢犪狀犵犔犲犻.犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狉狅犳犲狊狊犻狅狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犳狅狉犲狀狋狉狔犲狓犻狋犻狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅犿狌犾犵犪狋犲犱犳狅狉狋犺犲犳犻狉狊狋狋犻犿犲.5犛犖/犜2095—2008犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犮犺犾狅狉犳犾狌犪狕狌狉狅狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狏犲犵犲狋犪犫犾犲狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犎犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺犻犮犿犲狋犺狅犱1 犛犮狅狆犲犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狊狆犲犮犻犳犻犲狊狋犺犲犿犲狋犺狅犱狅犳狊犪犿狆犾犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀犪狀犱犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犮犺犾狅狉犳犾狌犪狕狌狉狅狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狏犲犵犲狋犪犫犾犲狊犫狔犺犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔.犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犮犺犾狅狉犳犾狌犪狕狌狉狅狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犮狌犮狌犿犫犲狉,狉犪犱犻狊犺犪狀犱犵狉犲犲狀狊狅狔犫犲犪狀.2 犘狉犻狀犮犻狆犾犲犆犺犾狅狉犳犾狌犪狕狌狉狅狀狉犲狊犻犱狌犲犻狊犲狓狋狉犪犮狋犲犱犫狔犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲犳狉狅犿狋犺犲狊犪犿狆犾犲.犆犾犲犪狀狌狆狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犫狔狆犪狊狊犻狀犵狋犺狉狅狌犵犺犪犳犾狅狉犻狊犻犾犮狅犾狌犿狀.犇犲狋犲狉犿犻狀犲犮犺犾狅狉犳犾狌犪狕狌狉狅狀犫狔犎犘犔犆狑犻狋犺犱犻狅犱犲犪狉狉犪狔犱犲狋犲犮狋狅狉犪狀犱狇狌犪狀狋犻狋犪狋犲狑犻狋犺犲狓狋犲狉狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犿犲狋犺狅犱.3 犚犲犪犵犲狀狋狊犪狀犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊犝狀犾犲狊狊狊狆犲犮犻犳犻犲犱狀狅狋犲狊,犪犾犾狉犲犪犵犲狀狋狊犪狉犲犪狀犪犾狔狋犻犮犪犾犾狔狆狌狉犲,“狑犪狋犲狉”犻狊狉犲犱犻狊狋犻犾犾犲犱狅狉犱犲犻狅狀犻狕犲犱.3.1 犃犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲:犎犘犔犆犵狉犪犱犲.3.2 狀犎犲狓犪狀犲:犎犘犔犆犵狉犪犱犲.3.3 犈狋犺狔犾犲狋犺犲狉:犎犘犔犆犵狉犪犱犲.3.4 犛狅犱犻狌犿犮犺犾狅狉犻犱犲.3.5 犃狀犺狔犱狉狅狌狊狊狅犱犻狌犿狊狌犾犳犪狋犲:犔犵狀犻狋犲犪狋650℃犳狅狉4犺,犪狀犱犽犲犲狆犻狀犪狋犻犵犺狋犾狔犮犾狅狊犲犱犮狅狀狋犪犻狀犲狉犪犳狋犲狉犮狅狅犾犻狀犵.3.6 犈犾狌犲狀狋:狀犎犲狓犪狀犲+犲狋犺狔犾犲狋犺犲狉(2+8,犞/犞).3.7 犃犫狊狅狉犫犲狀狋犮狅狋狋狅狀.6犛犖/犜2095—20083.8 犉犾狅狉犻狊犻犾:犌狉犪狀狌犾犲狊犻狕犲0.075犿犿~0.15犿犿(100~200犿犲狊犺),犻犵狀犻狋犲犪狋650℃犳狅狉4犺,犪狀犱犽犲犲狆犻狀犪狋犻犵犺狋犾狔犮犾狅狊犲犱犮狅狀狋犪犻狀犲狉,狋犺犲狀犺犲犪狋犳狅狉4犺犪狋130℃犻狀犪狀狅狏犲狀,犮狅狅犾犻狀犵狋狅狉狅狅犿狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲犻狀犱犲狊犻犮犮犪狋狅狉犪狀犱犪犱犱犻狀犵1%狅犳狑犪狋犲狉犫犲犳狅狉犲狌狊犲.3.9 犆狅犾狌犿狀犳狅狉犮犾犲犪狀狌狆:200犿犿犡15犿犿(犻.犱.)犵犾犪狊狊犮狅犾狌犿狀,狆犪犮犽犲犱狑犻狋犺5犿犿犪犫狊狅狉犫犲狀狋犮狅狋狋狅狀犪狋狋犺犲犫狅狋狋狅犿狅犳狋犺犲犮狅犾狌犿狀,犳犻犾犾犻狀20犿犿犪狀犺狔犱狉狅狌狊狊狅犱犻狌犿狊狌犾犳犪狋犲,10犵犳犾狅狉犻狊犻犾,犪狀犱20犿犿犪狀犺狔犱狉狅狌狊狊狅犱犻狌犿狊狌犾犳犪狋犲犪狋狋狅狆.犃犱犱20犿犔狀犺犲狓犪狀犲狋狅狑犪狊犺犫犲犳狅狉犲狌狊犲.3.10 犆犺犾狅狉犳犾狌犪狕狌狉狅狀狊狋犪狀犱犪狉犱:犘狌狉犻狋狔≥99.0%.3.11 犆犺犾狅狉犳犾狌犪狕狌狉狅狀狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀:犃犮犮狌狉犪狋犲犾狔狑犲犻犵犺犪狀犪狆狆狉狅狆狉犻犪狋犲犪犿狅狌狀狋狅犳犆犺犾狅狉犳犾狌犪狕狌狉狅狀狊狋犪狀犱犪狉犱犪狀犱犱犻狊狊狅犾狏犲狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾狋狅狆狉犲狆犪狉犲犪狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳100μ犵/犿犔.犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀狊犺狅狌犾犱犫犲狊狋狅狉犲犱犪狋0℃~4℃.犜犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀犻狊狊狋犪犫犾犲犻狀狊犻狓犿狅狀狋犺狊.3.12 犆犺犾狅狉犳犾狌犪狕狌狉狅狀狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀:犃犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲狉犲狇狌犻狉犲犿犲狀狋,狆犻狆犲狋狋犲犪犱犲狇狌犪狋犲犪犿狅狌狀狋狅犳狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀(3.12)犪狀犱犱犻犾狌狋犲狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾狋狅狆狉犲狆犪狉犲狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳狊狌犻狋犪犫犾犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀.4 犃狆狆犪狉犪狋狌狊犪狀犱犲狇狌犻狆犿犲狀狋4.1 犎犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺,犲狇狌犻狆狆犲犱狑犻狋犺犱犻狅犱犲犪狉狉犪狔犱犲狋犲犮狋狅狉.4.2 犎犻犵犺狊狆犲犲犱犫犾犲狀犱犲狉.4.3 犚狅狋犪狉狔狏犪犮狌狌犿犲狏犪狆狅狉犪狋狅狉.4.4 犞狅狉狋犲狓犿犻狓犲狉.4.5 犆犲狀狋狉犻犳狌犵犲(4000狉/犿犻狀).5 犘狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀犪狀犱狊狋狅狉犪犵犲狅犳狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犜犺犲犮狅犿犫犻狀犲犱狊犪犿狆犾犲犻狊狉犲犱狌犮犲犱狋狅1犽犵,狋犺犲犲犱犻犫犾犲