2.2动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体【学习目标】1、掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。2、简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。3、了解单克隆抗体在医学实践中的应用,并说其应用实例。【学习重点】单克隆抗体的制备【学习难点】单克隆抗体的制备【导学案】一、动物细胞融合1、概念:_______或_______动物细胞结合形一个细胞的过程,也称细胞杂交。2、结果:形成___________。3、过程:两个或多个细胞PEG灭活的病毒或___________________________________。4、意义:克服了___________的不亲和性,成为研究___________、___________、肿瘤和_______________培育的重要手段。二、单克隆抗体1、抗体⑴产生细胞:_________________。⑵成分:__________。⑶特点:从__________中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。2、单克隆抗体的制备(1)过程(2)杂交瘤细胞的特点:____________________、____________________。(3)单克隆抗体的优点:____________、____________、____________。三、单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂,具有__________、__________、__________、__________的优点。2、用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗_______、可制成___________。给小鼠注射特定的抗原蛋白培养骨髓瘤细胞→从________中分离B淋巴细胞→骨髓瘤细胞灭活病毒融合未融合细胞____________________选择培养基_____________克隆检测小鼠体内培养体外培养→__________抗体【探究案】任务一动物细胞融合1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理融合过程诱导方法结果应用培育植物新品种意义相同点原生质体融合原理相同;原生质体融合的方法相似2、不灭活的病毒能作为诱导剂吗?为什么可以使用灭活的病毒促进动物细胞融合?3、为什么不用两个而要用多个细胞进行动物细胞间的融合?任务二单克隆抗体的制备及应用探究一:单克隆抗体制备的原理1、传统的抗体生产方法及缺陷是什么?抗体是从何来的?2、B淋巴细胞有什么特点?3、若要想获得大量的单一抗体,如何做呢?4、在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的,那么怎样解决这一问题的呢?5、小结以下内容:◆利用____________________产生特异性抗体的功能。◆利用____________________无限增殖的特性。◆利用____________________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。◆利用____________________技术大量培养杂交瘤细胞。探究二:单克隆抗体制备的过程1、如何获得B淋巴细胞?2、如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时,会有几种融合方式(类型)?3、选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么?4、如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养?探究三:单克隆抗体的应用1、单克隆抗体的应用有哪些?2、生物导弹的组成及优点?【对点训练】1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合,用灭活的仙台病毒处理后,不可能获得下列哪种基因型的细胞()A.AAaaB.AaBbC.AabbD.BBbb2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是()①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④3、关于单克隆抗体,下列叙述不正确的是()A、可以制成诊断盒.用于疾病的珍断B、可以与药物结合,用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产D、可以在生物体内生产,不能体外生产4、“生物导弹”是指()A、单克隆抗体B、带有特定药物的单克隆抗体C、杂交细胞D、B淋巴细胞【课后案】1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较,在动物细胞融合中有特殊性的是()A、融合的原理B、融合的优点C、融合的诱导手段D、融合的过程2、下图是单克隆抗体制备过程示意图,其中1过程注射的物质和A细胞的名称为()A、抗体、T淋巴细胞B、抗原、T淋巴细胞C、抗体、B淋巴细胞D、抗原、效应B淋巴细胞3、单克隆抗体和血清抗体相比,其优越性在于()A、单克隆抗体能够制成“生物导弹”B、单克隆抗体能够在体外制备C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、免疫活性高D、单克隆抗体制备过程简单4、单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是()A.特异性强、灵敏度高B.与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C.体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D.由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌5、试管婴儿、试管苗、克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果,下面对其生物学原理及技术的叙述正确的是()A.都属于无性生殖,能保持母本性状B.都是细胞工程的技术范围C.都充分体现了体细胞的全能性D.都不会发生基因重组和变异6、右图为细胞融合的简略过程,请据图回答:(1)若A、B是植物细胞,在细胞融合之前已用__________________________处理,除去了____________;由A、B到细胞C的过程中,常用的物理方法是_____________________________。融合完成的标志是_______________。(2)若A、B是植物细胞,则形成的D细胞还要应用______________________________技术把D培养成植株。(3)若A、B是动物细胞,一般取自________________________________,然后用____________________使其分散开来;由A、B到C的过程中,常用的不同于植物细胞融合的手段是_______________________,所形成的D称为_____________________,A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有______________________________________。(4)若该过程是制备单克隆抗体,A为小鼠效应B细胞,那么,在获得此细胞之前,小鼠已经被注射了___________。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应,生成了__________________________________________,图中B为______________。(5)若该过程仍是制备单克隆抗体,在A、B到C的过程中,所形成的C有_____种,用来培养的D细胞应该是_________________。从中选择出它的方法是_________________培养,获得D后,常用的培养方法是培养液中培养和___________________________________。