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1专题八主攻点之（一）一、选择题1．(2019·南京六校联考)用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ和二者的混合物分别降解一个1000bp(1bp即1个碱基对)的DNA分子，对降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，凝胶电泳结果如图所示。该DNA分子的酶切图谱(单位：bp)正确的是()解析：选C根据电泳图可知KpnⅠ切割只得到1种DNA片段，判断该DNA分子是环状，且该DNA分子上只有1个KpnⅠ切点。EcoRⅠ切割得到2种DNA片段，说明该DNA分子上有两个EcoRⅠ切点。据此分析选项中的酶切图谱，只有C项符合。2．中华鲟是地球上最古老的脊椎动物，被称为“活化石”。研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境。下列说法错误的是()A．该工程可以定向改变蛋白质分子的结构B．改造蛋白质是通过改造基因结构而实现的C．改造后的中华鲟和现有中华鲟仍是同一物种D．改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质解析：选D蛋白质工程通过对基因进行人工合成或修饰，最终定向改变蛋白质分子的结构；改造后的中华鲟遗传物质变化不大，和现有中华鲟不存在生殖隔离，仍是同一物种；改造后的中华鲟含有控制新蛋白质合成的基因，所以后代具有改造的蛋白质。3．农杆菌中的Ti质粒是植物基因工程中常用的运载体，下列相关叙述正确的是()A．Ti质粒是能够自主复制的单链DNAB．Ti质粒中磷酸基团都与两个脱氧核糖相连接C．重组Ti质粒的受体细胞只能是植物愈伤组织细胞D．Ti质粒上的基因可全部整合到受体细胞染色体上解析：选BTi质粒是能够自主复制的环形双链DNA分子，其分子内部的磷酸基团都与两个脱氧核糖相连接。重组Ti质粒的受体细胞可以是植物愈伤组织细胞，也可以是其他的植物细胞，如植物的受精卵细胞。农杆菌有Ti质粒，Ti质粒上有一段TDNA，目的基因需插入Ti质粒上的TDNA中形成重组质粒载体，再导入农杆菌，然后让含重组质粒载体的农2杆菌侵染植物，只有Ti质粒上的TDNA片段(内有目的基因)而不是Ti质粒上的全部基因整合到受体细胞染色体上。4．下列关于人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是()A．表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA逆转录获得B．表达载体的复制和胰岛素基因的表达均始于复制原(起)点C．借助抗生素抗性基因可以将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来D．表达载体中的启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用解析：选C胰岛素基因在人体肝细胞中不表达，所以从肝细胞中不能提取到胰岛素基因转录成的mRNA；基因的表达始于启动子，基因的复制始于复制原点；抗生素抗性基因作为标记基因，可以将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来；启动子是转录的起点，终止密码子是翻译的终点。5．(2019·无锡一模)下列关于细胞工程的叙述，正确的是()A．组织培养中的材料和用具都要经灭菌处理，全程需无菌操作B．利用发酵罐大量生产细胞代谢产物，体现了细胞的全能性C．体细胞核移植过程中，目前常采用将供体细胞注入去核卵母细胞的技术D．动物细胞悬液制备过程中，用胃蛋白酶处理时要注意控制时间解析：选C组织培养中的材料要经消毒处理，用具经灭菌处理，全程需无菌操作；利用发酵罐大量生产细胞代谢产物，没有发育成完整个体，不能体现细胞的全能性；体细胞核移植过程中，常将供体细胞注入去核卵母细胞；动物细胞悬液制备过程中，用胰蛋白酶处理时要注意控制时间。6．植物细胞工程作为一门新兴的生物技术，被广泛应用于社会生产，下列说法错误的是()A．人工种子是用人工薄膜为种皮包被植物愈伤组织形成的B．植物微型繁殖运用了植物组织培养技术，可快速繁殖良种植物C．作物脱毒常选取植物的茎尖，因为该处病毒较少或无病毒D．植物细胞融合中常用的融合手段有离心、振动、电激和PEG法解析：选A人工种子常使用人工薄膜作为种皮包被胚状体。7．下列关于植物组织培养及其应用的叙述，正确的是()A．离体的植物组织、器官必须经过灭菌才能接种到组织培养基中B．以植物芽尖为材料通过组织培养可以获得抗毒新品种C．生长素、细胞分裂素的调节作用在组织培养中非常重要D．以人工膜包裹植物愈伤组织和营养物质可制得人工种子解析：选C离体的植物组织、器官必须经过消毒(灭菌会杀死植物组织和器官)才能接种到组织培养基中；以芽尖为材料通过组织培养可以获得脱毒苗，但不属于新品种，抗病毒3的新品种需通过转基因技术获得；生长素、细胞分裂素调节作用在组织培养中非常重要；以人工膜包裹胚状体和营养物质可制得人工种子。8．(2019·江苏四校调研)细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列选择不合理的是()A．选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞B．选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率C．选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗D．选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得优质的突变体解析：选A高度分化的动物体细胞分裂能力弱，应选用胚胎细胞或幼龄动物细胞进行培养；胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性更容易；植物茎尖的病毒极少甚至无病毒，由其培养成的植株可不带病毒；植物组织培养的愈伤组织细胞一直处于不断的分生状态，易受到环境影响而发生基因突变。9．(多选)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如下图所示，下列有关叙述正确的是()A．过程①需使用逆转录酶B．过程②利用PCR扩增CarE基因需使用解旋酶和耐高温的DNA聚合酶C．过程③可用NaCl溶液处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞D．过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞解析：选AD利用PCR扩增基因时，通过高温使DNA解旋，不需要解旋酶，但需要耐高温的DNA聚合酶；用CaCl2溶液处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。10．(2019·扬州一模，多选)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，有关说法错误的是()A．①过程常用灭活的病毒，不可用聚乙二醇B．②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗HCG抗体4C．③过程以抗HCG单克隆抗体为抗原进行检测D．④过程需要添加抗生素等物质，以防止病毒污染解析：选ABD①过程常用灭活的病毒，也可用聚乙二醇；②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗体，但不一定是抗HCG的抗体；③过程以抗HCG单克隆抗体为抗原进行抗原—抗体检测；抗生素是防止细菌污染的，不能防止病毒污染。二、非选择题11．(2019·全国卷Ⅱ)植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。回答下列问题：(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术的特点有_________________________________________(答出2点即可)。(2)通过组织培养技术，可把植物组织细胞培养成胚状体，再通过人工种皮(人工薄膜)包装得到人工种子(如图所示)，这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。人工种皮具备透气性的作用是________________________。人工胚乳能够为胚状体生长提供所需的物质，因此应含有植物激素、________和________等几类物质。(3)用脱毒苗进行繁殖，可以减少作物感染病毒。为了获得脱毒苗，可以选取植物的________进行组织培养。(4)植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是________________________________(用流程图表示)。解析：(1)植物微型繁殖属于植物组织培养技术，其特点是能保持植物原有的遗传特性、繁殖速度快等。(2)人工种皮具备透气性，使胚状体易获得氧气，有利于胚状体进行呼吸作用。植物的生长需要有机物和无机物等营养，人工胚乳中应含有植物激素、矿质元素和糖等物质，这些物质都是胚状体生长所必需的。(3)植物的茎尖含病毒极少，适合用其进行组织培养获得脱毒苗。(4)植物组织培养中主要包含脱分化和再分化两个过程，结合基因工程，培育转基因植株的过程为：含目的基因的细胞――→培养愈伤组织――→诱导分化小植株。答案：(1)能保持植物原有的遗传特性，繁殖速度快(2)有利于胚状体进行呼吸作用矿质元素糖(3)茎尖(4)含目的基因的细胞――→培养愈伤组织――→诱导分化小植株12．(2019·苏州一模)逆转录病毒载体是目前应用较多的动物基因工程载体之一。运用5逆转录病毒载体可以将外源基因插入受体细胞染色体，使外源基因随染色体DNA一起复制和表达。研究发现逆转录病毒基因组的核心部分包括三个基因：Gag基因(编码病毒的核心蛋白)、pol基因(编码逆转录酶)、env基因(编码病毒的表面糖蛋白)。位于这些基因的两端有LTR序列(含有启动子、调节基因等)，控制着逆转录基因组核心基因的表达及转移。下图是构建逆转录病毒载体及用于培育转基因小鼠的过程。回答下列问题：(1)逆转录病毒主要组成物质有____________。(2)催化过程①的酶是________，过程②③中需要的工具酶分别是____________________，过程④⑤常用的导入方法是____________。(3)过程③中，外源基因一定要插入病毒DNA的LTR序列中的启动子后，其主要目的是________________________________________________________________________。(4)过程④中，导入病毒蛋白编码基因(Gag、pol和env)的目的是________________________________________________________________________。(5)如利用牛乳腺生物反应器生产人胰岛素，则应在构建基因表达载体时，使目的基因与________________________等调控组件重组在一起，一般导入牛________细胞中，最终牛的乳汁中就含有人胰岛素。解析：(1)逆转录病毒是RNA病毒，主要组成物质是RNA和蛋白质。(2)过程①是逆转录，需要逆转录酶催化，过程②需要限制酶切割DNA，过程③需要DNA连接酶将目的基因插入LTR序列中，过程④⑤是将目的基因导入动物细胞，常用显微注射法。(3)外源基因插入病毒DNA的LTR序列中的启动子后，可以控制外源基因的表达与转移。(4)导入病毒蛋白编码基因(Gag、pol和env)可以编码病毒的核心蛋白、逆转录酶和病毒的表面糖蛋白的合成，组成病毒的蛋白质。(5)利用牛乳腺生物反应器生产人胰岛素，构建基因表达载体时应使目的基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，才能使目的基因随乳腺蛋白基因的转录而正常转录，由于受精卵全能性最高，导入的受体细胞一般为牛受精卵。答案：(1)RNA和蛋白质(2)逆转录酶限制酶和DNA连接酶显微注射法(3)控制外源基因的表达与转移(4)合成组成病毒的蛋白质(5)乳腺蛋白基因的启动子受6精卵13．RTPCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示：(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、_________________________________________、______________和引物A等。(2)进行过程Ⅱ前首先要将反应体系的温度升高到95℃，其目的是________________________________________________________________________，该反应体系中所用的Taq酶至少应能耐受__________℃高温。(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要________个引物B。(4)利用RTPCR技术获取的目的基因______________(填“能”或“不能”)在物种之间交流；该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度，原因是_____________________________________________