DB14∕T 1613-2018 大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程

ICS65.120B16DB14山西省地方标准DB14/T1613—2018大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程2018-01-10发布2018-03-10实施山西省质量技术监督局发布DB14/T1613—2018I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12术语和定义........................................................................13材料准备..........................................................................14鉴定方法..........................................................................25调查..............................................................................26抗性评价..........................................................................27重复鉴定..........................................................................3附录A（规范性附录）调查用表.............................................................................4附录B（资料性附录）..................................................................5DB14/T1613—2018II前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山西省农业科学院提出并归口。本标准起草单位：山西省农业科学院农作物品种资源研究所。本标准主要起草人：张海平、王志、陈妍。DB14/T1613—20181大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程1范围本标准规定了大豆种质资源抗胞囊线虫鉴定的术语和定义、材料准备、鉴定方法、调查和抗性评价。本标准适用于大豆种质资源抗胞囊线虫抗性鉴定和抗性评价。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1大豆胞囊线虫病由病原物大豆胞囊线虫（HeteroderaGlycinesIchinode）感染引起的土传病害，其主要症状为叶片变黄，发育不良，植株矮小，开花少，结荚少甚至不结荚。大豆根系根瘤数明显减少，且不发达。在感病初期，根系附着白色、黄褐色小颗粒，后期根系开始腐烂，导致地上部分枯死。一般造成产量损失5%～10%，严重地块减产达30%以上，甚至颗粒无收。2.2生理小种简称为“小种”，在形态上相似而在培养性状、生理、生化、病理（致病力）或其他特性上有差异的生物型或生物群型。2.3鉴别寄主用于鉴别病原物生理小种（菌系、毒系）的抗病性不同的一套寄主植物品种。3材料准备3.1塑钵制备将厚度0.1mm的透气性塑料膜裁为宽26cm，高22.5cm的小块，用订书机将其制成宽11cm，高22cm的袋状塑料钵。3.2试验病土制备根据试验需要在病圃取适量的病土（大豆胞囊线虫密度≥30个胞囊/100g风干土），将病土与无菌20目细沙以2:1的比例充分混匀后制备成试验病土。DB14/T1613—201824鉴定方法4.1田间病圃法选择大豆胞囊线虫密度≥30个胞囊/100g风干土的病圃，当气温大于20℃时播种。穴播，行距50cm，株距13cm。每份材料播种10穴。每穴留苗1株。每30个材料设1个感病对照。同时种植1套生理小种鉴别材料。4.2病土塑钵法将试验病土装入塑钵至距钵口1cm处。然后将装好土的塑钵依次装入塑料箱中，放于温室。将塑料钵中土壤浇透，待钵内土壤干湿程度适宜后开始播种。每钵留苗3粒种子，表面覆盖病土1cm。出苗后每钵留苗2株，每个品种3个重复。每30个材料设1个感病对照。同时种植1套生理小种鉴别材料，随机摆放。温室温度保持在25℃～30℃，含水量控制在50%～60%。4.3人工接种鉴定法试验在温室中进行。将待鉴定的种质在育苗盘中育苗，同时播种小种鉴别材料。将出苗后子叶展开、根系发达、健壮一致的植株移栽到装有灭菌沙土的塑钵中，每钵2株，三次重复。每30个材料设1个感病对照。提前在病土中种植感病品种，在胞囊显盛期，将根系上的胞囊冲洗下来，制备成浓度为1000个/mL的卵悬浮液。待鉴定材料在移栽后3天接种卵悬浮液2mL。温室温度保持在25℃～30℃，含水量控制在50%～60%。5调查待感病对照白色胞囊突破根系表皮时即可调查。将待调查植株根系上的土轻轻抖掉或用水冲洗干净、晾干，统计其根上的胞囊数。鉴定调查表格见附录A。6抗性评价6.1生理小种鉴别大豆胞囊线虫生理小种划分具体见附录B。6.2鉴定有效性评价感病对照Lee根系上的胞囊数应在30.0个以上，抗性级别达高感，视为该次鉴定有效。6.3抗性级别划分根据根系平均胞囊数进行抗性级别划分，划分依据见表1。DB14/T1613—20183表1大豆对胞囊线虫的抗性级别划分依据抗性级别抗性类别胞囊数与症状0免疫（I）（根系胞囊数为0，植株生长正常）1高抗（HR）（0＜根系胞囊数≤3.0，植株正常生长）3抗（R）（3.0＜根系胞囊数≤10.0，植株生长基本正常或部分矮黄）7感（S）（10.0＜根系胞囊数≤30.0，植株矮小，叶片发黄、结实少）9高感（HS）（根系胞囊数＞30.0，植株不结实，干枯死亡）7重复鉴定当鉴定结果为抗或高抗时（抗性级别划分依据见表1），应进行重复鉴定确定其抗性。若重复鉴定结果有差异，以抗性级别低的结果为准。确定抗性后，将抗性品种移栽。DB14/T1613—20184AA附录A（规范性附录）调查用表大豆抗胞囊线虫鉴定调查表见表A.1。表A.1年大豆抗胞囊线虫鉴定调查汇总表播种日期：鉴定编号品种名称出苗期留苗数调查日期胞囊数平均胞囊数抗性评价12345678910DB14/T1613—20185BB附录B（资料性附录）生理小种鉴别B.1生理小种鉴别模式大豆胞囊线虫生理小种的鉴别有两种模式，一种为传统的Riggs鉴别模式，共4份材料，分别为Pickett、Peking、PI88788、PI90763，根据寄主根系平均胞囊指数来确定大豆胞囊线虫小种；一种为HG分类系统，辅助鉴别线虫是否变异，共7份材料，分别为PI548402、PI88788、PI90763、PI437654、PI209332、PI89772、PI548316。根据寄主根系平均胞囊数计算胞囊指数（FI）。大豆胞囊线虫生理小种Riggs鉴别模式见表B.1。表B.1大豆胞囊线虫生理小种Riggs鉴别模式鉴别寄主小种类型12345678910111213141516Pickett-+-+++--++---++-Peking-+-+----+-++++-+PI88788++-+-+---+---++PI90763----+--++-+-+-+++注：“+”表示FI大于等于10%；“-”表示FI小于10%。大豆胞囊线虫生理小种HG鉴别模式见表B.2。表B.2大豆胞囊线虫生理小种HG鉴别模式鉴别寄主HG分型01234567PickettPeking+PI88788+PI90763+PI437654+PI209332+PI89772+PI548316+注：“+”表示大于等于Lee寄生胞囊量的10%。DB14/T1613—20186B.2生理小种鉴别方法按照表B.1和表B.2划分标准确定生理小种。FI=（供试品种胞囊数/感病对照胞囊数）×100%；a_________________________________