DB14∕T 1637-2018 萱草种苗组培快繁技术规程

ICS65.020.20B62DB14山西省地方标准DB14/T1637—2018萱草种苗组培快繁技术规程2018-01-10发布2018-03-10实施山西省质量技术监督局发布DB14/T1637—2018I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件....................................................................13术语和定义........................................................................14组织培养..........................................................................25炼苗和移栽........................................................................36移栽后管理........................................................................37病虫害防治........................................................................38组培穴盘苗的质量要求..............................................................39包装、运输........................................................................4附录A（规范性附录）MS基本培养基成分表.............................................5DB14/T1637—2018II前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山西省农业科学院提出并归口。本标准起草单位：山西省农业科学院园艺研究所、山西梅芝园艺有限公司。本标准主要起草人：曹冬梅、付宝春、秦国杰、梁峥、贾民隆、段九菊、李永平、郑梅梅、张超、宋卓琴、康红梅。DB14/T1637—20181萱草种苗组培快繁技术规程1范围本标准规定了萱草种苗组培快繁的术语和定义、组织培养、炼苗和移栽、移栽后管理、病虫害防治、出苗、质量标准、包装和运输。本标准适用于萱草组培苗的生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程DB14/T1381萱草栽培技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1萱草具有观赏价值的萱草属植物的统称。3.2外植体从自然生长的活体植物上获取的用于建立植物组培快繁体系的原始材料。3.3组培苗利用植物组织、器官等外植体，通过植物组织培养技术获得的种苗。3.4玻璃化植物组培过程中出现的一种生理病变，表现为组培苗生长异常，幼叶或愈伤组织呈半透明、水浸状，植株矮小失绿，叶片皱缩卷曲。DB14/T1637—201823.5组培穴盘苗组培生根苗移栽在穴盘中培育的苗子。4组织培养4.1培养基配制选用MS为基本培养基，培养基成分见附录A。愈伤组织诱导培养基：MS+6-BA4mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.4mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L，pH5.8。不定芽分化和继代培养基：MS+6-BA1mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L，pH5.8。生根培养基：1/2MS+NAA0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L，pH5.8。4.2外植体的采集4.2.1采集时间连续晴天2d以上，上午8时～11时。4.2.2采集部位在无病害的萱草种植基地，选取生长健壮、无病害的萱草植株，待花梗抽出、花苞未开放时，采集花苞基部向下4cm～5cm的花梗作为外植体备用。4.2.3采集材料的处理即采即用。超过1h需用湿润的毛巾或滤纸包裹，然后置于温度为0℃～4℃的冰壶或冷藏室中保存，保存时间不超过24h。4.3外植体灭菌消毒4.3.1预处理自来水冲洗外植体表面，A)将材料放入烧杯中，用0.7g/L洗洁精水溶液浸泡5min～10min，B)用自来水流动冲洗30min，C)蒸馏水清洗3～4次，将材料取出放置于无菌干燥滤纸上，吸干表面水分置于超净台上。4.3.2灭菌消毒在超净工作台上，用浓度为75%的酒精表面消毒30s，再在质量体积百分比浓度为0.1%氯化汞溶液中灭菌12min，无菌水冲洗干净，无菌滤纸吸干表面水分，用消毒刀片切去外部变褐的部分。4.4接种和愈伤组织诱导将花梗切成1cm的切段作为外植体材料接入到愈伤组织诱导培养基中，培养温度25℃，暗培养30d后生成愈伤组织。4.5不定芽的分化和继代培养DB14/T1637—20183将得到的愈伤组织接种于分化培养基上进行不定芽的诱导，诱导出的丛生芽在分化培养基上继代增殖两次，获得丛生芽。培养条件为温度23℃～25℃，光照强度3000Lx，光照时间16h/d。继代次数不超过6次。4.6生根培养将继代培养的丛生芽在无菌超净台上接种到生根培养基中，培养条件为温度25℃，光照强度3000Lx，光照时间16h/d。5炼苗和移栽5.1组培苗标准组培苗粗壮、挺直，叶片3～5片，色泽正常，具有原品种特性，无玻璃化；根系1～3条根，根长2cm～3cm或5～6条短根，根长1cm～2cm，色白健壮；同一批次90%以上的苗高度整齐，约4cm～6cm，培养基无污染。5.2基质基质要求排水透气性强、固定性好、肥力高。可以选用泥炭、珍珠岩混合基质（体积比4：1），泥炭纤维度20mm～45mm，pH值6.0～7.0。5.3容器规格72孔育苗穴盘，穴盘的尺寸为54cm×28cm。5.4环境要求具备防雨、遮阴的育苗大棚，温度20℃～30℃，空气湿度≥70%。5.5移栽方法将瓶苗瓶口打开移到温室内炼苗，一般需当日炼苗完毕，以免污染，影响成活率。组培苗出苗时，将根部培养基清洗干净，然后用50%多菌灵可湿性粉剂600倍液对组培苗进行蘸根杀菌处理，栽植到栽培基质中，轻压根部。6移栽后管理移栽后管理按照DB14/T1381执行。7病虫害防治病虫害防治按照GB/T8321（所有部分）和NY/T2306执行。8组培穴盘苗的质量要求植株整齐健壮，苗高8cm～10cm，叶片数5～6片，根系完整且发达，变异率低于5%，无其他病虫害的危害症状。DB14/T1637—201849包装、运输9.1包装9.1.1组培苗包装组培苗保留在培养瓶中，将培养瓶放在泡沫箱里，箱外再用纸箱包装。9.1.2穴盘苗包装穴盘苗装在小纸箱内，再将小纸箱装在大纸箱中，每箱装3～4个穴盘。箱体上要带有透气孔，在包装箱上贴上标签，注明品种、数量、规格、生产单位和日期。9.2运输装车时切勿倒置，运输时避免日晒雨淋，运输过程温度保持在16℃～20℃。DB14/T1637—20185AA附录A（规范性附录）MS基本培养基成分表表A.1给出了MS基本培养基成分一览表。表A.1MS基本培养基成分表母液化合物数量（g）蒸馏水定容量（ml）配制1L培养基需母液量（ml）ANH4NO316.51000100KNO319.0KH2PO41.7MgSO4.7H2O3.7CaCl2。2H2O4.4BFeSO40.5571005Na2-EDTA0.754CKI0.0831001Na2MoO4.2H2O0.025CoCl2。6H2O0.0025CuSO4.5H2O0.0025MnSO4.4H2O2.23ZnSO4.7H2O0.86H3BO30.62DVB10.00410010EVB60.00510010F甘氨酸0.0210010G烟酸0.00510010肌醇1.010010蔗糖30.0直接加入琼脂7.0注：1、A为大量元素；B为铁盐；C为微量元素；D～H为有机成分。_________________________________