ICS67.120.30B52DB41河南省地方标准DB41/T1689—2018大鲵人工繁殖技术规程TechnicalregulationsfortheartificialpropagationofAndriasdavidianus2018-09-29发布2018-12-29实施河南省质量技术监督局发布DB41/T1689—2018I前言本标准按照GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》给出的规则起草。本标准由河南省农业厅提出。本标准起草单位:河南师范大学、南阳农业职业学院、济源市渔业技术推广站、济源市宏基鲟鲵养殖有限公司、洛阳茂发农业科技有限公司、西峡县亚珏金鲵有限责任公司、河南省华鲵生物科技股份有限公司、河南省水产科学研究院、河南省大鲵保护与发展协会、新乡市质量技术监督局。本标准主要起草人:乔志刚、李泳、贾武、史朝斌、贾小平、高建敏、冯书伟、王松军、赵道全、崔桂堂。DB41/T1689—20181大鲵人工繁殖技术规程1范围本标准规定了大鲵人工繁殖的环境条件、亲鲵培育、人工催产、人工孵化。本标准适用于大鲵的人工繁殖。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB11607渔业水质标准GB/T18407.4农产品安全质量无公害水产品产地环境3环境条件应符合GB/T18407.4的规定。4亲鲵培育4.1培育池准备4.1.1亲鲵培育池建在室内或室外;单池面积2m2~5m2;池底硬化或铺垫沙砾、设置洞穴。4.1.2新建水泥池,提前浸泡池子50d~60d,期间换水3次,去除池壁中的碱性。4.1.3对于旧池,清理打扫池底,维修洞穴,铺整洞底石沙,要求池壁、池底无渗漏,注、排水系统畅通。同时,用2mg/L~3mg/L二氧化氯(8%含量)溶液或10mg/L~20mg/L高锰酸钾溶液泼洒消毒。6h后,清水冲洗,排出废水。4.1.4培育池水源要求充足,保持常流水。4.2亲鲵放养4.2.1亲鲵消毒亲鲵放养前用下列方法之一消毒:a)水温12℃±2℃时,3mg/L~10mg/L高锰酸钾溶液,浸浴大鲵5min~10min。b)水温12℃±2℃时,1%氯化钠溶液,浸浴大鲵15min~30min。c)水温12℃±2℃时,0.5mg/L~1mg/L二氧化氯(8%含量)溶液,浸浴大鲵10min~15min。4.2.2雌、雄配比雌:雄配比宜为1:1。若繁殖群体小50尾时,雌:雄配比宜为1:1~2。4.3饲养管理4.3.1调节投饵量4.3.1.1水温10℃~16℃时,按大鲵体重的2%~4%投饵,3d投喂一次。4.3.1.2水温17℃~22℃时,按大鲵体重的6%~8%投饵,2d投喂一次。DB41/T1689—201824.3.2阶段培育4.3.2.1春、夏季培育(4月~7月)4.3.2.1.14月~5月,养殖水温上升至12℃以上时,按4.3.1.1要求投饵。4.3.2.1.26月~7月,养殖水温达到全年最高峰(25℃左右),按4.3.1.2要求投饵。4.3.2.1.3产前1个月,控制养殖水温在18℃~21℃;调控环境光照强度300Lux以下;模拟自然生境中的流水声;同时投喂鲜活的泥鳅、鲫鱼等饵料。4.3.2.2秋季培育(8月~11月)4.3.2.2.18月~9月,处于大鲵产卵和产后恢复期,大鲵体质虚弱。产后亲鲵要专池放养;加大水量,增强水的流动性;维持水温17℃±2℃;雄鲵取精当天、雌鲵产卵结束后2d即可投喂,投喂量为亲鲵体重的5%左右,饵料鲜活、适口。4.3.2.2.210月~11月,亲鲵体质恢复正常,亲鲵进入摄食旺盛阶段。此时可将大鲵的投喂量由占亲鲵体重的5%提高到8%左右。4.3.2.3冬季培育(12月~翌年3月)4.3.2.3.1进入12月~翌年1月,水温降至9℃以下时,亲鲵进入冬眠状态,停止投饵。4.3.2.3.2翌年2月~3月,水温达到10℃以上,按4.3.1.1要求投饵。4.3.2.3.3低温冰冻时,要及时破冰补水。5人工催产5.1催产池催产池建在室内或遮阳棚下,砖混结构,内贴瓷砖,池底硬化,并搭建人工洞穴。面积2m2~10m2,池深0.8m~1.0m,水深25cm~35㎝。每池注、排水方便,水质清澈,池水微流,池内光线暗弱。5.2催产药物与催产器具5.2.1催产药物催产药物包括:绒毛膜促性腺激素(HCG)、促黄体生成素释放激素(LRH)及其类似物(LRH-A))等。5.2.2催产器具催产器具包括:注射器、显微镜、量具、温度计、吸管、计重器、消毒柜等。5.3催产季节人工饲养已经用于生产的适龄亲鲵(即不是第1年用于催产的亲鲵)和春、夏、秋各季培育较好的亲鲵,性腺成熟早,8月初催产。初产亲鲵或发育较差的亲鲵8月底至9月初催产。5.4亲鲵配组5.4.1催产亲鲵要求催产用亲鲵无病无伤、体质健壮、副性征明显、性腺发育良好;年龄7龄~10龄,体重3kg~8kg。同一批催产的雌、雄亲鲵,个体质量相当,配组时避免近亲交配。5.4.2雌、雄鉴别DB41/T1689—20183雄性大鲵泄殖孔椭圆形,纵轴明显长于横轴,泄殖孔左右各有一椭圆形的橘瓣状肌肉隆起,泄殖孔内缘两侧有白色米粒状细小突起。雌性大鲵泄殖孔多为圆形,泄殖孔略小,泄殖孔周围无隆起,外缘平滑,内缘亦无白色米粒状颗粒,孔内缘两侧可见皮层形成的向腔面突出的皱褶。5.4.3雌、雄搭配自然产卵和受精时,雌꞉雄=1꞉2,雄鲵在比例中最少不能低于1.5;人工授精时,雌꞉雄=1꞉1,雌鲵在比例中最大不超过2。无论采取自然受精还是人工授精,当繁殖群体相对较小(少于50尾)时,应提高雄亲鲵比例。5.5催产5.5.1注射次数一次注射是指将催产剂量一次注入,使亲鲵发情繁殖。二次注射是将催产剂量分两次注入,首次注射全量的1/6~1/10,24h后再增注到全剂量。生产中采用一次注射还是二次注射,主要视亲鲵性腺发育的成熟度、计划催产季节而定。5.5.2注射剂量每千克亲鲵体重注射HCG2000IU和LRH-A20µg。每尾大鲵注射液体量0.5ml~3.5ml。夏初催产,水温低,注射剂量可比常量高出四分之一。检查成熟程度好的亲鲵,注射剂量可少些。同一时期催产,雄鲵注射剂量同雌鲵注射剂量相同。5.5.3注射部位在背腹交汇的皮肤皱褶处。5.6人工拉卵、采精和授精5.6.1人工拉卵观察雌鲵在池中有卵带产出后,随机将大鲵轻轻捉起,一人用湿布蒙住大鲵头部,将大鲵腹部朝上平放在桌台上,轻轻稳住大鲵头部;另一人一手稳住大鲵尾部,一手不停轻拍大鲵腹部;第三人则轻轻向外拉卵,拉出的卵带顺势放进一个无水干净的瓷盆或烧杯中。采卵结束后,将卵用另一干净的盆或沙布盖起,等待授精。5.6.2人工采精人工拉卵结束后,及时捕捉发育良好的雄鲵;将大鲵腹部朝上,平放在桌台上。一人用湿布蒙住大鲵头部,不时向头部轻撒洁净的凉水稳住大鲵;另一人一手稳住大鲵尾部,一手不停轻拍大鲵腹部和泄殖孔;第三人则轻压腹部,先将膀胱中的尿液排出,擦干泄殖孔周围,用干燥洁净的试管收集挤出的精液;将装有精液的试管避光存放于冰盆中待查,存放时试管不与冰面直接接触。5.6.3人工授精采取的大鲵精液,经显微镜检查,确认含有活力精子后,直接滴加到事先采集的大鲵卵子上,摇动盛卵容器,同时用羽毛均匀搅拌精、卵lmin~2min,使精、卵充分混合,加少量(覆卵即可)蒸馏水,停20min,期间不停摇动盛卵容器,用清水洗卵两次去除污物,将受精卵移入孵化器中孵化。6人工孵化DB41/T1689—201846.1孵化方法6.1.1静水孵化静水孵化是通过定时换水,不时缓慢翻动受精卵使其孵化。静水孵化用水量小,孵化容器简单,孵化可供选择的环境多。静水孵化方式,受精卵“贴膜”现象普遍,孵化中如出现胚胎“贴膜”,胚胎即难以继续正常发育,并很快死亡。静水孵化劳动强度大,出苗率低,批量孵化时可操作性差。6.1.2静水冲气孵化静水冲气孵化包括纯氧充气孵化和压缩空气充气孵化。静水冲气孵化出苗率也较低,孵化中关键要控制冲气力度,冲气量过大,易将受精卵卵黄冲散,气量过小,受精卵不易翻动,胚胎很易“贴膜”。进行冲气孵化(尤其是冲空气)时,要控制空气中的霉菌污染受精卵,造成孵化失败。6.1.3微流水孵化使受精卵在水微流的状态下进行孵化。采用地下水开展微流水孵化时,需防范水温长期低于15℃。如果采用地上水孵化,需防范水质污染。6.1.4冲气流水孵化采用冲气和流水相结合的方法进行孵化。6.2孵化放卵密度根据孵化方式不同,孵化放卵密度不同,净水孵化密度低,流水充氧孵化密度高。一般孵化放卵密度为1000粒左右/m3水体。6.3孵化日常管理6.3.1调解水深孵化水深控制在10cm~20cm。6.3.2调控水温孵化水温控制在18℃~20℃。该水温条件下,胚胎30d左右孵化脱膜。6.3.3调控水质维持孵化水体溶氧5mg/L以上;水体pH值6.5~7.5;水体硬度小于3mmol/L;铵态氮及亚硝态氮均小于0.1mg/L。其他条件应符合GB11607渔业水质标准要求。6.3.4其他孵化管理6.3.4.1受精第1d,受精卵刚放入孵化容器时,不宜随意翻动,只有当受精卵吸水膨胀从水底上浮后,方可对其进行操作管理。6.3.4.2为防治水霉菌侵袭受精卵,孵化过程中,每7d用高锰酸钾溶液(5mg/L~10mg/L)浸洗受精卵1次,1次浸洗3min~5min。6.3.4.3孵化过程中,为方便受精卵在水中漂动,保护卵黄不被冲散,孵化时可将卵带在两个卵子之间剪开孵化。孵化过程中,发现死卵及时清理。_________________________________