DB61∕T 1082-2017 番茄灰霉病抗性鉴定技术规范

ICS65.020.20B16DB61陕西省地方标准DB61/T1082—2017番茄灰霉病抗性鉴定技术规范RuleforResistanceevaluationofTomatogreymold2017-07-13发布2017-08-06实施陕西省质量技术监督局发布DB61/T1082—2017I目次前言...............................................................................II1范围..............................................................................12术语和定义........................................................................13病原物............................................................................13.1病原物来源和保存..............................................................13.2孢子悬浮液的制备..............................................................14抗病性鉴定........................................................................14.1室内鉴定......................................................................14.2田间鉴定......................................................................24.3病情级别与标准................................................................24.4抗性级别判定..................................................................3DB61/T1082—2017II前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由西北农林科技大学提出。本标准由陕西省农业厅归口。本标准负责起草单位：西北农林科技大学。本标准主要起草人：王阳、马青、宗兆锋、赵新贝。本标准由西北农林科技大学负责解释。本标准首次发布。联系信息如下：单位：西北农林科技大学电话：[phone]地址：陕西杨凌邰城路3号邮编：712100DB61/T1082—20171番茄灰霉病抗性鉴定技术规范1范围本标准规定了番茄灰霉病抗性鉴定技术的术语和定义、病原物制备、抗病性评价标准及鉴定报告等内容。本标准适用于番茄生产品种、新育成品种、区域试验品种、亲本及中间材料的灰霉病抗性鉴定和抗性评价。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1番茄灰霉病Tomatogreymould由灰葡萄孢BotrytiscinereaPers侵染引起的番茄真菌性病害。植株的叶片、花、果实和茎均可受害。叶片发病，形成“V”字形病斑；幼果受害先危害残留的花瓣、花托，后向果实扩展呈灰白色腐烂；茎部受害，为深褐色长椭圆形病斑；湿度大时产生灰色霉层。3病原物3.1病原物来源和保存采集灰霉病病株，从发病植株的典型病斑上分离纯化病菌，经致病性测定后，4℃保存备用。长期保存于-80℃超低温冰箱中。3.2孢子悬浮液的制备灰霉病菌在PDA平板上黑暗培养7d产孢后，收集孢子，2%的蔗糖溶液配置孢子悬浮液（1×106孢子/ml）。4抗病性鉴定4.1室内鉴定4.1.1苗期鉴定选取待测番茄品种和感病对照六叶期幼苗，进行孢子悬浮液喷雾接种，接种后在23℃、相对湿度90%的黑暗条件下保湿24h。每份试材3次重复，每重复10株。4d后调查发病率和严重度，并按照公式（1）计算灰霉病病情指数。病情指数=∑（各级病株数×该病级值）/（调查总株数×最高级值）×100………………………（1）DB61/T1082—201724.1.2离体叶片鉴定选取待测番茄和感病对照六叶期植株第3片复叶，采用孢子悬浮液点滴接种,每份试材3次重复，每重复30片小叶。在小叶中心近轴处用移液器加5µL孢子悬浮液，以2%蔗糖溶液作对照。将接种后的叶片置于直径9cm的培养皿内，封口膜封口。在23℃、相对湿度90%的黑暗条件下培养24h后进行光照培养，光照时间为12h/d，光照强度为3000lx。4d后记载侵染型，计算病情指数。4.1.3果实鉴定取发育一致的果实，在果实对应侧面用消毒针尖扎3mm深的孔，接种5µL孢子悬浮液，以灭菌蒸馏水5µL作对照。每份试材3次重复，每重复5个果，每果扎2个孔。将果实置于湿度90%的器皿中保湿，20℃黑暗条件下保存，4d后测量病斑面积，计算病斑扩展速率和相对病斑扩展速率。4.2田间鉴定4.2.1鉴定圃设置在番茄灰霉病常发区域设置抗性鉴定圃。田间鉴定病圃的栽培条件（品种、土壤类型及施肥）须均匀一致，设立保护行。在鉴定圃中每个材料种2行，每行15株，选当地感病品种做对照，重复3次。4.2.2接种方法用2%蔗糖溶液配置孢子悬浮液（1×106孢子/ml）接种，接种采用喷雾法。在番茄初花期进行接种，接种前2d田间浇灌，以满足发病所需条件。选择傍晚接种，保湿24h。接种后15d、30d各调查一次；记载病株率和严重度。4.3病情级别与标准4.3.1室内苗期和田间鉴定病情级别室内苗期和田间鉴定病情级别见表1。表1室内苗期和田间鉴定病情级别抗性类别病情级别症状缩写类别0级叶片无病斑I免疫1级单叶片有病斑3个HR高抗3级单叶片有病斑4个～6个R抗病5级单叶片有病斑7个～10个MR中抗7级单叶片有病斑11个～20个，部分密集成片S感病9级单叶片有病斑密集占叶面积四分之一以上HS高感4.3.2离体叶片病情级别离体叶片病情级别见表2。DB61/T1082—20173表2离体叶片病情级别抗性类别病情级别症状缩写类别0级叶片无病斑I免疫1级病斑面积占整个叶面积的5%以下HR高抗3级病斑面积占整个叶面积的6%～15%R抗病5级病斑面积占整个叶面积的16%～25%MR中抗7级病斑面积占整个叶面积的26%～50%S感病9级病斑面积占整个叶面积的50%以上HS高感4.3.3离体果实病情级别离体果实病情级别见表3。表3离体果实病情级别抗性类别病情级别症状缩写类别0级无病斑I免疫1级病斑直径小于1cmHR高抗3级病斑直径1cm～2cmR抗病5级病斑直径2cm～3cmMR中抗7级病斑直径3cm～4cmS感病9级病斑直径大于5cmHS高感4.4抗性级别判定4.4.1有效性判别对照感病品种的抗性级别达到7级～9级，该批次鉴定有效。4.4.2抗性评价4.4.2.1在连续3次鉴定的结果中，如有2次的抗性类别是一致的，则此抗性类别作为最终鉴定结论。4.4.2.2达到免疫-高抗的鉴定品种，当两次抗性类别不一致时，以记载的被确认的最高病情级别所对应的抗性类别为准。4.4.2.3同一鉴定品种的抗性级别一次为5级，另一次在5级以下或5级以上且相差1个等级，取抗性级别数值较大的鉴定结果；如果两次抗性级别相差2个级别以上（包括2个级别）的，则需要做第三次抗性鉴定。4.4.2.4同一鉴定品种的抗性级别一年在5以上，另一年在5以下的，则需要做第三次抗性鉴定，按本标准4.4.2.1～4.4.2.3规则重新划分抗性类别。_________________________________