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ICS65.020.01B15DB21辽宁省地方标准DB21/T2793—2017水稻抗稻曲病鉴定技术规程Technicalspecificationforidentificationfalsesmutresistanceofrice2017-04-27发布2017-05-27实施辽宁省质量技术监督局发布DB21/T2793—2017I前言本标准按GB/T1.1—2009给出的规则编写。本标准由辽宁省农村经济委员会提出并归口。本标准由辽宁省农业科学院、辽宁省标准化研究院起草。本标准主要起草人：缪建锟、徐晗、佟宜沅、董海、杨皓、刘晓舟、褚晋、闫晗。DB21/T2793—20171水稻抗稻曲病鉴定技术规程1范围本标准规定了水稻抗稻曲病（Ustilaginoideavirens）的相关术语和定义、抗性鉴定、抗性评价和调查记录表等。本标准适用于水稻对稻曲病的抗性鉴定，有关研究及生产单位可参考执行。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4404.1-2008粮食作物种子第1部分禾谷类NY/T1300-2007农作物品种区域试验技术规范水稻3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1稻曲病ricefalsesmut指由稻曲病菌（有性态Clavicepsvirens；无性态Ustilaginoideavirens）引起的真菌性病害，又称伪黑穗病、稻乌米，该病只发生于水稻穗部，为害部分谷粒。受害谷粒内形成菌丝块渐膨大，最初外包一层白色薄膜，后破裂，露出黄色、墨绿色粉末，即病菌的厚垣孢子，有的稻曲球两侧或单侧产生黑色扁平菌核。3.2稻曲球ricefalsesmutballs被稻曲病菌侵染的水稻稻粒膨大形成的球状物，稻曲球表面为黄色、墨绿色的厚垣孢子覆盖。3.3病原分离物pathogenicisolates指采用单孢分离法从稻曲球或菌核分离获得病原体的纯培养物。3.4病圃diseasenursery指在多个水稻生长季未使用杀菌剂，在稻曲病自然易发区设立的鉴定圃。3.5DB21/T2793—20172抗病性鉴定identificationofdiseaseresistance在水稻生长发育阶段，通过自然诱发或人工接种等方法接种稻曲病菌，使其发生稻曲病，并依据相关的抗病性评价标准，来确定水稻品种抗病性强弱的鉴定方法。4抗病性鉴定4.1田间自然鉴定4.1.1病圃设置按NY/T1300-2007标准执行。4.1.2栽培方式按GB4404.1-2008标准选取水稻种子，选择当日平均气温稳定在5℃～6℃以上开始播种。供试品种经清水浸种3天～5天后，均匀播种在8cm～10cm高的苗床上，每平方米播种150～200g。待水稻长至3片～4片叶，当日平均气温稳定在12℃以上开始插秧。每个品种为一个小区，每个小区种植行长2m，栽植5行，每行15穴左右，每穴插秧2株～3株，行距30cm。施肥、灌水按照正常田间管理进行，全生育期不使用杀菌剂。病圃四周种植感病品种。4.2人工接种鉴定4.2.1病原物分离与孢子收集采用单孢分离法分离病原物，用马铃薯蔗糖液体培养基进行培养，培养温度28℃～30℃，摇床转速150r/min，振荡7天，使用2层纱布过滤收集孢子悬浮液。4.2.2接种体制备选择当地3个以上不同来源菌株混合，用马铃薯蔗糖液体培养基制作成浓度约1×106cfu/mL的孢子悬浮液作为接种体。孢子萌发率需达到95%以上。4.2.3接种时期水稻幼穗分化第7期～8期（即破口前3天～7天）。4.2.4接种方法采用注射接种法，用注射器将孢子悬浮液从水稻穗苞中下部注入，接种量以穗苞充满孢子悬浮液为限。接种后进行15℃～20℃、90%相对湿度以上保湿处理4天，之后正常田间管理。4.2.5对照设置设置感病品种作为阳性对照，注射马铃薯蔗糖液体培养基的稻穗作为空白对照，每个对照接种20穗。4.3调查方法4.3.1田间自然鉴定调查在水稻黄熟期稻曲病病情发生稳定后进行调查。每个小区取中间3行，随机调查10穴，记录调查总穗数、病穗数、穗病粒数，计算病穗率、病穗平均病粒数。DB21/T2793—201734.3.2人工接种调查在接种25天后调查接种结果，调查所有接种稻穗，记录接种总穗数、病穗数、穗病粒数，计算病穗率、病穗平均病粒数。4.3.3调查记录表：稻曲病调查记录表见附录A。4.3.4计算方法：病穗率（%）=发病总穗数/调查总穗数×100病穗平均病粒数=∑（各穗病粒数）/病穗数5抗病性评价标准当人工接种的空白对照未发病，人工接种感病品种穗发病率达到85%以上时，该批次人工接种抗病性鉴定视为有效。将每个品种的病穗率和病穗平均病粒数作为品种抗稻曲病的评价依据（参照表1）。病穗率与病穗平均病粒数级别之间出现差异时，以抗性低的为准。多次鉴定的品种亦以抗性低的为准。稻曲病抗病性评价标准见表1。表1稻曲病抗病性评价标准级别病穗率（%）病穗平均病粒数（粒/穗）抗性评价000高抗（HR）10.01～3.00≤2.00抗（R）33.01～7.002.01～5.00中抗(MR)57.01～15.005.01～10.00中感(MS)715.01～25.0010.01～15.00感(S)9＞25.00＞15.01高感(HS)DB21/T2793—20171附录A稻曲病调查记录表见附录A。稻曲病调查记录表品种：调查地点：调查日期：记录人：株数病株数稻曲球数总球数病穗率病穗平均病粒数级别备注_________________________________