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ICS65.020.30B44备案号：54231-2017DB22吉林省地方标准DB22/T2554—2016貉人工授精技术操作规程ProcedureofArtificialInseminationforRaccoonDog2016-12-09发布2017-03-01实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2554—2016I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院特产研究所。本标准主要起草人：徐超、赵家平、宋兴超、邢秀梅、吴琼、李巨民、王凯英、王晓旭、鲍坤、杨颖。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2554—20161貉人工授精技术操作规程1范围本标准规定了貉人工授精设施、采精、精液品质检查、精液处理、母貉发情鉴定、输精等人工授精技术环节。本标准适用于貉的人工授精。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件2.1精子密度spermdensity单位体积精液中所含的精子总数。2.2精子活力spermmotility精液中呈直线前进运动精子所占精子总数的百分比。2.3精子畸形率malformedrateofsperm单位体积精液中畸形精子占精子总数的百分比。2.4有效精子数numberofeffectivesperms精液中能够直线前进运动的正常形态精子总数。3人工授精设施3.1采精输精室位于饲养区上风向，面积4m2～8m2，室内分采精输精室、精液处理室两部分，室内配备相应功率消毒设备和控温设备，应保温良好、清洁无尘。3.2人工授精设备参见附录A。4采精4.1采精前的准备4.1.1室内温度控制在18℃～25℃。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2554—201624.1.2器械准备对所有器具消毒，采精杯、玻棒、载玻片、所需的稀释液等用前预热至37℃。4.1.3种公貉准备清洗公貉的阴部（阴茎、阴囊）并用清洁纱布擦干。4.1.4采精员准备采精员洗净双手后穿工作服戴一次性手套。4.2按摩法采精辅助人员保定公貉呈站立姿势。采精员按摩其阴茎至勃起时后快速按摩数次，待射出乳白色精液后及时用集精杯收集精液。隔天采精1次。5精液品质检查5.1感观检查5.1.1颜色呈乳白色或浅灰色。5.1.2气味略带特殊微腥味。5.1.3射精量正常射精量为0.1ml～1.5ml。5.2显微镜检查5.2.1精子密度用细胞计数板或精子密度仪测量，密度为2.0亿/ml～13.0亿/ml。5.2.2精子活力载玻片预热至37℃后显微镜下鲜精的精子活力应高于0.6。5.2.3精子畸形率鲜精中畸形精子应低于15%。要求每头公貉每两周检查一次精子畸形率。5.3记录填写公貉精液品质检查记录表。6精液处理6.1精液稀释本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2554—201636.1.1稀释倍数确定根据精子活力和密度确定稀释倍数，确保每头份稀释精液中至少含有0.7亿有效精子数。6.1.2等温稀释稀释液37℃预热。精液采集后在20分钟稀释完毕，稀释后精子活力不低于0.6。6.2精液的保存6.2.1精液稀释完应即时输精，体外保存时间不超过2h。6.2.2如需长期保存请选择长效保存稀释液，将精液温度从33℃～35℃缓慢降到稀释液推荐温度后恒温保存，每隔3小时缓慢摇匀一次。6.3记录填写精液稀释记录表。7母貉发情鉴定7.1外阴观察法发情时母貉阴门肿胀程度有所变化，肿胀面光亮消失而出现皱纹，触摸时柔软不硬，富有弹性，颜色呈暗红色，阴部外翻且有黄色分泌物呈凝固状，为适宜输精期。7.2放对试情法将母貉放于试情公貉笼内，母貉性情温顺，后肢叉开站立，尾巴翘起歪向一侧，静候公貉爬跨交配。7.3阴道细胞学检查法用棉签或吸管吸取阴道分泌物制成涂片，在400倍显微镜下观察，角化细胞占满视野，圆型细胞缺少为适宜输精期。7.4记录填写母貉发情鉴定记录表。8输精8.1清洗母貉的阴部并用清洁纱布擦干。利用貉输精针过宫颈口输精，缓慢将0.5ml～1ml精液注入子宫内，肌注抗生素。8.2每日1次，连续输精3次。8.3记录填写母貉输精记录表。A本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2554—20164附录A（资料性附录）人工授精设备人工授精设备见表A.1。表A.1人工授精设备名称单位数量用途保定架台1采精输精保定用显微镜台1观察精液品质和阴道分泌物涂片输精针只适量输送精液扩张器只适量扩张阴道集精杯只适量收集精子精子密度仪/细胞计数板台/块1检测精子密度紫外灯≥2W/m3适量室内空气消毒空调台1室内温度调节水浴锅台1精液稀释温度调节蒸馏水器台1制备蒸馏水干燥箱台1输精设备消毒超声波清洗器台1输精设备清洗冰箱台常用材料低温保存本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2554—20165AB附录B（资料性附录）档案记录精液品质记录表见表B.1。表B.1精液品质记录表采精员：编号品种精液量颜色气味密度活力畸形率备注精液稀释记录表见表B.2。表B.2精液稀释记录表实验员：编号品种精液量原精活力精子密度稀释体积稀释后活力精液编号发情鉴定记录表见表B.3。表B.3发情鉴定记录表编号品种日期状态检验员日期状态检验员日期状态检验员输精记录表见表B.4。表B.4输精记录表编号公貉号日期输精员公貉号日期输精员公貉号日期输精员预产期C_________________________________本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印