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ICS65.020B62备案号：51796-2017DB36江西省地方标准DB36/T557—2016代替DB36/T557-2009金边瑞香脱毒快繁技术规程ThetechnicalregulationforVirusRemovalandRapidPropagationofDaphneodoravar.maginata2016-09-28发布2016-12-01实施江西省质量技术监督局发布DB36/T557—2016I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12脱毒试管苗无性系的建立............................................................13试管苗移植........................................................................24上钵..............................................................................2DB36/T557—2016II前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由江西省林业厅提出并归口。本标准起草单位：江西省科学院生物资源研究所、江西省大余县花卉生产办公室、江西省林业科技推广总站。本标准主要起草人：江洪如、金晓鹏、朱祺、李新、彭军、钟东洋、余发新、毛新琳、吕新、王碧琴、刘腾云、高柱。本标准与DT36/T557—2009版相比，修订如下：——将“3.1培养基配置”条款中3.1.2至3.1.5步骤合并调整为3.1.2，“琼脂条”修改为“卡那胶”,3.1.6、3.1.7顺序分别调整为3.1.3、3.1.4；——将“3.3.1接种”条款中“取出试管苗，切下顶芽以及带有2～3个节的下部茎段，然后”内容删除；——将“4.1炼苗”条款中“20℃左右的温水”修改为“自来水”；——将“5.1基质”条款中“将红壤土：砻糠灰：河沙：珍珠岩按3：1.5：0.5：0.5配比，加入800倍液多菌灵消毒，装入14×16cm的营养钵中，再将苗高6cm左右小苗栽入钵内，轻浇水。”调整为“用金边瑞香无土栽培基质或直接用泥炭土为基质，装入14cm×16cm的营养钵中，再将苗高6cm左右小苗栽入钵内，轻浇水使基质湿润。”；——将“5.2施肥”条款中“每万盆每次施1.5kg”修改为“每万盆根据苗的大小每次施10kg～50kg”；——将“6苗木分级”修改为“6苗木分类”。DB36/T557—20161金边瑞香脱毒快繁技术规程1范围本标准规定了金边瑞香茎尖诱导培养、脱毒组培苗无性系的建立、脱毒试管苗的移栽、脱毒盆苗培养及苗的分级、包装、检疫等。本标准适用于江西省金边瑞香脱毒快繁。2脱毒试管苗无性系的建立2.1培养基的配置2.1.1配置MS基本培养基。2.1.2每升溶液中加入5g～6g卡那胶，再加入所需激素种类和浓度，与基本培养基混合搅刀，pH值调为5.7～5.8。2.1.3装瓶，瓶的大小220ml左右，每瓶装培养基35.5ml。2.1.4封好瓶口后，放进灭菌锅内进行高压灭菌；灭菌的压力为0.09MPa，时间为25min。2.2脱毒2.2.1外植体处理选择生长健壮的金边瑞香枝条作为脱毒组培苗的外植体。将嫩芽在自来水下洗净，用0.1%升汞溶液浸泡12min，无菌水冲洗4次～5次，无菌滤纸吸干水分，切下顶芽，然后在超净台中双筒显微镜下剥离0.2mm～0.3mm的茎尖，接种到预先准备好的诱导培养基中，每瓶接种5个。茎尖诱导培养需50d～70d。2.2.2茎尖的诱导培养及脱毒检测由单个茎尖诱导获得的单芽分别转入MS+6-BA0.5-1mg/L+NAA0.1mg/L的培养基中培养，待长成2cm～3cm高的试管苗，将茎苗再切成带有一个节的基段，继续在原培养基上培养，然后将来自不同茎尖生长点的试管苗若干株进行脱毒检测，脱去5种病毒的苗可作为脱毒苗进行快速繁殖。2.3试管苗的无性系培养2.3.1.1接种在超净工作台上，按芽和茎段分别接入转代增殖培养基中，每瓶放8个材料；苗直径大于1.0mm以上的试管苗，切下1.5cm～2.0cm高的苗则接入生根培养基中，每瓶6个。2.3.2培养时间增殖培养每代50d；生根培养30d。2.3.3培养温度增殖培养为24℃～26℃；生根培养22℃～24℃。DB36/T557—201623试管苗移植3.1炼苗把要移植的生根瓶苗从培养间取出，放在室温处，打开瓶盖炼苗1d，用自来水将根上的琼脂轻轻洗净，切勿伤根，洗好后即可移植。3.2基质及配比珍珠岩：泥炭=2：1，将珍珠岩、泥炭及50%的多菌灵1500倍液按比例均刀混合，然后装入6cm×8cm的容器中待用。将刚洗好的生根苗移入，栽后轻浇水，使基质湿润。3.3置放移植苗应置放在有防虫网的棚内；或具备500m以上隔离条件（即500m内没有种植传统繁殖的金边瑞香）的棚内。3.4小苗管理3.4.1温度小苗在棚内一般可正常管理。当棚内温度低于5℃时，则刚移栽的小苗须加小拱棚保温15d；若棚内温度高于30℃，则应覆盖遮阳网并喷雾降温。3.4.2水分移栽苗注意保湿，但水分不能过量。3.4.3养分移栽苗在30d后，有新根生长，可喷洒0.2%磷酸二氢钾一次，隔15d再喷洒一次。4上钵4.1基质用金边瑞香无土栽培基质或直接用泥炭土为基质，装入14cm×16cm的营养钵中，再将苗高6cm左右小苗栽入钵内，轻浇水使基质湿润。4.2施肥栽苗20d～30d后可喷0.2%磷酸二氢钾一次，以后每月施以20倍水稀释过的腐熟枯饼水溶液，每年抽枝前施复合肥1次～2次，每万盆根据苗的大小每次施10kg～50kg。4.3打顶定干当小苗长至10cm高时，即可打顶定干，生长一年的小苗可长成具2个～4个侧枝、高20cm的植株。4.4苗木分类原种苗：长根30d的试管苗；移栽成活苗：苗高6cm的移栽苗。4.5检疫DB36/T557—20163外调苗木应按国务院发布的《植物检疫条例》和农业部、原林业部的《植物检疫条例实施细则》以及《中华人民共和国进出境动植物检疫条例实施细则》严格检查把关。_________________________________