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ICS65.150B52备案号：41104-2014DB32江苏省地方标准DB32/T540.2—2013代替DB32/T540.2—2002家化暗纹东方鲀养殖技术规范第2部分：人工繁殖技术Rulesfortheculturingtechnologyofpollutiondomesticfuguobscurus—Part2:Artificialpropagationtechnology2013–12–30发布2014–01–20实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T540.2—2013I前言DB32/T540-2011《家化暗纹东方鲀养殖技术规范》分为四个部分；——第1部分：亲鱼培育技术；——第2部分：人工繁殖技术；——第3部分：鱼苗培育技术；——第4部分：幼鱼育成技术。本部分代替DB32/T540.2-2002《无公害家化暗纹东方鲀养殖技术规范人工繁殖技术》。本部分为DB32/T540-2011的第2部分，给出了家化暗纹东方鲀的人工繁殖技术。本标准与DB32/T540.2-2011相比修改如下：——增加规定了催产时间为“3月中旬～4月下旬”。——增加了催产池的规定，同时对催产池内的水质、水温也做了明确要求。——删除了网箱孵化的有关内容。——对产卵效应时间作了一般性规定。——从专人轮流值班，注意观察发情情况；产卵池内提供一定的水流刺激，进一步保证性腺的发育；环境一定要安静，防止任何惊扰三个方面对产亲鱼管理作了具体规定。本部分中附录A为规范性附录。本部分中附录B为资料性附录。本部分由江苏省海洋与渔业局、南通市海安质量技术监督局提出。本部分主要起草单位：江苏中洋集团股份有限公司、南通市海安质量技术监督局。本部分主要起草人：钱晓明、郭正龙、杨小玉、孟庆宇、邹宏海。DB32/T540.2—20131家化暗纹东方鲀养殖技术规范第2部分：人工繁殖技术1范围本部分规定了家化暗纹东方鲀人工繁殖的环境条件、催产、人工授精和孵化。本部分适用于家化暗纹东方鲀的人工繁殖。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅所注日期的版本的适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18407.4农产品安全质量无公害水产品产地环境要求NY5051无公害食品淡水养殖用水水质SC1011鱼用绒毛膜促性腺激素DB32/T540.1-2011无公害家化暗纹东方鲀养殖技术规范亲鱼培育技术DB32/T541-2011家化暗纹东方鲀疾病防治技术规范DB32/T542-2011家化暗纹东方鲀配合饲料3环境条件3.1人工繁殖场地应符合GB/T18407.4的规定。3.2人工繁殖用水应符合NY5051和DB32/T540.1-2011中附录A的规定。4催产4.1催产时间3月中旬～4月下旬。4.2催产池圆形或方形水泥池，面积30m2～50m2，水深0.6m～0.8m。清整与消毒按DB32/T541-2002中4.2.2的要求进行。4.3催产池水温适宜水温19℃～24℃，要求与亲鱼培育池温差不大于2℃。4.4催产亲鱼选择4.4.1雌雄性别判定雌雄性别判定见表1。表1家化暗纹东方鲀雌雄性别判定鉴别特征雌性雄性外观背鳍基部平滑，黑斑宽短。背鳍前方横纹间距略相等。腹部两侧膨大，体侧轮廓略呈“S”形，触摸腹部可明显感到柔软的卵巢，且有左大右小的感觉。背鳍基部略下凹，基部黑斑窄长。背鳍前方横纹间距不等。体形自然狭直。触摸腹部可明显感到有发硬的精巢，无不对称感觉。游泳行为游动速度较慢，比较安静。游动时，胸鳍张开与体轴形成的角度小，且摆动轻柔平缓。游动速度较快，稍显活泼。游动时，胸鳍张开与体轴形成的角度大，几乎垂直，除水平摆动外，还伴有上下抖动，似涡轮状。DB32/T540.2—201324.4.2选择要求4.4.2.1雌鱼应腹部性腺轮廓明显，较柔软，泄殖孔略扩大。4.4.2.2雄鱼应体质健壮，腹部有性腺轮廓，轻压下腹部，有精液溢出。4.4.2.3雌雄配比为1：1～1：1.5。4.5催产剂配制方法见附录A。4.6催产剂注射方法和剂量左胸鳍鳍窝处腹腔注射催产剂。催产剂注射方法为两针注射法，具体注射方法和剂量按表2规定执行。表2两针注射法及剂量针次催产激素剂量间隔时间第1针PG＋LHRH－A雌：（1～2.5）mg/kg＋（5～10）µg/kg雄：减半第2针PG＋LHRH－A＋HCG雌：（1～2.5）mg/kg＋（10～20）µg/kg＋（200～300）IU/kg雄：减半12h～24h4.7催产亲鱼管理4.7.1亲鱼注射催产剂后应放入催产池，并由专人轮流看护，观察亲鱼活动和发情情况。4.7.2催产池内应保持一定的水流，流速0.1m/s～0.2m/s。4.7.3保持催产池及其四周环境安静。4.8效应时间产卵池水温19℃～24℃，产卵的效应时间为20h～30h。5人工授精5.1授精时机判断5.1.1临产雌鱼授精时机判断腹部柔软，泄殖孔松开，生殖突红肿，用手挤压腹部，卵粒游离至泄殖孔。取卵粒浸于卵球透明液（透明液配制：无水乙醇85%、福尔马林10%、冰乙酸5%）2min～3min后逆光肉眼观察卵的形态，卵粒应晶莹透亮，外形正规，大小均匀，有80%～90%卵核偏位。5.1.2临产雄鱼授精时机判断轻轻挤压腹部精巢部位，泄殖孔有乳白色精液溢出，精液遇水即散。5.2操作程序采用干法授精。取待产亲鱼，用手指堵住泄殖孔；再用干毛巾吸干鱼体体表水分；保持鱼头微上斜，泄殖孔朝下，从前向后缓缓推挤腹部，将精、卵同时挤入已消毒、干燥、洁净的光滑容器内，同时用消毒、柔软的羽毛轻匀搅动精、卵，充分混合；然后徐徐加入0.7％的生理盐水，直至淹没，继续搅拌1min～2min；倒去上层浑浊水，换上清水；重复用清水洗卵两次到三次，直至水清为止，即可移入孵化器中孵化。5.3操作要求5.3.1应三人密切配合进行，采精、采卵、搅拌动作应轻柔，同步。5.3.2雌雄配比为1：1～1：1.5。5.3.3人工授精时应避免阳光直射。5.3.4精、卵混合前不应与水接触。5.4产后护理DB32/T540.2—201335.4.1产后亲鱼应注射消炎针，青霉素注射剂量为每千克5万～15万单位。5.4.2产后鱼培育池应弱光，水深1.5m，保持微流水，溶氧量大于8mg/L，并保持环境安静。5.4.3增加饵料营养，增投鲜活饵料。6孵化6.1孵化条件6.1.1水质应符合3.2的规定，初次用水应经沉淀、曝气、过滤处理，并使用孔径0.18mm的尼龙筛绢过滤。6.1.2水温孵化适宜水温19℃～25℃。6.1.3孵化设施孵化桶孵化，孵化桶容水量500L，放卵密度1.0×105粒/桶～2.0×105粒/桶。孵化桶制作参见附录B。6.2孵化管理6.2.1调节水流速度使受精卵在水中能均匀分散涌起。6.2.2保持桶罩网布清洁。6.2.3孵化过程中应及时去除未受精卵。6.3孵化时间从受精至出膜所需时间因水温而异，孵化时间见表4。表4不同水温家化暗纹东方鲀胚胎发育所需时间水温，℃1618202224时间，d1086～7546.4胚后管理6.4.1鱼苗出膜24h后，将先期孵出的鱼苗分离至另一孵化桶，24h后开始喂饲轮虫（需经140目筛绢过滤），喂饲时保持微流水、微充气5min～10min。6.4.2胚后发育阶段，应保持生态条件稳定，溶氧量保持在不少于7mg/L。6.4.3待鱼苗卵黄囊基本消失，鱼鳔显现，具主动摄食能力，即可进入鱼苗培育阶段。7档案管理记录档案，并保存两年以上。DB32/T540.2—20134附录A（规范性附录）催熟注射液、催产剂注射液的配制方法A.1鲤鱼脑垂体（PG）注射液A.1.1PG颗粒大而完整、颜色白晰，干燥冷藏保存。A.1.2取所需剂量的鲤鱼脑垂体，置于干燥的研钵中研成粉末，然后加入0.7％的生理盐水，研磨成悬浊液即成。现配现用。A.2鱼用绒毛膜促性腺激素（HCG）注射液A.2.1HCG质量应符合SC1011的规定。A.2.2取所需剂量的鱼用绒毛膜促性腺激素溶于0.7％的生理盐水，即成。现配现用。A.3鱼用促黄体素释放激素类似物（LHRH－A）注射液A.3.1LHRH-A为白色粉未状晶体，水溶性好。A.3.2取所需剂量的鱼用促黄体素释放激素类似物溶于0.7％的生理盐水即成注射量。_________________________________