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ICS65.020.30B44备案号:40369-2014DB11北京市地方标准DB11/T1053.4—2013实验用鱼第4部分：病理学诊断规范LaboratoryfishPart4：Specificationofpathologicaldiagnosis2013-12-20发布2014-04-01实施北京市质量技术监督局发布DB11/T1053.4—2013I目次前言.................................................................................II1范围...............................................................................12规范性引用文件.....................................................................13术语和定义.........................................................................14采样要求...........................................................................15检查频率...........................................................................26检查程序...........................................................................27检查方法及项目.....................................................................28检查结果及结论.....................................................................4DB11/T1053.4—2013II前言DB11/T1053的本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。DB11/T1053《实验用鱼》分为六个部分：——第1部分：微生物学等级及监测；——第2部分：寄生虫学等级及监测；——第3部分：遗传质量控制；——第4部分：病理学诊断规范；——第5部分：配合饲料技术要求；——第6部分：环境条件。本部分为DB11/T1053的第4部分。本部分由北京市科学技术委员会提出。本部分由北京市科学技术委员会归口。本部分由北京市科学技术委员会组织实施。本部分主要起草单位：国家人口计生委科学技术研究所，中国科学院水生生物研究所、中国食品药品检定研究院、北京大学、中国农业大学等。本部分主要起草人：孙德明、崔宗斌、岳秉飞、赵德明、张博、王天奇、孙荣泽。DB11/T1053.4—20131实验用鱼第4部分：病理学诊断规范1范围DB11/T1053的本部分规定了实验用鱼（斑马鱼和剑尾鱼）的病理诊断技术规范，包括病理标本的采样、检测频率、检测内容、检测程序、检测方法和结果判定、质量控制等项要求。本部分适用于实验用鱼（斑马鱼和剑尾鱼）病理学检查和诊断。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB11/T196常见鱼病防治技术操作规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1实验用鱼laboratoryfish经人工饲养、繁育，对其携带的病原微生物及寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的鱼类。4采样要求4.1采样对象选择3月龄以上的成鱼样本。4.2采样方式应在每一生产、实验设施内隔离的不同水环境内随机抽取样本鱼。病理样品的采集应与微生物学、寄生虫学检测联合进行。4.3采样数量抽样采集样品数量，见表1。DB11/T1053.4—20132表1抽样采集样品数量同一水环境实验用鱼数量抽样数量100尾以下5尾100尾以上5%，最大取样量为30尾4.4样本送检及运输样本送检及运输容器应清洁卫生，防止样本腐败或污染。样本应有特定编号和标志并附送检单，写明样本的来源、品种品系、级别、数量、检测项目和采样时间。5检查频率无特定病原体级实验用鱼种群每6个月至少检查一次；普通级实验用鱼种群每12个月至少检查一次。6检查程序检查程序见图1。抽样↓编号↓外观检查↓麻醉↓大体病理解剖病理学检查和取材↓组织病理学检查↓检测结果↓病理诊断报告图1病理学检查程序7检查方法及项目7.1检查方法7.1.1外观检查：利用目检和放大镜先行活体检查，观察其体表、色泽、营养、发育和活动状态。7.1.2大体解剖病理学检查：利用放大镜及解剖镜进行病理学剖检和组织涂片、压片或浸片检查。7.1.3组织病理学检查：利用光学显微镜，对疑似病变器官及组织进行常规的组织病理学检查。DB11/T1053.4—201337.2检查项目7.2.1外观鳞片、皮肤、皮下、侧线，机体外观形态及功能状况。7.2.2鳃检查鳃外侧、内侧和鳃片，从每一侧鳃的第一片鳃片取样作为组织学检查样本，检查鳃弓、鳃丝。7.2.3口腔及天然孔口腔，有无寄生虫或其包囊，刮取上下颌少许粘液镜检。检查其它天然孔。7.2.4体腔剖开腹腔，暴露器官，检查腹腔脏器病理变化。取病变组织，进行组织学检查。7.2.5胃肠观察肠胃外壁，剖检胃肠及内容物，压片镜检。7.2.6肝和脾肝脾颜色和病理变化：分别取肝、脾组织作组织切片检查和组织压片检查。7.2.7胆囊观察颜色、大小、有无病理变化，剪开胆囊，取胆囊和汁放在载玻片镜检。7.2.8肾脏取出肾脏，检查颜色和病理变化。取异常的肾脏组织作组织切片和组织压片，检查病理变化。7.2.9性腺和膀胱取出两侧性腺和膀胱进行检查。7.2.10心脏剪开胸腔，取出并剪开心脏镜检。取心脏组织进行压片镜检。7.2.11鳔完整取出鱼鳔，观察外观，然后剪开检查，并进行压片镜检。7.2.12眼球取出眼球，解剖镜检查。剪开巩膜，涂片作显微镜检查。7.2.13脊髓从头部与躯干交接处剪断脊柱，再把尾部与躯干交接处脊柱剪断，用镊子从前端的端口夹出脊髓，涂片镜检。7.2.14肌肉DB11/T1053.4—20134从鱼体的侧面剪开一部分皮肤，用镊子剥去皮肤，暴露肌肉组织，观察颜色，取疑似病变做组织病理学检查。7.2.15骨骼检查骨骼的发育和形态的异常情况。7.2.16检查要求外观检查，参照DB/T196中鱼体观察的要求进行；大体病理解剖检查和病理组织学检查，参照DB/T196中临床检验的要求进行。8检查结果及结论8.1不合格判定当被检样本鱼的外观检测、大体病理解剖和组织学检查出现一尾及一尾以上明显的感染性病变，或出现两尾及两尾以上明显的病变时，则判定该实验用鱼群为不合格，并注明病变的比率。8.2合格判定所有被检样本鱼的外观检测、大体解剖和组织学检查均未检出明显的病理变化，该普通级或SPF级实验用鱼群均判为合格；当被检样本鱼的外观检测或大体病理解剖检查出现轻度异常，组织学检查未检出明显的病理变化，该普通级实验用鱼群判为合格，SPF级实验用鱼群则判为不合格，并记录主要病变。8.3结果确认出具病理检查结果的人员，应具有病理学专业的学历和中级以上技术职务资格，并具有3年以上病理诊断的经历，且需要有同行复核一致的结果。病理诊断报告应由病理学专业高级技术职务的人员签署。_________________________________