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ICS65.020.20B22备案号：36385-2013DB32DB32/T2183-2012南粳5055原种生产技术规程BasicSeedProducingTechnologyofRiceVarietyNanJing50552012-12-28发布2013-02-28实施江苏省质量技术监督局发布江苏省地方标准DB32/T2183-2012前言为规范南粳5055原种生产技术，制定本标准。本标准按GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》编制。本标准由江苏省农业科学院提出。本标准起草单位：江苏省农业科学院。本标准主要起草人：赵庆勇、姚姝、周丽慧、陈涛、朱镇、赵凌、张亚东、王才林。DB32/T2183-20121南粳5055原种生产技术规程1范围本标准规定了南粳5055原种生产的产地环境、品种来源和类型、原种生产技术、收获、贮存和检验。本标准适用于沿江和苏南地区中上等肥力条件下南粳5055水稻原种生产。2规范性引用文件下列文件对于文本的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T3543.1-1995农作物种子检验规程总则GB/T3543.2-1995农作物种子检验规程扦样GB/T3543.3-1995农作物种子检验规程净度分析GB/T3543.4-1995农作物种子检验规程发芽试验GB/T3543.5-1995农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定GB/T3543.6-1995农作物种子检验规程水分测定GB/T3543.7-1995农作物种子检验规程其他项目检验GB4404.l-2008粮食作物种子禾谷类GB/T17316-1998水稻原种生产技术操作规程NY/T5117-2002无公害水稻生产技术规程DB32/T79-2007水稻壮秧与育秧技术标准DB32/T1762—2011稻米食味品质评价3产地环境应符合NY5116-2002的规定。4品种来源和类型4.1来源由江苏农业科学院粮食作物研究所以武粳13为母本，关东194为父本，经系谱法选育而成，2011年3月通过江苏省品种审定委员会审定。4.2类型早熟晚粳稻。5原种生产技术DB32/T2183-201225.1方法采用改良混合选择方法，即单株选择、分系比较、混合繁殖的三圃制。5.2单株选择5.2.1选择要求单株选择要求（种子来源、选择时期、选种数量、室内考种决选、考种项目、收获贮藏）应该符合GB/T17316-1998的规定。米粒具有暗胚乳基因的特性，蒸煮品质通过DB32/T1762—2011方法符合食味品质优良的品种要求。5.2.2选择标准当选单株的株型集散适中，生长清秀，叶片挺举，叶色较淡，后期秆青籽黄，手栽全生育期（155～160）d左右。株高（95～100）cm左右，主茎总叶片18叶，基部节间短，茎秆坚韧有弹性，耐肥抗倒。分蘖性较强，成穗率85%左右。穗型较大，穗长（16～18）cm。穗粒结构协调，每穗总粒数135～145粒，结实率90%左右，千粒重（24～25）g左右。5.2.3决选标准当选单株的株高应在（95～98）cm范围内，分蘖数在（7～8）个，伸长节间7个，主穗长（17～18）cm左右，每穗一次枝梗16个，每穗实粒数140粒，结实率90%，千粒重25g左右，单株籽粒重25g，稻米的直链淀粉含量在（10～12）%之间，米粒干燥后呈云雾状，择优选留。暗胚乳基因的分子检测方法见附录A。5.3株行圃5.3.1建圃将上年当选的各单株种子，按编号分区种植，建立株行圃。5.3.2育秧所有单株种子(包括对照种子)的浸种、催芽、播种，均须分别在同1d完成，应符合DB32/T79-2007的规定。5.3.2.1播期湿润育秧5月10日～5月15日播种。5.3.2.2播种密度按湿润育秧每亩净秧板播量20kg的密度标准进行控制。5.3.2.3秧龄湿润育秧秧龄30d左右。5.3.3田间设计符合GB/T17316-1998的规定，空间隔离距离不少于100m，时间隔离扬花期要错开15d以上。5.3.4移栽应符合GB/T17316-1998的规定，5.3.5田间管理和记载应符合GB/T17316-1998的规定。DB32/T2183-201235.3.6收获及淘汰应符合GB/T17316-1998的规定。5.4株系圃应符合GB/T17316-1998的规定。5.5原种圃应符合GB/T17316-1998的规定。特别注意黑条矮缩病的防治。6收获、贮存和检验收获应按GB/T17316-1998的规定。贮存和检验按GB/T3543.1～7-1995进行，符合GB4404.1-2008之规定的原种种子签发合格证书。DB32/T2183-20124附录A(资料性附录)暗胚乳基因的分子检测方法南粳5055是含有特殊的暗胚乳基因Wx-mq的水稻品种，可针对该基因进行分子标记检测。A.1标记序列将稻谷进行幼苗DNA提取，利CAPS标记进行分子检测,其正向引物序列为5׳-TGTGGCTGAGGTAGGAGCA-3׳,反向序列为5׳-AACGCATCTGGTTGTCTTTGT-3׳。A.2PCR反应体系。20μLPCR反应体系包括：10ng/μL的DNA1μL，4pmol/μL的引物2.0μLLPCR反应体系包括DNA(10ng/μL)1μL,Primer(4pmol/μL)0.2μL,10×PCRBuffer(无MgCl2)2μL,dNTP(2.5mmol/L)0.4μL,MgCl2(25mmol/L)0.6μL,Taq酶(5U/μL)0.2μL和ddH2O15.6μL。PCR反应在MJResearchPTC-200热循环仪上进行,反应程序如下:94℃下预变性5min,每个循环94℃下变性30s,55℃下退火30s,72℃下延伸1min,共35个循环;最后72℃下延伸10min,4℃下保存待用。A.3酶切体系PCR扩增产物5μL;NIaⅢ酶2μL(10U);10×NEBBuffer2μL;ddH2O11μL;反应总体系20μL。酶切反应在MJResearchPTC-200热循环仪上进行,于37℃下恒温4h。A.4产物分析酶切产物在2.5%琼脂糖上进行分离鉴定,经溴化乙锭(EB)染色并于凝胶成像系统下观察分析。具有215bp和170bp两条条带的样品为标准稻谷（图中1、4、5样品为标准Wx-mq基因带型；3、7为杂合Wx-mq基因带型；2、6为不含Wx-mq基因带型）。