ICS65.020.20B22备案号:33983-2012江苏省地方标准DB32/T2078-2012水稻不育系鉴定技术规范TheIdentificationRuleforMaleSterileLineofRice2012-05-08发布2012-08-08实施江苏省质量技术监督局发布DB32DB32/T2078-2012前言为规范江苏省水稻不育系鉴定,为水稻不育系及选配的杂交水稻新组合审定提供科学依据,制订本标准。本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》编制。本标准的附录A为规范性附录。本标准由江苏省农业委员会提出。本标准起草单位:江苏省种子管理站。本标准主要起草人:吉健安、阙金华、许明、陈爱辉、周春和。DB32/T2078-20121水稻不育系鉴定技术规范1范围本标准规定了水稻不育系鉴定内容和依据、通过鉴定的条件、鉴定现场要求和鉴定程序。本标准适用于江苏省农作物品种审定委员会办公室组织的水稻不育系鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB4404.1-20108粮食作物种子第1部分:禾谷类NY/T1215-2006水稻光、温敏雄性核不育系育性鉴定规程DB32/T1020-2007水稻品种审定规范3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1不育系malesterileline雌蕊发育正常而雄蕊花粉败育,自交不能结实的水稻品系。包括三系不育系和光温敏(两系)不育系。3.2败育类型abotiontype按照花粉的败育时期及形态特征,可以分为无花粉型(造孢细胞或花粉母细胞时期败育),典败型(单核期败育)、圆败型(二核期败育)、染败型(三核期败育)和核增生花粉败育类型(具4核或多核)5种。3.3柱头外露率percentageofexsertedstigma开花闭颖后柱头露在颖壳外面的比例,分单边外露率(仅一个柱头外露的比例)和双边外露率(两个柱头都外露的比例)。4鉴定内容和依据4.1内容包括不育系纯度、不育株率、败育类型、自交结实率、花粉不育度、柱头外露率、异交结实率,光温敏(两系)不育系还包括育性转换临界温度、临界光长和稳定不育天数等。4.2依据4.2.1不育系纯度、不育株率、败育类型、套袋自交结实率、花粉不育度、柱头外露率、异交结实率DB32/T××××—20122以省农作物品种审定委员会办公室组织的现场鉴定结果为主要依据。4.2.2光温敏(两系)不育系的育性转换临界温度、临界光长和稳定不育的天数以省农作物品种审定委员会办公室认可的机构鉴定结果为依据。5通过鉴定条件鉴定通过的不育系应同时符合以下条件:5.1不育系纯度不低于99.9%。5.2不育株率100%。5.3套袋自交结实率不高于0.05%。5.4花粉不育度不低于99.5%。5.5不育系选配的组合至少有一个具有较好的生产应用价值。5.6光温敏(两系)不育系在制种地适宜制种期内,育性转换临界温度和临界光长符合制种地条件的连续稳定不育时间在30d以上。DB32/T2078-20123附录A(规范性附录)现场要求、程序及主要技术指标的调查和计算方法A.1鉴定现场要求A.1.1不育系播种及栽插要求:在适宜不育系繁殖、制种的最大播期范围内分3期~5期播种,每期种植群体1000株以上,单本栽插(不准去杂,人为造成的缺株按杂株计算),鉴定现场生态环境与栽培条件应与当地生产实际条件相近。A.1.2分别在第1、2期上随机选择150个左右单株,每株选择1穗进行套袋,总数应在300个以上,套袋前要防止串粉,套袋穗用于鉴定自交结实率。A.1.3不育系繁殖和杂交水稻组合制种现场面积各不少于0.3亩。A.1.4不育系配制的杂交水稻组合示范现场面积不少于1亩。A.2鉴定时间以鉴定时能同时清晰判断自交结实及花粉育性的情况为原则。鉴定时,用于鉴定自交结实率的群体应抽穗达25天以上,能清晰判断自交结实情况,用于花粉育性鉴定的群体应处于抽穗期。A.3鉴定程序A.3.1听取申请者对不育系选育过程和育性、开花习性、品质、抗性、配合力等有关特征特性及配组利用等情况的介绍。A.3.2对不育系有关性状进行田间现场鉴定与室内鉴定。A.3.3审查申请者提供的有关材料,对有关问题进行质询。A.3.4根据现场和室内鉴定结果(光温敏不育系的育性转换临界温度、临界光长和稳定不育天数的鉴定报告)进行综合分析。A.3.5专家组集体讨论,形成鉴定结论,鉴定结论分鉴定合格、鉴定不合格。A.4主要技术指标的调查和计算方法A.4.1不育系纯度:现场检测不育系群体的一致性,要求检测总株数在3000株以上,调查杂株数,按式A.1计算纯度。C(%)=111()XYX×100·····························································A.1式A.1中:C—纯度X1—总株数Y1—杂株数A.4.2不育株率:在调查纯度的各群体内,调查同型可育株数,按式A.2计算不育株率。B(%)=222()XYX×100····························································A.2式A.2中:B—不育株率X2—总株数Y2—同型可育株数DB32/T××××—20124A.4.3自交结实率:在抽穗达25天以上的套袋自交穗中随机选取100个稻穗,计数总颖花数和总结实粒数,按式A.3计算自交结实率。Z(%)=33YX×100····································································A.3式A.3中:Z—自交结实率X3—总颖花数Y3—总结实粒数A.4.4花粉不育度及败育类型:在处于盛花期的不育系群体中随机选取50个稻穗,每个稻穗在上、中、下三个部位各选取1朵即将开花的颖花,每朵颖花取2~3枚花药,放入滴有1%碘-碘化钾溶液的载玻片上混合捣碎后进行镜检,观测有无花粉,无花粉的即为无花粉型;有花粉的每个镜片观测3~5个视野,观测花粉粒300个以上,计数典败、圆败、染败和正常花粉粒数。统计50个稻穗观测花粉粒总数和典败、圆败、染败、正常花粉粒总数及其百分比,确定花粉主要败育类型,按式A.4计算花粉不育度。H(%)=444()XYX×100·····························································A.4式A.4中:H—花粉不育度X4—观测花粉粒总数Y4—正常花粉粒总数A.4.5柱头外露率:在已抽穗的不育系群体中随机选取20个刚结束开花的稻穗,分别计数已开花的颖花总数,柱头单边外露的颖花数,柱头双边外露的颖花数。按式A.5计算柱头单边外露率、按式A.6计算柱头双边外露率,按式A.7计算柱头外露率。D(%)=55YX×100·····································································A.5式A.5中:D—柱头单边外露率X5—已开花的颖花总数Y5—柱头单边外露的颖花数S(%)=65YX×100·····································································A.6式A.6中:S—柱头双边外露率X5—已开花的颖花总数Y6—柱头双边外露的颖花数W(%)=565()YYX×100·····························································A.7式A.7中:W—柱头外露率X5—已开花的颖花总数Y5—柱头单边外露的颖花数Y6—柱头双边外露的颖花数DB32/T2078-20125A.4.6异交结实率:在不育系繁殖田和杂交水稻组合制种田相邻父本间的母本中每行随机选取1个单株,总数不少于10株,分别调查所取稻穗的结实粒数和总颖花数,按式A.8计算异交结实率。Y(%)=77YX×100·····································································A.8式A.8中:Y—异交结实率X7—所取稻穗总颖花数Y7—所取稻穗结实总粒数