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ICS65.020.20B31备案号：33991-2012江苏省地方标准DB32DB32/T2086-2012梨花粉制备与质量要求Technicalrequirementsforpollenpreparationandqualityofpear2012-05-08发布2012-08-08实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T2086-2012前言为保证梨花粉质量，确保梨树人工授粉效果，特制定本标准。本标准编写按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的机构和编写》的规定编写。本标准由南京农业大学提出。本标准由南京农业大学负责起草。本标准主要起草人：张绍铃、吴俊、陶书田、伍涛、黄小三、齐开杰、姜雪婷。DB32/T2086-20121梨花粉制备与质量要求1范围本标准规定了梨花粉制备的术语和定义、适宜品种选择、花粉制备、花粉包装与贮藏、花粉质量的检测。本标准适用于梨树人工授粉的花粉制备及其质量鉴定与要求。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本部分。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本部分。GB/T191包装储运图示标志3术语和定义下列术语的定义适用于本标准。3.1人工授粉Handpollination用人工方法把植物花粉传送到柱头上以提高坐果率的技术措施，是确保果实产量的一项重要措施，也是按育种目标选择亲本进行植物杂交育种的必要手段。3.2花粉萌发率Pollengermination花粉具有萌发长出花粉管的能力，花粉管的长度超过花粉粒直径的为萌发的花粉粒，反之为不萌发的花粉。供测定的花粉的萌发总数量与总测定的花粉数比值乘100%为花粉的萌发率。3.3离体培养Invitro花粉离开母体，通过体外培养让其萌发、生长的方法。4品种选择适合花粉采集的品种有‘砀山酥梨’、‘黄花’、‘丰水’等品种。应避免采集‘新高’、‘爱宕’等花粉败育或少的品种花朵。5花粉制备5.1花药采集5.1.1采花朵DB32/T2086-20122授粉之前采集花粉，可结合疏花进行。当供采集花粉的品种处于初花期时，采集处于含苞待放的大铃铛期花苞（开花的当天或前一天的花朵）。5.1.2取花药5.1.2.1镊子法花粉用量少时可采取人工取花药。方法是将采集的花朵，剥去花瓣，用镊子夹取出花药放在清洁的盘等容器中。这样采集的花药洁净，减少花瓣、花丝混入花药中。5.1.2.2牙刷法可一手持花朵，一手用废牙刷轻轻刷下花药，允许少量花丝混入。5.1.2.3双手对搓法两手各拿一朵花，花心相对进行对搓，然后再清除花瓣和花丝，即可获得花药。5.1.2.4采粉机法生产上需要大量的花粉时，应采用专用的采粉机处理花朵来采集花粉，以提高工作效率。5.1.3花药的摊放花药取出后平摊在盘内或纸上，厚度不超过0.5cm，时间一般在12h以内。5.2散粉5.2.1暖房干燥法将取出的花药平铺于硫酸纸上，摊薄，厚度不超过0.5cm，而后置于20℃～25℃左右的暖房内干燥，一般24h～36h花药即可开裂，散出黄色花粉。5.2.2灯泡干燥法将花药平摊在硫酸纸上，摊薄，厚度不超过0.5cm，而后置于普通型220V、15～60W白炽灯下，灯管距离花药大约20-25cm，花药表面温度应控制在22℃～25℃，约需24h～36h花药即可开裂，散出黄色花粉。5.2.3干燥剂干燥法将采集的花药用硫酸纸包好，置于装有变色硅胶干燥剂的密封瓶中。按1份花药8~10份干燥剂的比例，在最初的12h内，每隔2h~3h翻动一次，以确保花粉与干燥剂充分接触，以后可4h～5h翻动一次。注意当干燥剂的颜色由深蓝色转变为淡蓝色时需要进行更换。36～48小时可观察到黄色花粉散出。6花粉包装与贮藏6.1花粉包装收集的花粉过筛后，置于干净的瓶内备用。用于花粉包装的外包装材料应干燥、防潮、清洁、无异味。包装储运图示标志应符合GB/T191规定。6.2花粉贮藏6.2.1临时贮藏指一周内使用的花粉。花粉最好是现采现用。备用的花粉最好存放在阴凉干燥处临时存放。有条件的最好将花粉装入密闭干燥的容器内，放置于冰箱冷藏室（4℃）内冷藏。6.2.2短期贮藏DB32/T2086-20123指贮藏10d-30d的花粉，可以在冰箱的冷藏室（4℃）或低温冷库内（0℃以上）保存。6.2.3长期贮藏花粉贮藏1个月以上者，必须在冷冻条件下贮藏。花粉经干燥后装于变色硅胶盒内，外用锡纸包扎密封。贮藏时间在1年左右，可在-20℃条件下冷冻贮藏，贮藏时间在1年以上者，可进行液氮冻存超低温贮藏，待来年需要用时将贮藏的花粉依次在-73℃、-20℃、4℃中分别放置24小时进行逐步苏醒，最后于黑暗环境中恢复至室温，备用。该方法保险可靠，可有效维持梨花粉的萌发率，操作简单易行，节省空间。7花粉质量要求7.1纯度梨树液体授粉用的花粉纯度要求达到95%以上，尽量不要混杂花药、花丝等。7.2萌发率梨树授粉的花粉使用前应检测花粉的萌发率，萌发率要求在50%以上，萌发率低于30%花粉一般不用于人工授粉。7.3水分长期贮藏用的花粉含水量低于8%。而现采现用的新鲜花粉含水量不受限制。8花粉质量检测8.1花粉纯度的检测用200目筛将含有杂质的花粉过筛，称重，得出杂质含量，按公式（1）计算出花粉纯度。100%×%花粉总重量花粉中杂质含量花粉总重量）花粉纯度（………………………………（1）8.2水分的检测取花粉0.5g，准确称重到0.001g，然后放入25℃恒温箱中放置2天，按公式（2）计算出花粉水分。100%×%花粉烘干前的重量花粉烘干后的重量花粉烘干前的重量）花粉水分含量（………………（2）8.3花粉萌发率的检测采用花粉离体萌发法测定花粉萌发率。将花粉均匀播于固体培养基（0.01%的硼酸、10%的蔗糖和1%的琼脂)上，25℃暗培养24h后，统计萌发率。花粉管长度大于花粉粒直径视为萌发。每品种观察3个视野，每视野要30粒花粉，统计萌发率。花粉萌发率按以下公式（3）计算。100%×%视野中花粉粒总数视野中萌发的花粉数）花粉萌发率（………………………………（3）