DB32∕T 2007-2012 吡唑草胺含量的测定 色谱法

ICS71.040.40G04备案号：33217-2012江苏省地方标准DB32DB32/T2007-2012吡唑草胺含量的测定色谱法AnalyticalMethodformetazachlorbyChromatography2012-02-10发布2012-04-10实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T2007-2012前言本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》编写。本标准附录A、附录B为资料性附录。本标准由江苏省产品质量监督检验研究院提出。本标准起草单位：江苏省产品质量监督检验研究院、国家农药中心产品质量监督检验中心（南京）。本标准主要起草人：包素萍、张晓强、耿宁、俞幼芬、顾爱国、武中平、孙长恩。DB32/T2007-20121吡唑草胺含量的测定色谱法1范围本标准规定了吡唑草胺原药及其悬浮制剂中有效成分吡唑草胺含量色谱测定方法。本标准适用于吡唑草胺原药及其悬浮制剂中有效成分含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法3高效液相色谱法（仲裁法）3.1方法提要试样用乙腈溶解，以乙腈+水溶液为流动相，使用以C18为填料的不锈钢柱和紫外检测器，对试样中的吡唑草胺进行反相高效液相色谱分析，采用外标法定量。3.2试剂和溶液3.2.1乙腈色谱纯。3.2.2吡唑草胺标样：已知质量分数，≥99.0%。3.3仪器与设备3.3.1高效液相色谱仪，紫外检测器。3.3.2分析天平：感量0.0001g。3.3.3色谱柱：250mm×4.6mm不锈钢柱，内装C18（5μm）填料。3.3.4过滤器：滤膜孔径0.45m。3.3.5超声波振荡器。3.4高效液相色谱操作条件3.4.1流动相：乙腈/水=50/50(v/v）3.4.2流速：0.8mL/min。3.4.3检测波长：230nm。3.4.4柱温：35℃。3.4.5进样体积：5L。保留时间（min）：吡唑草胺约8.7。上述高效液相色谱操作参数是典型的，可根据不同仪器特点，对给定操作参数作适当调整，以期获得最佳效果。典型的吡唑草胺的高效液相色谱分离图参见附录B中图B.1。3.5测定步骤3.5.1标样溶液的制备DB32/T2007-20122准确称取吡唑草胺标样约0.040g(精确至0.0002g)于50mL容量瓶中,用乙腈溶解并定容至刻度，在超声波下振荡5min后，摇匀，用0.45m微膜过滤。3.5.2试样溶液的制备准确称取含吡唑草胺约0.040g(精确至0.0002g)的试样于50mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，在超声波下振荡5min后，摇匀，用0.45m微膜过滤。3.5.3测定在3.4操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针的有效成分峰面积相对变化小于1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。3.5.4计算试样中被测组分质量分数ω1（%）按式（1）计算：21121mm················(1)式中：A1——标样溶液中，吡唑草胺峰面积的平均值；A2——试样溶液中，吡唑草胺峰面积的平均值；m1——标样的质量，单位为克（g）；m2——试样的质量，单位为克（g）；ω——标样的质量分数，数值以%表示。计算结果保留三位有效数字。3.6允许差两次平行测定结果之差原药不大于1.5%，50%悬浮剂应不大于0.6%。4气相色谱法4.1方法提要试样用丙酮溶解，以邻苯二甲酸二戊酯为内标物，使用HP-5(30m×0.32mm×0.25μm)毛细管柱和氢火焰离子化检测器，对试样中的吡唑草胺进行气相色谱分析，采用内标法定量。4.2试剂和溶液4.2.1丙酮，分析纯。4.2.2吡唑草胺标样：已知质量分数，≥99.0%。4.2.3内标物：邻苯二甲酸二戊酯，分析纯（不含有干扰分析的杂质）。4.2.4内标溶液：称取邻苯二甲酸二戊酯3.0克，置于500mL容量瓶中，用丙酮溶解并稀释至刻度，混合均匀，密封备用。4.3仪器4.3.1气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器。4.3.2色谱柱：HP-5(30m×0.32mm×0.25μm)毛细管柱。4.4气相色谱操作条件4.4.1温度(℃)：柱室200,气化室270,检测器室260。4.4.2气体流量(mL/min):载气(N2):4,氢气：30，空气：400，尾吹气：25，隔垫吹扫气：3。DB32/T2007-201234.4.3进样模式：分流。4.4.4分流比：40：1。4.4.5进样体积：1μL。4.4.4保留时间（min）：吡唑草胺约4.0，邻苯二甲酸二戊酯（内标物）约5.1。上述操作条件，系典型操作参数，可根据不同仪器及色谱柱特点，对给定操作参数作适当调整，以期获得最佳效果。典型的吡唑草胺气相色谱图参见附录B中图B.2。4.5测定步骤4.5.1标样溶液的制备称取吡唑草胺标样0.05g(精确到0.0002g)置于25mL容量瓶中，用移液管准确加入8mL内标溶液，丙酮定容后摇匀备用。4.5.2试样溶液的制备称取含吡唑草胺0.05克的试样(精确到0.0002g)置于25mL容量瓶中，用移液管准确加入8mL内标溶液，丙酮定容后摇匀备用。4.6测定在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针吡唑草胺相对响应值变化小于2%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。4.7计算将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中吡唑草胺与内标物峰面积之比，分别进行平均。吡唑草胺的质量分数ω1(％)，按式(2)计算：21121mrmr················(2)式中：r1—标样溶液中，吡唑草胺与内标物峰面积比的平均值；r2—试样溶液中，吡唑草胺与内标物峰面积比的平均值；m1—吡唑草胺标样的质量，g；m2—试样的质量，g；ω—吡唑草胺标样的质量分数，数值以％表示。4.8允许差两次平行测定结果之差原药不大于1.5%，50%悬浮剂应不大于0.6%。DB32/T2007-20124附录A（资料性附录）吡唑草胺的其它名称、结构式和基本物化参数本产品有效成分吡唑草胺（吡草胺）的其它名称、结构式和基本物化参数如下：ISO通用名称：MetazachlorCAS号：67129-08-2化学名称：2-氯-N-(2,6-二甲基苯基)-N-(1H-吡唑-1-基甲基)乙酰胺。结构式：实验式：C14H16ClN3O相对分子质量：277.8（按2007年国际相对原子质量计）。生物活性：除草。熔点：85℃。蒸汽压（20℃）：0.049mPa。溶解性（20℃）：水中17mg/L；丙酮、三氯甲烷中＞1000g/Kg；乙醇中200g/kg。稳定性：中性介质中较稳定，40℃放置两年稳定。DB32/T2007-20125附录B（资料性附录）吡唑草胺色谱分离图图B.1吡唑草胺高效液相色谱分离图1.吡唑草胺1——吡唑草胺2——邻苯二甲酸二戊酯图B.2吡唑草胺气相色谱分离图