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ICS65.020.40B61备案号：江苏省地方标准DBDBDBDB32323232DB32/T1798—2011秤锤树组织培养繁殖技术规程TechnicalRegulationsofmicropropagationforSinojackiaxylocarpaHu2011-06-15发布2011-08-15实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T1798—2011I前言本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的规定编写。本标准由江苏省林业局提出并归口。本标准起草单位：江苏省林业科学研究院。本标准主要起草人：蒋泽平、黄利斌、窦全琴、张敏、蒋春。DB32/T1798—20111秤锤树组织培养繁殖技术规程1范围本标准规定了秤锤树组织培养繁殖中外植体选择与灭菌、初代培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、繁殖代数、炼苗移栽、移栽成活苗管理等要求。本标准适用于秤锤树组织培养规模化繁殖。2外植体选择与灭菌2.1外植体选择当年生健壮植株枝条或萌条的半木质化新梢长5cm～10cm。2.2外植体处理将半质化枝条切割成每段2cm～3cm的带芽茎段。2.3外植体灭菌枝条去叶毛，用软毛刷蘸液体皂轻刷干净，流水冲洗30min。将处理好的外植体在超净工作台上用70%酒精溶液浸泡30s～50s，然后转移至0.1%升汞溶液中消毒8min～10min，最后用无菌水冲洗3次～5次，接种于培养基中。3初代培养3.1培养基MS基本培养基附加BA2.0mg.L-1+IBA0.05mg.L-1。3.2培养条件温度25℃，光照强度2000lx，每日光照12h，培养40d后进入增殖培养。3.3接种将经过灭菌的外植体，按芽朝上的方向插入培养基。4增殖培养4.1培养基MS基本培养基附加BA1.0mg.L-1+TDZ0.05mg.L-1＋IBA0.05mg.L-1＋VC50mg.L-1＋S3%。4.2培养条件DB32/T1798—20112温度(25±2)℃，光照强度3000lx，每日光照14h。4．3培养方法在培养过程中，试管苗生长较弱时,将BA换成相同浓度的ZT使用。5壮苗培养5.1培养基MS基本培养基附加BA0.5mg.L-1+TDZ0.05mg.L-1+IBA0.1mg.L-1+VC50mg.L-1＋S3%。5.2培养条件温度(27±2)℃，光照强度3000lx，每日光照14h。5.3培养方法在培养过程中，试管苗生长较弱时,将BA换成相同浓度的ZT使用。6生根培养6.1培养基1/2MS（大量元素减半，其他成分不变）基本培养基附加NAA0.3mg.L-1+IBA0.5mg.L-1+VC100mg.L-1＋S2%。6.2培养条件温度(23±2)℃，光照强度3000lx，每日光照14h。6.3培养方法培养7d～15d长出0.5～1.0cm长的新根时，开始炼苗。7繁殖代数连续繁殖25代～30代，不能继续繁殖。需取外植体重新接种培养。8炼苗移栽8.1移栽温室温室使用前彻底消毒，用硫磺、百菌清烟雾剂熏蒸3-4次，温室使用后3个月左右用来苏水消毒。8.2炼苗在生根培养7d～15d长出0.5～1.0cm长的新根时开始炼苗，打开瓶口室内炼苗3d。8.3移栽基质蛭石:珍珠岩:泥炭=6:3:1（体积）的混合基质。DB32/T1798—201138.4移栽方法先将试管苗取出，在流动的清水中冲洗。移栽至含有蛭石:珍珠岩:泥炭=6:3:1（体积）的混合基质的营养钵中。8.5移栽条件控制温度25℃～30℃,相对湿度85%-90%,保湿15d～20d,其间采用遮光率80%～90%遮光网遮荫,35d后成活。9移栽成活苗管理9.1大田栽植时间试管苗移栽后60天大田栽植。9.2肥、水管理移栽成活苗喷施0.5‰的N∶P∶K=1∶1∶2的复合肥营养液，10d追施1次；基质不宜太湿，以攥在手中指间不滴水为原则，喷水与施肥相结合。9.3病虫害防治病害以预防为主，可用0.3%波尔多液或700～1000倍的50%多菌灵或75%的托布津喷施防治。晴天每月喷施1次，低温阴雨天半个月喷施1次，发生病害时，每周喷施1次。