ICS65.020.40B61备案号:江苏省地方标准DBDBDBDB32323232DB32/T1797—2011楸树组织培养繁殖技术规程Technicalregulationsofmicropropagationforcatalpabungei2011-06-15发布2011-08-15实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T1797—2011I前言本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》的规定编写。本标准由江苏省林业局提出并归口。本标准起草单位:江苏省林业科学研究院。本标准主要起草人:蒋泽平、黄利斌、窦全琴、张敏、蒋春。DB32/T1797—20111楸树组织培养繁殖技术规程1范围本标准规定了楸树组织培养繁殖中外植体选择与灭菌、初代培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、繁殖代数、炼苗移栽、移栽成活苗管理等要求。本标准适用于楸树组织培养规模化繁殖。2外植体选择与灭菌2.1外植体选择当年生健壮植株枝条或萌条的半木质化新梢10cm~15cm。2.2外植体处理将半质化枝条切割成每段2cm~3cm的带芽茎段。2.3外植体灭菌枝条去叶毛,用软毛刷蘸液体皂轻刷干净,流水冲洗50min。将处理好的外植体在超净工作台上用70%酒精溶液浸泡30s~50s,转移至0.1%升汞溶液中消毒8min~15min,最后用无菌水冲洗3次~5次,接种于培养基中。3初代培养3.1培养基N6基本培养基附加BA1.0mg.L-1+NAA0.01mg.L-1。3.2培养条件温度25℃,光照强度2000lx,每日光照12h,培养35d后进入增殖培养。3.3接种将经过灭菌的外植体,按芽朝上的方向插入培养基。4增殖培养4.1培养基N6或MS基本培养基附加BA1.0mg.L-1~2.0mg.L-1+NAA0.01mg.L-1~0.05mg.L-1。4.2培养条件DB32/T1797—20112温度(25±2)℃,光照强度2000lx~3000lx,每日光照16h。4.3培养方法在培养过程中,采用N6或MS基本培养基附加BA1.0mg.L-1~2.0mg.L-1+NAA0.01mg.L-1~0.05mg.L-1,试管苗生长较弱时,BA用量为1.0mg.L-1,或BA与ZT交替使用。5壮苗培养5.1培养基N6或MS基本培养基附加BA0.5mg.L-1~1.0mg.L-1+NAA0.05mg.L-1~0.1mg.L-1。5.2培养条件温度(23±2)℃,光照强度3000lx,每日光照16h。5.3培养方法N6或MS基本培养基附加BA0.5mg.L-1~1.0mg.L-1+NAA0.05mg.L-1~0.1mg.L-1,试管苗生长较弱时,将BA换成ZT使用。6生根培养6.1培养基N6或1/2MS基本培养基附加NAA0.3mg.L-1+IBA0.5mg.L-1。6.2培养条件温度(27±2)℃,光照强度3000lx,每日光照16h。6.3培养方法培养10d~15d长出1.0~1.5cm长的新根时,开始炼苗。7繁殖代数连续繁殖23代~25代,不能继续繁殖。取外植体重新接种培养。8炼苗移栽8.1移栽温室温室使用前彻底消毒,用硫磺、百菌清烟雾剂熏蒸3-4次,温室使用后3个月左右用来苏水消毒。8.2炼苗在生根培养10d~15d长出1.0~1.5cm长的新根时开始炼苗,打开瓶口室内炼苗3d。8.3移栽基质采用泥炭+黄心土=1:1(体积)混合基质。DB32/T1797—201138.4移栽方法先将试管苗取出,在清水中洗净。移栽至含有泥炭+黄心土=1:1(体积)混合基质的营养钵中。8.5移栽条件控制温度25℃~30℃,相对湿度85%-90%,保湿15d~20d,其间采用遮光率80%遮光网遮荫,30d后成活。9移栽成活苗管理9.1大田栽植时间试管苗移栽后50天大田栽植。9.2肥、水管理移栽成活苗喷施0.5‰的N∶P∶K=1∶1∶2的复合肥营养液,10d追施1次;基质不宜太湿,以攥在手中指间不滴水为原则,喷水与施肥相结合。9.3病虫害防治病害以预防为主,可用0.3%波尔多液或700~1000倍的50%多菌灵或75%的托布津喷施防治。晴天每月喷施1次,低温阴雨天半个月喷施1次,发生病害时,每周喷施1次。