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ICS11.020C50WS中华人民共和国卫生行业标准WS/T640—2018临床微生物学检验标本的采集和转运Specimencollectionandtransportinclinicalmicrobiology2018-12-11发布2019-06-01实施中华人民共和国国家卫生健康委员会发布WS/T640—2018I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件....................................................................13术语和定义........................................................................14标本采集、转运及处理的总原则......................................................25临床常见标本的采集、转运及处理...................................................10参考文献............................................................................21WS/T640—2018II前言本标准是按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准起草单位：北京大学人民医院、中日友好医院、安徽省立医院、首都医科大学附属北京友谊医院、北京医院、北京市垂杨柳医院。本标准主要起草人：王辉、刘颖梅、张正、马筱玲、苏建荣、胡云建、宁永忠、王晓娟。WS/T640—20181临床微生物学检验标本的采集和转运1范围本标准规定了临床微生物学（病毒学、细菌学和真菌学）检验标本采集和转运的技术要求。本标准适用于开展临床微生物学检验的各级医疗机构及其临床微生物学实验室。2规范性引用文件下列文件对于本文件的用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。WS/T348尿液标本的收集及处理指南WS/T499下呼吸道感染细菌培养操作指南WS/T442临床实验室生物安全指南WS/T503临床微生物实验室血培养操作规范3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1微生物学检验标本ClinicalMicrobiologicalSpecimen本文件微生物学标本指临床病毒学、细菌学和真菌学检验（包括涂片镜检、培养、抗原、抗体和分子技术等）所用的标本。3.2紧急检查标本STAT因疾病可能危及患者生命而需要立即处理的标本。3.3采样拭子Samplingswab用于采集含病原微生物标本的拭子，由两部分组成：①涂抹棒：柄部常为塑料或铝杆，柄部的一端是具有吸附作用的采样头，采样头材质包括脱脂棉、合成聚酯纤维、聚酰胺纤维、人造丝和泡沫聚氨酯等；②手柄：位于柄部的另一端，也可作为转运装置（容器或管）的帽。3.4转运TransportWS/T640—20182标本由采样地点运送到检验地点的过程，分为内部转运（如使用人工或气动传输等内部送样方式）和外部转运（如使用汽车、飞机或火车等外部送样方式）。3.5转运容器Transportcontainer用于盛放转运培养基和送检标本的容器。该容器应无菌、无消毒剂及防腐剂、无污染、密封性好及透明以便于从外部观察。当采样装置具备密闭功能，且能有效保护样本不被污染时，可作为转运容器运送标本。3.6转运培养基Transportmedium液体或半固体的培养基，用于保护和维持标本在转运期间（从标本采集后到实验室处理这段时间）的完整性。转运培养基一般不促进微生物增殖，但保证它们存活。对于苛养菌，可以采用分离培养用的培养基作为转运培养基（如羊血琼脂或巧克力琼脂等）。3.7一套血培养Asetofbloodculture从一个穿刺部位抽取血液，分别注入需氧和厌氧血培养瓶分别进行需氧和厌氧培养。4标本采集、转运及处理的总原则4.1标本采集手册实验室应制定所在机构的临床微生物学检验标本采集手册，该手册提供的信息包括（但不限于）下列内容：a)检验项目；b)检验方法；c)适应证；d)标本采集部位；e)标本类型；f)标本采集、转运所需要的装置/容器和转运培养基；g)标本采集方法；h)标本的体积或质量；i)转运时限、贮存条件；j)标本的标识方法；k)重复检验频率；l)生物安全防护信息；m)需要获得的临床资料。4.2检验的申请4.2.1样本采集依检验项目的申请，实验室应建立临床微生物学检验的申请程序。检验申请单提供的信息包括（但不限于）下列内容：WS/T640—20183a)患者姓名；b)患者性别；c)患者年龄或出生日期；d)患者唯一性标识，如病历号；e)就诊病区和病房；f)检验申请者姓名；g)检验申请者科室；h)标本类型；i)标本采集部位；j)检验项目；k)标本采集日期和时间；l)采集标本所用的特殊方法（适用时）；m)临床诊断和主要临床表现；n)特殊培养要求或可疑病原体（适用时）；o)患者是否应用抗微生物药物及具体种类；p)患者和检验申请者的联系电话(适用时)。4.2.2细菌学和真菌学检验项目的选择：a)无菌体液标本、组织标本、痰标本、支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolarlavagefluid，BALF）、尿液标本和脓液标本等宜同时选择标本直接涂片染色镜检和培养；b)怀疑隐球菌感染的脑脊液标本：宜同时选择墨汁染色、隐球菌荚膜多糖抗原检验和隐球菌培养；c)怀疑分枝杆菌感染的标本：宜同时选择抗酸染色、分枝杆菌培养和分枝杆菌核酸检验；d)怀疑厌氧菌感染的标本：宜同时选择革兰染色和厌氧培养，不能排除需氧菌时，宜同时做需氧培养；e)怀疑诺卡菌感染的标本：宜同时选择革兰染色、弱抗酸染色和培养；f)怀疑侵袭性真菌感染的标本：宜同时选择10%KOH压片、真菌培养和真菌抗原检验。另可进行乳酸酚棉兰染色或荧光染色等。4.2.3实验室发布的标本采集手册宜对特殊菌的培养要求给予明确说明，以保证医护人员对采集的标本进行明确标识，检验申请单中特殊培养要求包括（但不限于）下列内容：a)延长培养时间，例如：血液标本怀疑巴尔通体、布鲁菌、弗朗西斯菌等引起的感染，呼吸道标本怀疑诺卡菌引起的感染等；b)选择专用培养基。例如：血液中怀疑分枝杆菌感染宜选择专用的分枝杆菌培养瓶；c)特殊的气体和温度环境要求。例如：脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌等需要CO2环境，弯曲菌和幽门螺杆菌培养需要微需氧环境；怀疑二相真菌感染，宜同时选择25℃及37℃两个温度进行培养。d)特定感染宜进行厌氧培养。例如：肝脓肿等封闭脓肿、腹膜炎、腹腔感染和糖尿病足感染等。厌氧菌感染的特征性表现包括：①局部有气体产生为重要指征之一；②发生在黏膜附近的感染；③深部外伤，如枪伤、人或动物咬伤后的继发感染；④分泌物有恶臭或暗红血色或在紫外光下发出红色荧光，或脓汁中有硫磺颗粒等。4.3标本的选择4.3.1实验室标本采集手册应详细描述感染性疾病病原体检验的标本类型和临床适应证，病原体应包括（但不限于）病毒、细菌和真菌。WS/T640—201844.3.2选择标本类型须考虑感染症状、患者免疫状态、患者疾病严重程度及接受有创检查的风险、流行病学、可疑病原体的特性和播散能力和受累的器官及感染部位等多方面因素。4.3.3适于进行普通细菌、厌氧菌检验的标本类型见表1～表2。表1特定解剖部位中适合/不适合普通细菌培养的标本类型解剖部位适合普通细菌培养的标本不适合普通细菌培养的标本下呼吸道痰、BALF、保护性毛刷、气管内抽吸物唾液、口咽分泌物、鼻咽部窦内引流物泌尿道中段尿液、直接导尿液、耻骨上膀胱穿刺尿液、膀胱镜检或其它手术过程中采集的尿液、婴幼儿的尿袋尿液导尿管收集袋中的尿液、导尿管管尖浅表伤口脓抽吸物、真皮下的脓拭子表面拭子或被表面物污染的标本深部伤口脓液、坏死组织、或从深部取的组织被表面物污染的标本胃肠道新鲜粪便、内窥镜检时采集的排泄物、直肠拭子（特定情况下）静脉血抗微生物药物使用前从不同静脉穿刺点采集2～4套血标本凝固的血液溃疡或褥疮组织、抽吸物被表面物污染的标本表2适合或不适合厌氧菌培养的标本类型适合厌氧菌培养的标本不适合厌氧菌培养的标本抽取物（用注射器）、支气管镜保护性毛刷痰、BALF、气管内抽吸物、气管切口分泌物鼻窦（抽取）鼻咽拭子、鼻窦冲洗或拭子不能作为鼻窦炎的病原学诊断尿液（耻骨上穿刺膀胱尿液）尿液（排出或从导管导出）后穹窿穿刺液、输卵管液或组织（抽吸/活检标本）、胎盘组织（通过剖腹产手术）、宫内节育器（针对放线菌属）、前庭大腺分泌物会阴拭子、宫颈分泌物、恶露、阴道或外阴分泌物、前列腺液或精液、尿道分泌物培养艰难梭菌的粪便标本直肠拭子血液、骨髓、外科（术中抽取物或组织）眼部标本（泪道/结膜等结石、房水、前房液（穿刺）、玻璃体洗液（术中采集）4.4标本的采集时机、部位、方法4.4.1在抗微生物药物治疗之前或者在起始治疗后立即采集标本，治疗中为评估治疗效果或治疗后为评估结局可以进行相采样。4.4.2应当尽快在疾病初发时采集首份标本。4.4.3须避免感染部位周围以及感染部位附近皮肤或黏膜定植菌群的污染。4.4.4对于有多种细菌定植的部位，宜选择合适的方法检验特定的病原菌，并防止非致病定植菌群的污染。4.4.5检验呼吸道病毒宜采用植绒拭子采集鼻咽标本。4.4.6普通拭子标本不宜用于厌氧菌培养。4.4.7除了血液标本外，其他所有标本进行厌氧培养前均应进行革兰染色（粪便艰难梭菌培养除外）。4.4.8无菌体液（例如胸水、滑膜液、心包液和脑脊液）宜放入无菌管或含抗凝剂（注意某些抗凝剂对一些细菌有抑制作用，如果使用，则需告知临床其中的影响）的无菌管送检，也可注入一定量（最好10mL）的样品到血培养瓶中进行增菌培养；怀疑细菌或真菌感染时，除了血液标本之外，所有无菌体液标本均宜进行革兰染色镜检。WS/T640—201854.4.9外科手术标本，宜送液体或组织做涂片和培养，拭子标本仅用于特殊情况。4.4.10采集静脉血时，应首先采集血培养标本，再采集用于其他检验的标本。4.4.11血标本采集时机见WS/T503，痰标本采集时机见WS/T499，尿标本采集时机见WS/T348。4.4.12不宜送检或接收导尿管的管尖进行培养。4.4.13真菌培养宜采集深部标本或组织标本。4.4.14做病毒血清学检验时，宜根据不同病毒选择不同的采集时间和抗体类型；发病早期通常检验病毒特异的IgM抗体；而对恢复期患者，在疾病急性发作和发作后间隔2周～4周采集双份血清，检验IgG抗体。4.4.15特殊情况下（如怀疑厌氧菌感染时）可以考虑床旁采样。4.4.16标本采集须符合生物安全规定。4.5标本采集量4.5.1采集足够量的标本用于常规细菌学检验，至少送检0.5mL或者0.5g（除外特殊标本）。当送检标本体积不足时，与临床沟通，并根据医嘱选择优先检验项目。脑脊液标本通常2mL～5mL；胸水和腹水10mL；BALF10mL～20mL（≥5mL）；脓液2mL～5mL；羊水、胆汁、关节穿刺液、心包液、胸水、滑膜液大于1mL；腹透液50mL；眼前房液大于0.1mL，玻璃体洗液大于1mL。4.5.2采集足够量的标本用于病毒学检验，特别是液体标本（如脑脊液和血液），并严格遵照临床标准的流程操作。脑脊液标本通常2mL～5mL，血液3mL～5mL；4.5.3宜采集大体积量的标本用于常规真菌学检验。4.6标本标识标签宜由放入冰箱后仍能粘牢的材料制成。标签贴在容器上,而非容器盖上。标签上提供的信息至少包括（但不限于）下列内容：a)患者姓名、患者唯一性标识；b)标本采集日期和时