搜索
ICS13.100C52中华人民共和国国家职业卫生标准GBZ/T316.1—2018代替WS/T20—19962018-08-16发布2019-01-01实施血中铅的测定第1部分：石墨炉原子吸收光谱法Determinationofleadinblood—Part1:Graphitefurnaceatomicabsorptionspectrometrymethod中华人民共和国国家卫生健康委员会发布GBZ/T316.1—2018I前言根据《中华人民共和国职业病防治法》制定本标准。GBZ/T316—2018《血中铅的测定》分为3个部分：——第1部分：石墨炉原子吸收光谱法；——第2部分：电感耦合等离子体质谱法；——第3部分：原子荧光光谱法。本部分为GBZ/T316的第1部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分代替WS/T20—1996《血中铅的石墨炉原子吸收光谱测定法》。与WS/T20—1996相比，主要修改如下：——仪器操作条件修改为仪器操作参考条件；——对标准配制及样品处理方法进行了改进；——对仪器的背景校正系统进行了明确。本部分起草单位：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所。本标准主要起草人：潘亚娟、张敬、陶雪、闫慧芳。本标准所代替标准的历次版本发布情况：——WS/T20—1996。GBZ/T316.1—20181血中铅的测定第1部分：石墨炉原子吸收光谱测定法1范围GBZ/T316的本部分规定了测定血中铅的石墨炉原子吸收光谱测定法。本部分适用于职业接触人员血中铅的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GBZ/T295职业人群生物监测方法总则3酸脱蛋白-石墨炉原子吸收光谱法3.1原理血液样品（以下称血样）用硝酸溶液进行脱蛋白，在283.3nm波长下，用石墨炉原子吸收光谱法测定铅含量。3.2仪器3.2.1容量瓶，10mL。3.2.2具塞聚乙烯离心管，1.5mL。3.2.3旋涡混合器。3.2.4离心机，转速大于10000r/min。3.2.5微量移液器，量程分别为20µL~200µL、100µL~1000µL。3.2.6原子吸收光谱仪，具石墨炉、塞曼或氘灯背景校正装置和铅空心阴极灯。3.3试剂3.3.1去离子水。3.3.2硝酸：ρ20＝1.42g/mL，优级纯。3.3.3硝酸溶液：1%(体积分数)。3.3.4硝酸溶液：5%(体积分数)。3.3.5牛血：肝素抗凝，-20℃保存，用时放至室温摇匀。也可采用低本底人血、羊血等。本底铅含量应低于50µg/L。3.3.6标准溶液，采用铅单元素有证标准物质。3.4样品的采集、运输和保存依据GBZ/T295进行。采集后的样品和样品空白置于清洁容器中冷藏运输。GBZ/T316.1—20182样品在-20℃下可保存半年。3.5分析步骤3.5.1仪器操作参考条件干燥80℃~150℃55s灰化300℃~350℃20s原子化1600℃5s停气清除2400℃3s3.5.2血铅标准工作曲线系列的配制将铅单元素标准溶液用1%硝酸溶液稀释成50.0µg/mL铅标准应用液，再用1%硝酸溶液配成浓度为0µg/mL、1.25µg/mL、2.50µg/mL、5.00µg/mL、10.00µg/mL、12.50µg/mL铅标准溶液系列。另取6只10mL容量瓶，编号为1~6号。分别加入0.40mL浓度为0µg/mL~12.50µg/mL的铅标准溶液系列，再用牛血定容至刻度，即配制成浓度为0µg/L、50µg/L、100µg/L、200µg/L、400µg/L、500µg/L的血铅工作曲线标准溶液系列。配制方法见表1。表1血铅工作曲线标准系列配置容量瓶编号123456铅标准溶液系列/(µg/mL)01.252.505.0010.0012.50取铅标准溶液系列/mL0.400.400.400.400.400.40取牛血/mL9.609.609.609.609.609.60血中铅标准溶液系列/（µg/L）0501002004005003.5.3血铅标准工作曲线溶液系列、样品及样品空白的预处理方法3.5.3.1血铅标准工作曲线溶液系列预处理方法：分别取0.15mL血铅标准溶液工作曲线系列于具塞聚乙烯离心管内，各管加入0.60mL5％硝酸溶液，立即盖好盖子，强力振摇，然后在旋涡混合器上振摇5min，以10000r/min离心5min，上清液供测定。3.5.3.2样品预处理方法：将冷冻血样取出，恢复到实验室温度。充分振摇混匀，取出0.15mL，置于1.5mL具塞聚乙烯离心管内，其余处理步骤同上。3.5.3.3样品空白预处理方法：用采血针抽取2.0mL水置于采血管中，振荡，其余处理步骤同上。3.5.4血铅标准工作曲线溶液系列、样品及样品空白的测定3.5.4.1血铅标准工作曲线溶液系列的测定：参照仪器操作参考条件，将原子吸收光谱仪调整到最佳测定状态，取15μL上清液进样，测定各标准系列，每个浓度重复测定3次。2~6号的吸光度值减去1号的吸光度值后，对相应的铅浓度（µg/L）绘制工作曲线或计算回归方程。3.5.4.2样品及样品空白的测定：用测定标准系列的操作条件测定样品及样品空白溶液，空白测定结果应小于检出限。当检测结果大于检出限时，表明样品在采集、运输和存储过程中受到污染，批量样品应作废。测得的吸光度值由工作曲线或回归方程计算铅的浓度（µg/L）。3.6计算按式（1）计算血样中铅的浓度：GBZ/T316.1—20183C＝C0……………………………………………………………（1）式中：C——血中铅的浓度，单位为微克每升（µg/L）；C0——由工作曲线或回归方程得的血样中铅的浓度，单位为微克每升（µg/L）。3.7说明3.7.1本法的检出限为7µg/L，定量下限为20µg/L；测定范围为20µg/L~500µg/L。塞曼背景校正的原子吸收光谱仪相对标准偏差范围为1.6%~2.8%(n＝6)，氘灯背景校正的原子吸收光谱仪相对标准偏差范围为1.5%~5.3%(n＝6)。3.7.2本法的进样量应根据仪器具体情况确定，一般选择10µL～20µL。3.7.3本法中基体对测定有影响，样品应采用与工作曲线系列溶液相同的处理方法。若样品中铅浓度超过测定范围，可将血铅工作曲线范围提高至800µg/L或1000µg/L，标准系列及样品均采用10倍稀释方法处理后测定，即取血液0.1mL，加入5%硝酸溶液至1.0mL。3.7.4采血管不能使用EDTA抗凝管。3.7.5检测过程质量控制应按照GBZ/T295的要求进行。4曲拉通稀释-石墨炉原子吸收光谱法4.1原理血液样品（以下称血样）用曲拉通和硝酸混合溶液稀释后，在283.3nm波长下，用石墨炉原子吸收光谱法测定铅的浓度。4.2仪器4.2.1容量瓶：5mL。4.2.2具塞聚乙烯离心管：1.5mL。4.2.3微量移液器：量程分别为20µL~200µL、100µL~1000µL。4.2.4原子吸收光谱仪：具石墨炉、塞曼背景校正装置和铅空心阴极灯。4.3试剂4.3.1实验用水为去离子水。4.3.2硝酸：ρ20＝1.42g/mL,优级纯。4.3.3硝酸溶液：1%(体积分数)。4.3.4TritonX-100：分析纯。4.3.5TritonX-100溶液：1%(体积分数)。4.3.6稀释剂：将20mL硝酸溶液(1%)、10mLTritonX-100溶液(1%)与70mL水混合。4.3.7牛血：肝素抗凝，－20℃保存，用时放至室温摇匀。也可采用低本底人血、羊血等。本底铅含量应低于50µg/L。4.3.8标准溶液，采用铅单元素标准溶液。4.4样品的采集、运输和保存依据GBZ/T295进行。采集后的样品和样品空白置于清洁容器中冷藏运输。GBZ/T316.1—20184样品在-20℃下可保存半年。4.5分析步骤4.5.1仪器操作参考条件干燥80~150℃，10s灰化500~600℃，30s，保持10s原子化1800℃，5s，停气净化2400℃，3s4.5.2血铅标准工作曲线系列的配制将铅单元素标准溶液用1%硝酸溶液稀释成50.0µg/mL标准应用液，再用1%硝酸溶液配成浓度为0µg/mL、1.25µg/mL、2.50µg/mL、5.00µg/mL、10.00µg/mL、20.00µg/mL、25.00µg/mL标准溶液系列。再取7只5mL容量瓶，编号为1~7号。分别加入0.20mL浓度为0µg/mL~25.00µg/mL的铅标准溶液系列，再用牛血定容至刻度，即配制成浓度为0µg/L、50µg/L、100µg/L、200µg/L、400µg/L、800µg/L、1000µg/L的血铅标准工作曲线溶液系列。具体见表2。表2血铅标准工作曲线系列配制容量瓶编号1234567铅标准溶液系列/（µg/mL）01.252.505.0010.0020.0025.00取铅标准溶液系列/mL0.200.200.200.200.200.200.20取牛血/mL4.804.804.804.804.804.804.80血铅标准溶液系列/（µg/L）05010020040080010004.5.3血铅标准工作曲线溶液系列、样品及样品空白的处理4.5.3.1血铅标准工作曲线溶液系列的处理：血铅标准工作曲线系列分别取出0.10mL于具塞聚乙烯离心管内，各加入0.90mL稀释剂，充分振摇混匀。4.5.3.2样品的处理：将冷冻血样取出，恢复到实验室温度。充分振摇混匀，取出0.10mL，置于1.5mL具塞聚乙烯离心管内，加入0.90mL稀释剂，充分振摇混匀。4.5.3.3样品空白处理：用采血针抽取2.0mL水置于采血管中，其余处理步骤同上。4.5.4血铅标准工作曲线溶液系列、样品及样品空白的测定4.5.4.1血铅标准工作曲线溶液系列的测定：参照仪器操作参考条件，将原子吸收光谱仪调整到最佳测定状态，取15μL上清液进样，测定各标准系列，每个浓度重复测定3次。2～7号的吸光度值减去1号的吸光度值后，对相应的铅浓度（µg/L）绘制工作曲线或计算回归方程。4.5.4.2样品及样品空白的测定：用测定标准系列的操作条件测定样品及空白样品溶液，空白测定结果应小于检出限。当检测结果大于检出限时，表明样品在采集、运输和存储过程中受到污染，批量样品应作废。4.6计算按式（2）计算血样中铅的浓度：GBZ/T316.1—20185C＝C0……………………………………………………………（2）式中：C——血中铅的浓度，单位为微克每升（µg/L）；C0——由标准曲线或回归方程得血样的铅浓度，单位为微克每升（µg/L）。4.7说明4.7.1氘灯背景校正的原子吸收光谱仪不宜用于本法进行血铅测定。4.7.2本方法的检出限为7µg/L，定量下限为20µg/L；测定范围为20µg/L~1000µg/L。相对标准偏差范围为1.8%~5.1％(n＝6)；血样加标回收率范围为99.9％~108.9％(加标浓度为100µg/L~800µg/L)。4.7.3本法中基质对测定有影响，样品与工作曲线系列应采用相同方法进行处理。4.7.4本法的进样量应根据仪器具体情况确定，一般选择10µL~20µL。4.7.5采血管不能使用EDTA抗凝管。4.7.6检测过程质量控制应按照GBZ/T295的要求进行。_________________________________