一氧化氮合酶染色液

一氧化氮合酶染色液简介：细胞中的左旋精氨酸和氧在一氧化氮合酶(Nitxicoxidesynthase，NOS)的作用下生成一氧化氮和瓜氨酸。还原型辅酶Ⅱ(NADPH)是一氧化氮合酶的辅酶，可将底物脱氢，然后将氢传递给硝基四氮唑蓝(NBT)，NBT会被还原成蓝黑色沉淀，该沉淀部位即为NADPH所在部位即NOS部位。Leagene一氧化氮合酶染色液由磷酸盐缓冲、漂洗、孵育、复染等步骤，可用于组织冰冻切片染色，尤其适用于脑组织冰冻切片染色，亦可用于细胞爬片、细胞涂片染色。该染色液仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。组成：自备材料：1、30%蔗糖2、4%多聚甲醛3、湿盒、恒温箱、显微镜操作步骤(仅供参考)：(一)、脑组织冰冻切片：1、动物常规灌注固定，取取脑组织，浸入蔗糖溶液，行冰冻切片厚度。2、入TissuePBbuffer漂洗，重复1次。3、用蒸馏水稀释Washbuffer(6×)，切片入1×Washbuffer，室温孵育。4、入NOS孵育液，并放入湿盒中，避光孵育。5、用蒸馏水稀释Washbuffer(6×)，切片入3×Washbuffer，4℃孵育过夜。6、入TissuePBbuffer，漂洗，重复1次。7、裱片、晾干。编号名称DE00885×20mlDE00885×50mlStorage试剂(A):TissuePBbuffer100ml250mlRT试剂(B):CellPBbuffer50ml125mlRT试剂(C):Washbuffer(6×)20ml50mlRT试剂(D):NOS孵育液20ml50ml-20℃避光使用说明书1份8、可选步骤：入中性红染色液复染。9、常规脱水、透明、封片、镜检。(二)、细胞爬片：1、细胞爬片或甩片用CellPBbuffer漂洗，重复。2、多聚甲醛室温固定。3、入CellPBbuffer漂洗，重复。4、按上述脑组织冰冻切片步骤操作。5、入CellPBbuffer漂洗，重复。6、可选步骤：入中性红染色液复染。7、封片、镜检。染色结果：注意事项：1、应选择恰当的固定液、固定方法、固定时间，否则会影响酶的活性。2、中性红复染可以更好的显示细胞轮廓，有助于进一步计数阳性细胞率。3、组织切片染色时，可见NOS神经元，类似于Golgi银染，胞体、神经纤维、纤维末梢均可着色。4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期：6个月有效。相关：NOS部位蓝黑色背景红色(中性红)或淡蓝色编号名称DC0032Masson三色染色液DF0135多聚甲醛溶液(4%PFA)DG0005糖原PAS染色液PE0018SDS-PAGE凝胶配制试剂盒PE0103Acr-Bis(30%,29:1)PW0082丽春红S染色液(1×PonceauS)TC0713葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)