Hoechst33258染色液(50×)

Hoechst33258染色液(50×)简介：Hoechst33258也称bisBenzimideH33258或HOE33258，分子式为C25H24N6O·3HCl，分子量为533.88，CASNumber23491-45-4。Hoechst33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低，常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst33258也用于普通的细胞核染色、DNA染色。Hoechst33258的最大激发波长为，最大发射波长为，Hoechst33258和双链DNA结合后，最大激发波长为，最大发射波长为。LeageneHoechst33258染色液(50×)可用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。组成：自备材料：1、荧光显微镜2、蒸馏水3、微量移液器4、PBS或生理盐水操作步骤(仅供参考)：(一)固定的组织细胞染色1、配制Hoechst33258染色工作液：Hoechst33258浓缩液(50×)：HoechstBuffer按一定的比例混合，即为Hoechst33258染色工作液。2、对于细胞或组织样品，固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33258染色，如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst33258染色。对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst33258染色工作液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3倍体积以上的Hoechst33258染色工作液，充分混匀。3、室温放置。编号名称DA0009Storage试剂(A):Hoechst33258浓缩液(50×)1ml-20℃避光试剂(B):HoechstBuffer50ml4℃使用说明书1份4、轻轻吸除Hoechst33258染色工作液。5、用无菌的PBS或生理盐水清洗。6直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。(二)活细胞染色1、配制Hoechst33258染色工作液：Hoechst33258浓缩液(50×)：HoechstBuffer按一定的比例混合，即为Hoechst33258染色工作液。2、取96、24、6孔板培养细胞至合适状态，按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例，加入适当的Hoechst33258染色工作液，染液必须充分覆盖细胞。3、在适宜于细胞培养的条件下培养。4、轻轻吸除Hoechst33258染色工作液。5、用无菌的PBS或生理盐水清洗。6、进行荧光检测。注意事项：1、Hoechst33258染色液的浓度可根据具体实验自行调节，如40倍稀释。2、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。4、避免反复冻融，否则容易失效。5、Hoechst33258对人体有一定刺激性，请注意适当防护。6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期：12个月有效。相关：编号名称CC0007磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)DA0020Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒DA0023碘化丙啶PI染色液(50ug/ml,含RNase)DA0065台盼蓝染色液(0.4%)DG0005糖原PAS染色液PE0018SDS-PAGE凝胶配制试剂盒TC0713葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)