Heidenhain铁苏木素染色液

北京吉美生物技术有限公司Heidenhain铁苏木素染色液产品简介：苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色，是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。Heidenhain铁苏木素染色液以硫酸铁铵作为氧化剂和分化剂，根据不同的分化程度可显示不同的结构。染色后所有成分均为黑色或深灰黑色，不同组织结构的苏木素着色可被Heidenhain分化液以不同的速度进行褪去，黑色褪去顺序依次为：线粒体、横纹肌、核染色质。染色原理1、细胞核染色的原理：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。2、细胞浆染色的原理：伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点（4.7~5.0）以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。3、分化作用：染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木素的醌型结构，使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后，必须用1%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去，再进行伊红染色，才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。4、返蓝作用：分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来不浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。产品组成：编号名称JD32213×100mlstorage试剂（A）：HeidenhainDifferentiation2×100mlRT避光试剂（B）：Heidenhain铁苏木素染色液100mlRT避光使用说明书1份操作步骤（仅供参考）1、切片脱蜡至水①二甲苯作用2次，每次5~10min。②（可选）无水乙醇作用2次，每次3~5min。③95%的乙醇3~5min。④90%的乙醇3~5min。⑤80%的乙醇3~5min。⑥自来水或蒸馏水冲洗1~3min。2、染色①HeidenhainDifferentiation媒染1h（见注意事项1）。②蒸馏水冲洗5~10s（见注意事项1）。③Heidenhain铁苏木素染色液染色1h。④自来水冲洗20~30s。⑤HeidenhainDifferentiation分化或用蒸馏水1：1稀释HeidenhainDifferentiation分化，并与自来水冲洗交替进行，显微镜下观察分化程度。（见注意事项2）⑥自来水冲洗10min。3、脱水、透明、封固①80%乙醇10~20s。②90%乙醇10~20s。③95%乙醇作用2次，每次1~2min。④无水乙醇作用2次，每次2~3min。⑤二甲苯透明3次，每次2~3min。⑥中性树脂封片。染色结果：线粒体、横纹肌、髓磷脂、染色质等呈灰黑色。注意事项：1、切片脱蜡应尽量干净。2、系列乙醇应经常更换新液。3、冷冻切片染色时间尽量要短。4、蓝化液常使用0.2~1%氨水或Scott促蓝液或0.1~1%碳酸埋溶液。5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期：24个月有效。相关产品：产品编号产品名称JC2007磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)JC2145ACK红细胞裂解液(ACKLysisBuffer)JD3016Masson三色染色液JD3134多聚甲醛溶液(4%PFA)JD3207苏木素伊红(HE)染色液JN5147Trizol(总RNA提取试剂)JP7169丽春红S染色液(1×PonceauS)JT9111葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)