IEF考马斯亮蓝染色试剂盒

IEF考马斯亮蓝染色试剂盒简介：考马斯亮蓝染色液(CommassieBlueStainingSolution)是以考马斯亮蓝R250为染料可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳胶的常规染色或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。等点聚焦染色后考马斯亮蓝染色又称IEF考马斯亮蓝染色，一般与三氯乙酸溶液及脱色液联合使用。本染色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。组成：自备材料：1、20%三氯乙酸水溶液2、水平或侧摆摇床3、蒸馏水4、20%甘油水溶液操作步骤(仅供参考)：1、临用前，取适量的考马斯亮蓝染色液和硫酸铜溶液，按99:1的比例混合，即为IEF考马斯亮蓝染色液，即配即用。2、等点聚焦电泳结束后，取凝胶放入5-10倍体积的20%三氯乙酸水溶液，置于水平或侧摆摇床上缓慢摇动。3、倾去20%三氯乙酸水溶液，加入10倍体积的IEF脱色液，置于水平或侧摆摇床上缓慢摇动。4、倾去IEF脱色液，加入新鲜配制的IEF考马斯亮蓝染色液，置于水平或侧摆摇床上缓慢摇动以上(胶厚度小于等于1mm)或1h以上(胶厚度大于1mm)。5、倾去染色液，用蒸馏水冲洗。编号名称PT0042600mlStorage试剂(A):考马斯亮蓝染色液100mlRT试剂(B):硫酸铜溶液1mlRT临用前，按试剂(A):(B)=99:1的比例混合，即为IEF考马斯亮蓝染色液。试剂(C):IEF脱色液500mlRT使用说明书1份6、加入适量常规脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶；Leagene推荐常规脱色液的配方是：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸馏水。7、置于水平或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色4～24h，期间更换脱色液2～4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期，通常蛋白条带在脱色后即可出现。8、完成脱色后把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶注意事项：1、染色时如果把凝胶和染色液一起放置在微波炉中适当加热，可以大大加快染色速度。但加热时宜尽量避免沸腾，以免出现因暴沸而导致的凝胶碎裂。2、脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色；脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期：12个月有效。相关：编号名称CS0001ACK红细胞裂解液(ACKLysisBuffer)DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液PW0053Western抗体洗脱液(碱性)TC0699植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)