第八章对氨基苯甲酸酯和-酰苯胺类局麻药物分析

Pharmaceuticalanalysis第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的分析主讲：张婷婷教学要求掌握:对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的结构和性质；主要对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的鉴别、检查和含量测定的原理和特点熟悉：主要对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物杂质的结构、危害、检查方法与含量限度了解：影响对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物稳定性的主要因素，体内样品与临床监测2Pharmaceuticalanalysis芳香胺类：Pharmaceuticalanalysis3例：苯佐卡因，盐酸普鲁卡因例：肾上腺素，盐酸麻黄碱例：对乙酰氨基酚，盐酸布比卡因第七版教材改为“酰苯胺类”第一节结构和性质Pharmaceuticalanalysis4一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构和典型药物1、基本结构具有对氨基苯甲酸酯的母体多数此类药物结构中芳伯氨基未被取代（R1=H）而在芳环对位有取代结构通式为：Pharmaceuticalanalysis5OOR2R1HN一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构和典型药物2、典型药物Pharmaceuticalanalysis6COOC2H5H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2][H2NHCl苯佐卡因COOCH2CH2N(C2H5)2H2NHCl盐酸普鲁卡因COOCH2CH2N(CH3)2CH3(CH2)3NHHCl盐酸丁卡因COOCH2CH2N(C2H5)2ClH2NHCl盐酸氯普鲁卡因对伯氨基苯甲酸酯一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构和典型药物抗心律失常药盐酸普鲁卡因胺化学结构与盐酸普鲁卡因仅存在羧酸酯与酰胺的差异，化学性质与本类药物很相似，故也在此一并列入讨论。Pharmaceuticalanalysis7CONHCH2CH2N(C2H5)2H2NHClCOOCH2CH2N(C2H5)2ClH2NHCl盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因二、酰苯胺类药物基本结构与典型药物1、基本结构•结构共性是具有芳酰氨基•结构通式为：Pharmaceuticalanalysis8R3R4R1HNR2O二、酰苯胺类药物基本结构与典型药物2、典型药物Pharmaceuticalanalysis9CH3CH3HNCH2N(C2H5)2OHClH2O盐酸利多卡因CH3CH3HNOHClNC4H9盐酸布比卡因CH3CH3HNOHClNC3H7盐酸罗哌卡因三、主要理化性质1、芳伯胺基特性Pharmaceuticalanalysis10•具有芳伯氨基(除盐酸丁卡因外)，故显重氮化-偶合反应•与芳醛缩合成Schiff碱反应；•易氧化变色对氨基苯甲酸酯类•具有芳酰氨基，在酸性溶液中也可水解为芳伯氨基化合物，而显芳伯氨基特性反应。酰苯胺类COOCH2CH2N(CH3)2CH3(CH2)3NHHCl三、主要理化性质2、水解特性•对氨基苯甲酸酯类酯键水解•影响药物水解反应的快慢因素：光、热或碱性条件•水解反应举例：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸（杂质）盐酸氯普鲁卡因4-氨基-2-氯苯甲酸（杂质）盐酸利多卡因2,6二甲基苯胺（杂质）盐酸丁卡因对丁氨基苯甲酸Pharmaceuticalanalysis11三、主要理化性质3、弱碱性脂烃胺侧链为叔胺氮原子(除苯佐卡因外)，具有一定碱性，可以成盐。能与生物碱沉淀剂发生沉淀反应只能在非水溶剂体系中滴定Pharmaceuticalanalysis12COOCH2CH2N(C2H5)2H2NHCl盐酸普鲁卡因CH3CH3HNCH2N(C2H5)2OHClH2O盐酸利多卡因三、主要理化性质4、与重金属离子反应特性因酰苯胺类药物分子结构中酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于氯仿等有机溶剂而呈色。Pharmaceuticalanalysis13三、主要理化性质5、吸收光谱特性因该类药物分子结构中均含有苯环及相应的取代基与脂烃胺侧链，具有特征的紫外吸收光谱与红外光谱行为。Pharmaceuticalanalysis14三、主要理化性质6、其他特性其游离碱多为碱性油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂其盐酸盐均系白色结晶性粉末，具有一定的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂Pharmaceuticalanalysis15第二节鉴别试验Pharmaceuticalanalysis16一、重氮化-偶合反应芳香第一胺类鉴别反应反应原理：分子结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物均可发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性β-萘酚偶合生成有色的偶氮染料。Pharmaceuticalanalysis17HClNaNO2重氮盐OH--萘酚橙黄~猩红色Ar-NH2一、重氮化-偶合反应直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺、对氨基水杨酸钠等。间接反应：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯。盐酸丁卡因分子结构中不具有芳伯氨基，无此反应但其分子结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成N-亚硝基化合物的乳白色沉淀，可与具有芳伯氨基的同类药物区别。Pharmaceuticalanalysis18COOCH2CH2N(CH3)2CH3(CH2)3NHHNO2+COOCH2CH2N(CH3)2NH2O+O=NC4H9一、重氮化-偶合反应例：苯佐卡因和盐酸普鲁卡因的鉴别反应取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。Pharmaceuticalanalysis19NH2COOCH2CH2N(C2H5)2Ar-NH2NaNO2+HClAr-N2+Cl-OHOH-OHAr-N=N普鲁卡因苯佐卡因COOC2H5H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2][H2NHCl二、与金属离子反应1、盐酸利多卡因的鉴别方法反应原理：(1)分子结构中具有芳香胺和脂肪胺的盐酸利多卡因在碳酸钠试液中与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物，该有色物质溶入氯仿显黄色。注：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁卡因等，在同样条件下不发生此反应。Pharmaceuticalanalysis20CH3CH3HNCH2N(C2H5)2OH3CH3CN(C2H5)2NCH2OCH3CH3NCH2N(C2H5)2OCu2++2Cu2H++二、与金属离子反应1、盐酸利多卡因的鉴别方法(2)盐酸利多卡因在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。注：盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸汞试液煮沸显黄色；对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色，可与之区别Pharmaceuticalanalysis21CH3CH3HNCH2N(C2H5)2OH3CH3CN(C2H5)2NCH2OCH3CH3NCH2N(C2H5)2OCoCl2+2Co2HCl+二、与金属离子反应2、盐酸普鲁卡因胺的鉴别方法反应原理：芳酰胺结构可被浓过氧化氢氧化成羟肟酸，再与三氯化铁作用生成配位化合物羟肟酸铁。Pharmaceuticalanalysis22CONHCH2CH2N(C2H5)2+H2O2CONCH2CH2N(C2H5)2+H2OH2NH2NOH3H2NCONCH2CH2N(C2H5)23Fe+3HClCONCH2CH2N(C2H5)2+FeCl3H2NOHO羟肟酸羟肟酸铁盐酸普鲁卡因胺三、水解产物反应反应原理：对氨基苯甲酸酯类药物分子中有些具有酯键结构在碱性条件下可水解，利用其水解产物的特性或与某些试剂的反应可进行鉴别。例如：盐酸普鲁卡因的鉴别苯佐卡因的鉴别Pharmaceuticalanalysis23三、水解产物反应1、盐酸普鲁卡因的鉴别Pharmaceuticalanalysis24H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2HClNaOHH2NCOOCH2CH2N(C2H5)2NaOHH2NCOONa+HOCH2CH2N(C2H5)2H2NCOONaHClH2NCOOHHClH2NCOOHHCl普鲁卡因普鲁卡因加热至油状物消失二乙氨基乙醇对氨基苯甲酸钠使红色的石蕊试纸变蓝白色沉淀加热后变成油状物三、水解产物反应2、苯佐卡因的鉴别取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮沸，即有乙醇生成，加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。Pharmaceuticalanalysis25I2+4H2O+5HCOONa+NaI+5CHI3NaOH+6C2H5OHC2H5OH+NaOH+COOC2H5H2NCOONaH2N碘仿4、制备衍生物测定熔点制备衍生物测熔点是国内外药典常用的鉴别方法之一。盐酸丁卡因的鉴别：取本品0.1g，加5%的醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml,即析出的白色晶体；滤过，结晶水用水洗涤，在80℃干燥后，熔点约为131℃.Pharmaceuticalanalysis26COOCH2CH2N(C2H5)2.HClNHC4H9COOCH2CH2N(C2H5)2HSCN.NH4SCNNHC4H9熔点为131℃白色晶体5、紫外特征吸收光谱法1、紫外吸收光谱例：在λmax处测定供试液的吸光度。例如：盐酸布比卡因在0.01mol/L%盐酸中于λmax=263nm和λmax=271nm测定最大吸收，其吸光度分别为0.53～0.58与0.43～0.48。2、红外吸收光谱盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因胺Pharmaceuticalanalysis27鉴别反应小结Pharmaceuticalanalysis28药物名称苯佐卡因盐酸普鲁卡因盐酸丁卡因盐酸普鲁卡因盐酸利多卡因盐酸布比卡因鉴别•水解•IR•芳伯胺基•水解•IR•芳伯胺基•衍生物熔点131℃•三氯化铁•IR•硫酸铜显色•IR•UV•IR习题：最佳选择题：1、下列药物中，能在碳酸钠试液中与硫酸铜反应生成蓝紫色配合物的是（）A.对乙酰氨基酚B.盐酸普鲁卡因C.盐酸丁卡因D.盐酸利多卡因Pharmaceuticalanalysis29D习题：最佳选择题：2、ChP直接用芳香第一胺反应鉴别的是（）A.盐酸丁卡因B.盐酸普鲁卡因C.盐酸去氧肾上腺素D.盐酸利多卡因Pharmaceuticalanalysis30B第三节特殊杂质及其检查法Pharmaceuticalanalysis31一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查【杂质来源】水解产生对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇【检查方法】HPLC杂质对照品法固定相：十八烷基硅烷键合硅胶流动相：0.1%庚烷磺酸钠的0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至3.0)-甲醇(68∶32)检测波长：279nmPharmaceuticalanalysis32-CO2H2NCOOH[O]OOH2N结果导致注射液变黄、疗效下降、毒性增加二、其他药物中的杂质检查盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物4-氨基-2-氯苯甲酸的检查•检查方法：LC/MS盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他杂质的检查•检查方法：HPLC杂质对照品法盐酸罗哌卡因的光学纯度检查（S型有效，R型有毒）•检查方法：毛细管电泳方法Pharmaceuticalanalysis33习题：配伍选择题：A.对氨基苯甲酸B.酮体C.4-氨基-2-氯-苯甲酸D.2,6-二甲基苯胺E.间氨基酚1.盐酸氯普鲁卡因注射液2.盐酸利多卡因注射液3.盐酸普鲁卡因注射液Pharmaceuticalanalysis34CDA第四节含量测定Pharmaceuticalanalysis35药物含量测定亚硝酸钠滴定法---芳伯胺基非水溶液滴定法---盐酸布比卡因紫外分光光度法---盐酸丁卡因高效液相色谱法---盐酸利多卡因对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物Pharmaceuticalanalysis36一、亚硝酸钠滴定法【适用范围】具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物。Ch.P2010中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。【基本原理】芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的药物在酸性溶液中与亚