GBZ∕T 318.2-2018 血中三甲基氯化锡的测定 第2部分气相色谱-质谱法

ICS13.100C52中华人民共和国国家职业卫生标准GBZ/T318.2—2018血中三甲基氯化锡的测定第2部分：气相色谱-质谱法Determinationoftrimethyltinchloride(TMT)inblood—Part2:Gaschromatographic–massmethod2018-08-16发布2019-01-01实施中华人民共和国国家卫生健康委员会发布GBZ/T318.2—2018I前言根据《中华人民共和国职业病防治法》制定本标准。GBZ/T318《血中三甲基氯化锡的测定》分为两个部分：——第1部分：气相色谱法；——第2部分：气相色谱-质谱法。本部分为GBZ/T318的第2部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准起草单位：广东省职业病防治院、深圳市职业病防治院、深圳市罗湖区疾病预防控制中心、深圳市龙岗区疾病预防控制中心。本标准主要起草人：吴邦华、戎伟丰、易娟、赖少阳、刘丽、何嘉恒、吴川、蔡金敏、谢玉璇、刘奋、何俊涛、赖璟琦、张英、蔡志斌、刘渠、张文、林怡然、贠建培、张英。GBZ/T318.2—20181血中三甲基氯化锡的测定第2部分：气相色谱-质谱法1范围GBZ/T318的本部分规定了测定血中三甲基氯化锡气相色谱-质谱法。本标准适用于职业接触人员血中三甲基氯化锡的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GBZ/T295职业卫生生物监测方法总则3原理血中三甲基氯化锡用四乙基硼酸钠衍生成为三甲基乙基锡，经正己烷萃取，气相色谱-质谱检测，以保留时间和特征离子的丰度比值进行定性，用特征离子165m/z的离子丰度值（峰面积）定量。4仪器4.1肝素钠抗凝采血管，5mL。4.2离心机，0r/min～3000r/min。4.3微量注射器，1μL、10μL、50μL、100μL。4.4具塞玻璃管：15mL，配有聚四氟乙烯密封盖。4.5旋涡振荡器。4.6气相色谱-质谱仪。仪器操作参考条件：a)色谱条件：——色谱柱：60m×0.32mm×1.0μm二苯基-95%二甲基硅氧烷共聚物（HP-5MS）；——柱温：初温50℃，以20℃/min升到200℃，保持1.0min；——汽化室温度：250℃；——柱流量：2.0mL/min；——分流比：5:1。b)质谱条件：——离子源：电子轰击离子源（EI）；——离子化能量：70eV；——离子源温度：230℃；GBZ/T318.2—20182——接口温度：260℃；——扫描模式：选择离子扫描模式，选择165m/z为定量离子，151m/z、165m/z、179m/z和194m/z为鉴定离子；——溶剂延迟时间：4.0min。5试剂5.1实验用水为去离子水。5.2三甲基氯化锡，优级纯（＞99.8%）。5.3四乙基硼酸钠，优级纯。5.4四氢呋喃，分析纯。5.5乙酸钠，分析纯。5.6冰醋酸，分析纯。5.7正己烷，色谱纯。5.8乙腈，色谱纯。5.9衍生剂：称取0.1g四乙基硼酸钠，加入10mL四氢呋喃溶解，配成1％四乙基硼酸钠-四氢呋喃溶液，该溶液置于4℃冰箱中避光保存，可稳定1个月。5.10缓冲液（pH4.0±0.2）：在120mL水中加入0.6g乙酸钠，再加1.4mL的冰醋酸。5.11标准溶液：于10mL容量瓶中，加入少量水，准确称量后，加入一定量的三甲基氯化锡，再准确称量，加水至刻度；由2次称量之差计算此溶液的浓度，为标准贮备液（浓度约为5mg/mL），此液在4℃冰箱内可储存6个月。临用前，用水稀释成50.0µg/mL三甲基氯化锡标准溶液。或购买经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液物质。6样品采集、运输和保存用肝素钠抗凝采血管采集接触三甲基氯化锡工人的血样5mL，于室温或冷藏运输，尽快置于4℃冰箱中存放，样品可保存15d。7分析步骤7.1样品处理：将血样从冰箱中取出，放置恢复到室温后，充分摇匀。准确吸取1.0mL血样于15mL具塞玻璃管中，加入2.0mL缓冲液，摇匀后加入7.0mL乙腈，密封后振荡1min以充分沉淀蛋白，再以3000r/min离心1min，将上层清液全部转移至另一15mL具塞玻璃管中，加入少量乙腈洗涤沉淀，合并洗涤液于15mL具塞玻璃管中，加入0.2mL衍生剂，混合后，准确加入1.0mL正己烷，密封后振荡5min，静置或离心分层后取上层有机相1.0µL分析。若样品中三甲基氯化锡浓度超过测定范围，可用正己烷稀释后测定，计算时乘以稀释倍数。7.2试剂空白处理：用1.0mL水代替血样，按样品同样处理，做试剂空白。GBZ/T318.2—201837.3标准系列溶液的配制与测定：在15mL具塞玻璃管中加入1.0mL水，再加入标准溶液，配制成含量为0.0g～2.5g的三甲基氯化锡标准系列溶液，每个标准系列溶液中再加入2.0mL缓冲液，摇匀后加入7.0mL乙腈和0.2mL衍生剂，混合后准确加入1.0mL正己烷，密封后振荡5min，静置或离心分层后取上层有机相1.0µL分析。参照仪器操作条件，将气相色谱-质谱仪调节至最佳测定状态，分别进样1.0µL的正己烷萃取液，测定各标准系列溶液。以测得的165m/z特征离子的离子丰度值（峰面积）对相应的三甲基氯化锡含量(g)绘制标准曲线或计算回归方程。7.4样品测定：用测定标准系列溶液的操作条件测定样品和试剂空白的165m/z的离子丰度值（峰面积），由标准曲线或回归方程得三甲基氯化锡的含量(g)。8计算按式（1）计算血中三甲基氯化锡的浓度：DVmC1000…………………………………………………(1)式中：C——血中三甲基氯化锡的浓度，单位为微克每升（g/L）；m——血中三甲基氯化锡的含量（减去试剂空白），单位为微克（g）；V——取血样的体积，单位为毫升（mL）；D——血中三甲基氯化锡的回收率，%。9说明9.1本法的检出限为0.003g，定量下限为0.015g，最低检出浓度为3.0g/L(以取血样1.0mL计)，最低定量浓度为15.0g/L(以取血样1.0mL计)。测定范围为0.003µg～2.500µg，相对标准偏差为1.1%～4.9%。9.2本法平均回收率为76.6%。9.3本法可采用性能类似的其他毛细管色谱柱。9.4血中与三甲基氯化锡共存的二甲基二氯化锡、甲基三氯化锡对测定不干扰。9.5血样的采集没有时间限制，由于三甲基氯化锡主要分布在红细胞中，因此不能采用血浆进行检测，应采用全血样品检测。9.6检测的质量保证遵守GBZ/T295。9.7色谱图、质谱图见图1～图3。GBZ/T318.2—20184注：1——三甲基乙基锡（4.98min）；2——二甲基二乙基锡（5.98min）；3——三乙基甲基锡（6.98min）。图1三甲基氯化锡衍生物、二甲基二氯化锡衍生物和甲基三氯化锡衍生物的分离图图2三甲基氯化锡的质谱图图3三甲基氯化锡衍生物三甲基乙基锡的质谱图_________________________________123