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质参考件PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建中华人民共和国国家标准备案号：XXXX-XXXX陨悦杂65.100G食品安全国家标准鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱联用法20180621发布原原20181221原原实施Nationalfoodsafetystandard要Determinationoffipronilandmetabolitesresiduesineggs要Liqiudchromatography-tandemmassspectrometrymethod23200.115—2018GB发布国家市场监督管理总局中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会PDF文件使用pdfFactoryPro试用版本创建—2018暋暋暋食品安全国家标准鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留量的测定液相色谱质谱联用法1暋范围本标准规定了鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留量的液相色谱质谱联用测定方法。本标准适用于鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留量的测定。2暋规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB2763暋食品安全国家标准暋食品中农药最大残留限量GB/T6682暋分析实验室用水规格和试验方法3暋原理试样用乙腈提取,提取液经分散固相萃取净化,液相色谱质谱联用仪检测,外标法定量。4暋试剂和材料除非另有说明,在分析中仅使用分析纯的试剂,水为GB/T6682规定的一级水。4灡1暋试剂4灡1灡1暋乙腈(CH3CN,CAS号:75058):色谱纯。4灡1灡2暋甲酸(HCOOH,CAS号:64186):色谱纯。4灡1灡3暋甲醇(CH3OH,CAS号:67561):色谱纯。4灡1灡4暋乙酸铵(CH3COONH4,CAS号:631618):色谱纯。4灡1灡5暋无水硫酸镁(MgSO4,CAS号:7487889)。4灡1灡6暋氯化钠(NaCl,CAS号:7647145)。4灡1灡7暋无水硫酸钠(Na2SO4,CAS号:7757826)。4灡2暋溶液配制4灡2灡1暋甲酸溶液(0灡1%):取1mL甲酸用水稀释至1000mL,摇匀。4灡2灡2暋乙酸铵甲酸溶液(5mmol/L):称取0灡3854g乙酸铵,用0灡1%甲酸溶液溶解并稀释至1000mL,摇匀。4灡3暋标准品氟虫腈及其代谢物标准品,参见附录A,纯度曒95%。4灡4暋标准溶液配制4灡4灡1暋标准储备溶液(100mg/L):分别准确称取氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈砜和氟虫腈亚砜(4灡3)各10mg(精确至0灡1mg),用乙腈溶解并稀释至100mL,摇匀,制成质量浓度为100mg/L标准储备溶液,避光-18曟保存,有效期1年。1GB23200灡115—20184灡4灡2暋混合标准中间溶液(1mg/L):分别准确吸取氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈砜和氟虫腈亚砜标准储备溶液(4灡4灡1)各1mL,用乙腈稀释至100mL,摇匀,制成1mg/L的混合标准中间溶液,避光0曟~4曟保存,有效期1个月。4灡5暋材料4灡5灡1暋乙二胺N丙基硅烷化硅胶(PSA):40毺m~60毺m。4灡5灡2暋十八烷基硅烷键合硅胶(C18):40毺m~60毺m。4灡5灡3暋微孔滤膜(有机相):0灡22毺m。5暋仪器5灡1暋液相色谱三重四极杆质谱联用仪:配备ESI源。5灡2暋分析天平:感量0灡1mg和0灡01g。5灡3暋离心机:转速不低于5000r/min。5灡4暋涡旋振荡器。5灡5暋振荡器。5灡6暋组织匀浆机。6暋试样制备6灡1暋试样制备取16枚新鲜鸡蛋(约1kg),洗净去壳后用组织匀浆机充分搅拌均匀,放入聚乙烯瓶中。6灡2暋试样储存将试样按照测试和备用分别存放,于-20曟~-16曟条件下保存。7暋分析步骤7灡1暋提取准确称取5g试样(精确至0灡01g)置于50mL离心管中,加入20mL乙腈,涡旋混匀1min,振荡提取5min,加入2g氯化钠和6g无水硫酸钠,涡旋1min,以5000r/min离心5min,上清液待净化。7灡2暋净化准确吸取1mL上清液于2mL聚丙烯离心管中,加入50mgPSA粉末、50mgC18粉末和150mg无水硫酸镁,涡旋混合30s,以5000r/min离心5min,上清液过0灡22毺m滤膜,用于测定。7灡3暋仪器参考条件7灡3灡1暋液相色谱参考条件a)暋色谱柱:C18(2灡1mm暳100mm,2灡7毺m),或性能相当者;b)暋柱温:35曟;c)暋流动相:乙酸铵甲酸溶液(A相),甲醇(B相);d)暋流速:0灡4mL/min;e)暋进样量:2毺L;f)暋流动相及梯度洗脱条件见表1。表1暋流动相及梯度洗脱条件(VA+VB)时间min流动相VA流动相VB040602GB23200灡115—2018表1(续)时间min流动相VA流动相VB330703灡52984灡5298640607灡3灡2暋质谱参考条件a)暋扫描方式:负离子扫描(ESI-);b)暋毛细管电压:3500V;c)暋离子源温度:250曟;d)暋干燥气流量:7L/min;e)暋雾化气压力:35psi;f)暋鞘气温度:325曟;g)暋鞘气(N2)流量:11L/min;h)暋喷嘴电压:400V;i)暋检测方式:多反应监测(MRM),监测条件见表2。表2暋多反应监测(MRM)条件序号中文名称保留时间min定量离子对m/z碰撞能量V定性离子对m/z碰撞能量V1氟虫腈3灡69434灡9329灡815434灡9249灡8302氟甲腈3灡43386灡9350灡810386灡9281灡8353氟虫腈砜4灡11450灡9281灡810450灡9243灡8664氟虫腈亚砜3灡91418灡9382灡830418灡9261灡8307灡4暋基质混合标准工作曲线准确吸取一定量的混合标准中间溶液,用空白基质提取液逐级稀释成质量浓度为0灡001mg/L、0灡002mg/L、0灡004mg/L和0灡01mg/L、0灡02mg/L的基质混合标准工作溶液,供液相色谱质谱联用仪测定。以农药定量离子峰面积为纵坐标、农药基质标准溶液质量浓度为横坐标,绘制标准曲线。7灡5暋定性及定量7灡5灡1暋保留时间被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较,相对误差应在暲2灡5%之内。7灡5灡2暋定量离子、定性离子及子离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时,如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致,并且在扣除背景后的样品质谱图中,目标化合物的质谱定量和定性离子均出现,而且同一检测批次,对同一化合物,样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比,其允许偏差不超过表3规定的范围,则可判断样品中存在目标农药。表3暋定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差单位为百分率相对离子丰度5020~50(含)10~20(含)曑10允许相对偏差暲20暲25暲30暲507灡5灡3暋试样溶液的测定3GB23200灡115—2018将基质混合标准工作溶液和试样溶液依次注入液相色谱质谱联用仪中,保留时间和定性离子定性,测得定量离子峰面积,待测样液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内,超过线性范围时应根据测定浓度进行适当倍数稀释后再进行分析。7灡6暋平行试验按7灡1~7灡3、7灡5的规定对同一试样进行平行试验测定。7灡7暋空白试验除不加试料外,按7灡1~7灡3、7灡5的规定进行平行操作。8暋结果计算试样中各农药残留量以质量分数氊计,单位以毫克每千克(mg/kg)表示,按式(1)计算。氊=氀暳A暳VAs暳m(1)…………………………………………暋暋式中:氊———试样中被测物残留量,单位为毫克每千克(mg/kg);氀———基质标准工作溶液中被测物的质量浓度,单位为微克每毫升(毺g/mL);A———试样溶液中被测物的色谱峰面积;As———基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积;V———试样溶液最终定容体积,单位为毫升(mL);m———试样溶液所代表试样的质量,单位为克(g)。计算结果以重复性条件下获得的2次独立测定结果的算术平均值表示,保留2位有效数字。含量超1mg/kg时,保留3位有效数字。9暋精密度在重复性条件下,获得的2次独立测试结果的绝对差值不得超过重复性限(r),见表4。在再现性条件下,获得的2次独立测试结果的绝对差值不得超过再现性限(R),见表4。表4暋重复性限(r)和再现性限(R)序号中文名称重复性(r)再现性(R)0灡005mg/kg0灡02mg/kg0灡5mg/kg0灡005mg/kg0灡02mg/kg0灡5mg/kg1氟虫腈0灡000500灡00360灡0440灡000910灡00920灡0892氟甲腈0灡000590灡00250灡0240灡000630灡0110灡0833氟虫腈砜0灡000420灡00410灡0310灡000560灡00710灡104氟虫腈亚砜0灡000600灡00270灡00800灡001020灡0120灡05410暋其他本方法氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈砜和氟虫腈亚砜的定量限均为0灡005mg/kg。11暋谱图0灡004mg/L氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈亚砜和氟虫腈砜标准溶液的总离子流色谱图见图1。4GB23200灡115—2018!#$$#%%#&&#’’####$(#$#$%#$!(#!#!%#!)$!’!*+,-!#图1暋0灡004mg/L氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈亚砜和氟虫腈砜标准溶液的总离子流色谱图暋暋0灡004mg/L氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈亚砜、氟虫腈砜标准溶液的提取离子色谱图见图2。!#$%&’($!#$%&’()$*(($*’’$*++$,--$,,,$,.()+()$)$/)$-)$’)-+-$%&’-%$!)#*%&’()$*(($*’’$*++$*--$***$*0()’#-’)+#$%&+*)$!#*+&’()$*(($*’’$*++$*--$***$*1()-($-($’()$)$#)$-)$’)-+-$%&+’%$!,#$+&’-)$*(($*’’$*++$*--$***$*2()!!$,!’$,’($,()$,)3($%&’/($!)#./*%&’()$,(($,’’$,!!$,33$,,,$,4()+,3+’()3,)$%&’3+$!,#/%&’()$,(($,’’$,++$,33$,,,$,5()+’($,()$,)3($%&+’$!,#./*+&’()$,(($,’’$,++$,33$,,,$,6()-()$)$/)$-)$’)-,)$%&’($!,#/*+&’()$,(($,’’$,++$,--$,,,$,7()-()$)$/)$-)$’)!89:;!89:;!89:;!89:;!89:;!89:;!89:;!89:;012012012012012012012012图2暋0灡004mg/L氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈亚砜、氟虫腈砜标准溶液的提取离子色谱图5GB23200灡115—2018附暋录暋A(资料性附录)化合物相关信息暋氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈砜和氟虫腈亚砜相关信息见表A灡1。表A灡1暋化合物中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、结构式序号中文名称英文名称CAS号分子式相对分子质量结构式1氟虫腈fipronil120068373C12H4Cl2F6N4OS437灡15!!!##$$$%&!!!’($2氟甲腈fipronildesulfinyl205650653C12H4Cl2F6N4389灡09!!#$#$!!!!%&3氟虫腈亚砜fipronilsulfide120067836C12H4Cl2F6N4S421灡15!!#$#$!%!!&’!4氟虫腈砜fipronilsulfone120068362C12H4Cl2F6N4O2S453灡15!!#$#$!%!!&’!((6