GUS染色液(即用型)使用说明书

北京索莱宝科技有限公司第1页共2页GUS染色液（即用型）使用说明书货号：G3061有效期：6个月产品内容：产品说明：X-Gluc（X-GlcA）分子量为521.8，CAS号为18656-96-7，是检测大肠杆菌中GUS基因的底物，可快速检测植物中GUS基因融合标记。GUS染色液在适宜的反应条件下，β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质，该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质，具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。GUS染色液多用于转基因植物的GUS基因表达分析。操作步骤(仅供参考)：1、配制X-Gluc染色液：取适量X-GlucSolution(50×)和GUSBuffer，按1:50比例充分混匀，配制成X-Gluc染色液，如取200ulX-GlucSolution(50×)加入到10mlGUSBuffer中，即配成10mlGUS染色液，该染色液最好现配现用，短期可4℃保存3d。2、取适量待染液片等组织加入适量GUS染色液，使GUS染色液完全浸没组织。3、37℃孵育1-24h。随着孵育时间的延长，蓝色渐渐出现，当表达量较高时，GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点。4、用70%乙醇脱去样本的叶绿素，一般样本浸没于乙醇1-3h，至阴性对照呈白色。如有必要可重复该脱色步骤，以便彻底清除叶绿素。样本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光学显微镜下观察，白色背景上的蓝色即为GUS表达位点。注意事项：1、配制好的GUS染色液可以4℃避光保存3d。名称20ml50mlStorage试剂(A):X-GlucSolution(50×)400μL1mL-20℃避光试剂(B):GUSBuffer20ml50ml4℃避光北京索莱宝科技有限公司第2页共2页2、X-GlucSolution(50×)应避免反复冻融，否则染色效率会下降。3、由于组织特异性等原因，蓝色颜色反应可能不完全一致，应注意摸索具体实验条件。拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像烟草和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物渗入细胞,建议使用GUS染色液（G3060）。4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。