改良油红O染色液说明书

染色液说明书货号：G1261有效期：6个月有效。产品说明：产品名称2×50ml2×100mlStorage试剂(A)：改良OilredOstainA1:OilredOstainA30ml60ml4℃避光A2:OilredOstainB20ml40mlRT临用前，按A1:A2=3:2比例混合，静置10min，即获得改良OilredOStain，不宜提前配制。试剂(B):Mayer苏木素染色液50ml100ml4℃避光产品说明：脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(例如乙醇、乙醚等)。人体的脂肪主要有两种：1、储存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪，如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutralfat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等。传统方法中，常采用苏丹染料，最近发现偶氮染料油红O更适合脂肪的染色。油红O是很强的脂溶剂和染脂剂，较易与甘油三脂结合呈小脂滴状），与磷脂结合力稍差。其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在冰冻切片内脂质的溶解度较在原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。改良油红O染色液主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着，常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性，细胞内出现多数中性脂肪滴；鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。标本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%的福尔马林)、也不采用石蜡切片，需用冰冻切片或碳蜡切片。脂肪的阳性染色结果呈橘黄至红色，但具体颜色因脂质浓度而定。自备材料：1.60%的异丙醇2.蒸馏水的盐酸乙醇溶液4.稀碳酸锂溶液5.甘油明胶或阿拉伯糖胶操作步骤（仅供参考）：1、冰冻切片厚度6～10μm，不固定或10%福尔马林固定10min后水洗。2、切片入蒸馏水中稍冲洗。3、切片入60%的异丙醇内浸洗20～30s。4、切片入改良油红O染色液中(加盖)，密闭染色10～15min。5、分色：入60%的异丙醇内稍洗以便去除染液。6、入蒸馏水中稍微清洗。7、Mayer苏木素染色液复染核1～2min。8、(可选)1%的盐酸溶液稍微分化一下。9、(可选)自来水漂洗10min或稀碳酸锂溶液中促蓝。10、入蒸馏水中稍微清洗。11、用滤纸吸干周围水分。12、甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。染色结果：中性脂肪橙红色或橘红色细胞核蓝色注意事项：1、改良油红O染色液不够稳定，易产生沉淀，不宜提前配制。2、如果60%的异丙醇不易获得，亦可采用70%的乙醇。3、由于脂肪易溶于有机溶剂，所以显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理，而通过冰冻切片染色来显示。4、作脂肪染色的冰冻切片不可太薄，过薄的切片常会使脂质丢失。5、Mayer苏木素染色液复染时间不能过长。、染色结果不能长期保存，应尽快观察及照相。7、甘油明胶封固的样本，保存时间不长。如需长期保存，可以在盖玻片与载玻片交界的边缘用中性树胶封闭。8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。