血磷浓度检测试剂盒说明书 微量法

北京索莱宝科技有限公司第1页，共2页血磷浓度检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。货号：BC1655规格：100T/96S产品内容：试剂一：液体110mL×1瓶，4℃保存。试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存，临用前加入1mL蒸馏水充分溶解，再缓慢加入272μL浓硫酸，混匀。试剂三：粉剂×2瓶，4℃保存。临用前配制，依次加入5.5mL蒸馏水充分溶解，再加入0.95mL试剂二，充分混合。标准液：液体1mL×1支，5mmol/L无机磷，4℃保存。临用前用蒸馏水稀释5倍至1mmol/L备用。产品说明：血磷主要指血中的无机磷，以无机磷盐的形式存在。血浆中钙、磷浓度关系密切，在以mg/dL表示时，二者的乘积(［Ca］×［P］)为30～40。当(［Ca］×［P］)40，则钙和磷以骨盐形式沉积于骨组织；若(［Ca］×［P］)35则妨碍骨的钙化，甚至可使骨盐溶解，影响成骨作用。血钙和血磷含量的相对稳定依赖于钙、磷的吸收与排泄和钙化及脱钙两种代谢的相对平衡。上述平衡受到维生素D3、甲状旁腺素和降钙素等激素的调节。去除血清中有机磷后，无机磷盐与钼酸铵试剂生成磷钼酸，被硫酸亚铁还原后呈蓝色，在660nm有光吸收；通过测定660nm吸光度，计算血液中磷含量。自备仪器和用品：离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸馏水。操作步骤：一、血磷浓度测定操作：1.分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。北京索莱宝科技有限公司第2页，共2页2.血清预处理：吸取50μL血清，加950μL试剂一，混匀后室温8000rpm，离心10min，取上清液，待测。3.测定：试剂名称（μL）空白管标准管测定管标准液50上清液50蒸馏水50试剂一505050试剂三100100100混匀后静置10min，于660nm测定吸光度，分别记为A空白管、A标准管、A测定管。二、血磷浓度计算：血磷含量（mmol/L）=[C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×20=20×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)C标准液：标准液的浓度，1mmol/L；20：样品稀释倍数，（50μL血清+950μL试剂一）÷50μL血清=20。注意事项：1、试剂三需临用前配制，如未用完，4℃保存，最多可使用3天；2、测定过程中，应尽量避免溶血，因为红细胞中有机磷酯进入血清后可被酶水解而使得血清无机磷含量增高。3、结果于40min内测定完毕。