组织无机磷含量检测试剂盒说明书 微量法

北京索莱宝科技有限公司第1页，共2页组织无机磷含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。货号：BC2845规格：100T/96S产品内容：试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存。试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。试剂三：粉剂×2瓶，4℃避光保存。临用前配制，加入5mL蒸馏水，充分溶解后加入2.5ml试剂二，混匀。标准品：液体×1支，1mmol/L无机磷标准液，4℃保存。产品说明：无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等，此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质，通过测定660nm光吸收，即可计算无机磷含量。自备仪器和用品：离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。操作步骤：一、无机磷提取：取约0.1g组织，加试剂一1mL冰上充分匀浆，4℃，10000rpm，离心10min，取上清液，待测。二、测定：1.可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。2.打开水浴锅，调节温度到40℃。3.测定：北京索莱宝科技有限公司第2页，共2页试剂名称（μL）空白管标准管测定管标准液10上清液10蒸馏水1009090试剂三100100100混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10min后于660nm测定吸光度，分别记为A空白管、A标准管、A测定管。注意：需在40min内完成比色。三、组织无机磷含量计算：组织无机磷含量(mmol/g样本鲜重)=[C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V总÷W=0.001×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷WC标准液：1mmol/L；V总：上清液总体积，1mL=0.001L；W：样品质量，g。注意事项：1、试剂三需临用前配制，限当天使用。2、测定前先用1~2个样品做预实验，如吸光值大于1，需用蒸馏水做相应稀释。