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时间：90分钟满分：100分一、选择题(每小题2分，共40分)1．关于微生物培养基的说法正确的是()A．牛肉膏不能提供碳源B．培养硝化细菌可以不加有机碳C．刚果红使纤维二糖染色D．酵母菌酿酒时需持续供氧答案B答案解析牛肉膏能给微生物提供碳源，A错误；硝化细菌属于自养型微生物，故培养硝化细菌可以不加有机碳，B正确；刚果红可以与纤维素反应呈红色，不与纤维二糖反应，C错误；酵母菌酿酒时前期需要供氧，后期应该是严格的无氧发酵，D错误。解析2．下列有关微生物培养的说法，正确的是()A．制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板B．分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一的碳源C．配制培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性D．在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌答案B答案解析制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错误；分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一碳源，B正确；配制培养不同微生物的培养基时都要将pH调至能够满足该种微生物需要的pH，如培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，C错误；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌，D错误。解析3．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A．培养基分装到培养皿后进行灭菌B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D．培养过程中每隔一周观察一次解析在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板，A错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B正确；接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；培养过程中一般隔12h或24h观察一次，D错误。解析答案B答案4．金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法错误的是()A．对接种环进行灼烧处理B．带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C．带菌培养基必须经加热后才能倒掉D．接种后双手必须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦拭答案C答案解析对接种环进行灼烧可以杀灭细菌防止污染环境，A正确；带菌培养基经高压蒸汽灭菌后才能倒掉，以防止污染环境，B正确，C错误；金黄色葡萄球菌有很强的致病力，所以在操作时一定要做到安全防范，接种后双手用肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦拭杀菌，D正确。解析5．下列关于微生物培养的叙述，错误的是()A．通过消毒不能杀死物体内所有的微生物B．倒平板时培养基倒入培养皿后，要立即倒置放置C．平板划线法和稀释涂布平板法常用于微生物的接种D．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是碳源答案B答案解析消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部部分微生物(不包括芽孢和孢子)，A正确；平板需冷凝后才能倒置放置，B错误；微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，C正确；不同的培养对象，所需的营养成分不同，自养微生物能够利用无机碳源合成有机物，而异养型微生物只能利用含碳有机物，所以它们的主要差别是碳源不同，D正确。解析6．下列操作中不是获得较纯菌种的措施的是()A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B．适宜环境条件下培养C．土壤样品要灭菌处理后才能使用D．如果培养皿中是固体培养基，则需倒置培养答案C答案解析将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌属于无菌技术的一个方面，有利于获得较纯净的菌种，A正确；适宜环境条件下培养有利于获得较纯净的菌种，B正确；土壤样品灭菌处理后将杀死所有微生物，会导致不能获得需要的菌种，C错误；如果培养皿中是固体培养基，则需倒置培养，以防止皿盖上的冷凝水滴入培养基造成污染，D正确。解析7．采用稀释涂布平板法统计样品中的活菌数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在何种范围的平板进行计数()A．30～100B．30～200C．30～300D．30～600解析为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。解析答案C答案8．关于平板划线法和稀释涂布平板法的叙述不正确的是()A．只能应用于固体培养基接种B．都可以用于微生物的计数C．接种培养后均可获得单菌落D．接种用具都需进行严格灭菌解析平板划线法和稀释涂布平板法都只能用于固体培养基上接种，A正确；稀释涂布平板法又称活菌计数法，是依据一个单细胞可繁殖成单个菌落这一培养特征设计的计数方法，可对微生物进行计数，而平板划线法不能用于计数，B错误；两种接种方法在培养基中都能形成单菌落，C正确；接种环和涂布器都必须经过灭菌才能使用，D正确。解析答案B答案9．设置对照的主要目的是排除实验组中哪一因素对实验结果的影响()A．测试因素B．非测试因素C．全部因素D．生物因素解析设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。解析答案B答案10．关于土壤取样的叙述，错误的是()A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土，在3～8cm深处取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤解析土壤取样要注意无菌操作，取样用的小铁铲和信封在使用前需灭菌，C错误。解析答案C答案11．不用显微镜也可以鉴定细菌的种类，主要依据是细菌菌落的特征。下列哪项不是菌落的特征()A．大小和形状B．光泽度和透明度C．颜色和硬度D．气味和pH解析不同种类的细菌所形成的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有不同的特征，每种细菌在一定条件下所形成的菌落的特征，可以作为菌种鉴定的重要依据。解析答案D答案12．下列关于大肠杆菌培养的叙述中，不正确的是()A．在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件B．在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒C．若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品的稀释度D．使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃答案B答案解析灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以对培养基和培养皿要进行灭菌，而不是消毒，B错误。解析13．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是()A．对分离的菌种作进一步的鉴定B．筛选出能分解尿素的细菌C．培养基中还缺乏酚红指示剂作细菌的营养D．如指示剂变蓝我们就能准确地认定该菌能分解尿素解析以尿素为唯一氮源的培养基可以筛选出能分解尿素的细菌，加入酚红指示剂的目的是对分离的菌种作进一步的鉴定，A正确。解析答案A答案14．下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述，不正确的是()A．纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵B．对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后，无需再进行其他实验C．纤维素酶的测定方法，一般是对产生的葡萄糖进行定量的测定D．纤维素酶是一种复合酶答案B答案解析纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵，A正确；如果在鉴别培养基上观察到产生透明圈的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌，为了进一步确定，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，B错误；纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定，C正确；纤维素酶是一种复合酶，主要包括：C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，D正确。解析15．如图是某种微生物接种示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列说法正确的是()A．在5区域中才可以得到所需菌落B．从第1区域到第5区域菌落数逐渐减少C．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环消毒答案B答案解析从第1区域到第5区域菌落数逐渐减少，在5个区域中都有可能得到所需菌落，只是第5区域相对可能性最大，B正确，A错误；在每次划线前后都要对接种环进行灭菌而不是消毒，接种环的灭菌方法应是在火焰的充分燃烧层灼烧，C、D错误。解析16．黑茶是以肉食为主的中国边疆游牧民族的主要饮品。在一系列微生物的作用下，黑茶会产生一种对人体非常有益的金黄色颗粒“金花”。研究人员对“金花”中的微生物进行了分离和鉴定，过程如图。下列说法不正确的是()A．向“金花”样品中加入蒸馏水制成样品悬液B．可根据菌落特征对菌种进行初步鉴定C．涂布平板上长出的菌落可通过划线进一步纯化D．可通过基因组测序对菌种进行准确鉴定解析向“金花”样品中加入无菌水制成样品悬液，A错误；可根据菌落特征对菌种进行初步鉴定，B正确；涂布平板上长出的菌落可通过划线进一步纯化，C正确；可通过基因组测序对菌种进行准确鉴定，D正确。解析答案A答案17．如图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程，其中LB培养基能使菌种成倍扩增，以下说法正确的是()A．需要对活性污泥作灭菌处理B．②中LB培养基应以甲醛为唯一碳源C．目的菌种异化作用类型为厌氧型D．经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养答案D答案解析活性污泥不能进行灭菌处理，A错误；②过程用完全培养基培养后，可以获得大量微生物，从而增加目的菌的菌群数量，③过程可以筛选出能分解甲醛的微生物，即培养出以甲醛为唯一碳源的细菌，B错误；目的菌种需进行振荡培养，所以其异化作用是需氧型，C错误；经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养，D正确。解析18．MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如下表。下列说法正确的是()组别培养基中的添加物MRSA菌1100μg/mL蛋白质H生长正常220μg/mL青霉素生长正常32μg/mL青霉素＋100μg/mL蛋白质H死亡A．细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定的B．第2组和第3组对比表明，使用低浓度的青霉素即可杀死MRSA菌C．实验还需设计用2μg/mL青霉素做处理的对照组D．蛋白质H有很强的杀菌作用，是一种新型抗生素解析细菌是原核生物，其细胞中无细胞核，因而不能通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定细菌的死亡与否，A错误；第2组和第3组的青霉素浓度不同，且第3组含有蛋白质，第2组不含有，存在2个变量，所以不能形成对比，B错误；第3组缺少2μg/mL青霉素做处理的对照组，C正确；实验只能说明一定浓度的蛋白质H与青霉素组合使用可以杀灭MRSA菌，不能说明蛋白质H单独有很强的杀菌作用，D错误。解析答案C答案19.在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素(浓度相同)的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水，培养后的结果如图。以下判断错误的是()A．a处抑菌效果小于b处B．b处的滤纸片没有沥干C．c处抗生素无效D．d为对照答案A答案解析由图可知，b处的抑菌圈较不规则，可能是b处滤纸片没有沥干，所以a、b两处的抑菌效果无法比较，A错误，B正确；c处无抑菌圈，说明该处抗生素无效，C正确；d处滤纸浸有无菌水，用于对照，D正确。解析20．以下有关生物技术实践的叙述中，不正确的是()A．在大肠杆菌的分离和培养实验中，划线后盖好培养皿，再将培养皿倒置培养B．在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合生物结构与功能相适应的生物学观点C．在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸D．不能用平板划线法来测定土壤溶液中某活菌数目答案B答案解析在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合生物与环境相适应的观点，B错误。解析二、非选择题(每小题12分，共60分)21．幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察请回答：(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有脲酶，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现________色环带。(2)步骤X表示________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液_______