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生物第三单元细胞的能量供应和利用实验技能(二)变量梯度设置在实验中的应用普通淀粉酶的最适温度在40～60℃之间，而极端耐热淀粉酶在100℃仍能保持较高的活性，因此在生产上具有更为广泛的应用前景。请回答有关问题：(1)要鉴定该酶的化学本质，可将该酶液与___________________________混合，若反应液呈________色，则该酶的化学本质为蛋白质。(2)测定淀粉酶活性时，应选择________作为该酶作用的底物，反应液中应加入________溶液以维持其酸碱度稳定。(3)设计实验探究极端耐热淀粉酶起催化作用的最适温度。①此实验中除自变量和因变量外，还需要考虑_______________________________(指出两点即可)等因素。②结合题目信息，简要写出探究该酶催化作用最适温度的实验思路：___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：大多数酶是蛋白质，少数酶是RNA，要鉴定该酶的化学本质，可将该酶液与双缩脲试剂混合，若反应液呈紫色，则该酶的化学本质为蛋白质。答案：(1)双缩脲试剂紫(2)淀粉(酸碱)缓冲(3)①淀粉溶液的浓度和含量、pH及添加试剂的量、实验操作顺序等②在40℃和100℃之间每隔一定温度设置一个实验组，其他实验条件适宜且保持一致。以反应液和碘液发生颜色反应的程度为指标确定最适温度1．概述变量梯度指自变量相邻两次取值之间的差值大小，即自变量每次变化的幅度。生物实验中常见的变量梯度有pH梯度、温度梯度、浓度梯度等。2．过程分析(1)在合适范围内取值：生物体或细胞生活在特定的环境中，研究某因素对生物或细胞的影响时，自变量应在它能发挥作用的范围内取值。如确定生长素类似物促进扦插枝条生根的适宜浓度，生长素浓度应在10－12～10－8mol/L范围内，变量梯度应相差一个数量级。(2)梯度大小设置要适宜：梯度过小，看不出变化，实验组数增多，增加了操作难度；梯度过大，实验结果不准确。如探究唾液淀粉酶的最适pH，预测其数值应在7.0左右，pH梯度设为0.4，即共做五组实验，其缓冲液pH分别为6.2、6.6、7.0、7.4、7.8。(3)根据实验目的确定变量梯度的大小①若进行定性分析，梯度设置可稍大些。如探究温度对光合作用的影响，一般情况下植物在30℃左右时，光合作用最强。我们既要研究温度降低时光合作用强度的变化，也要研究温度升高时的变化，温度梯度设置如下：0℃、10℃、20℃、30℃、40℃。②若要进行定量分析，梯度设置应小些。如探究光合作用的最适温度，温度梯度设置如下：24℃、27℃、30℃、33℃、36℃。(4)在实际操作中，为避免因梯度设计不当，造成人力物力方面的浪费，我们可以设计一个预实验，每组之间梯度适当加大一些，当找到一个大致的适宜范围后，再在这个范围内缩小每组之间梯度值，最后测出一个准确范围。1．某生物兴趣小组用迎春枝条作实验材料，做了探究α萘乙酸(NAA)促进插条生根最适浓度实验的预实验，结果如下图。请根据预实验结果，设计进一步的探究实验。(1)材料用具：生长旺盛的一年生迎春枝条若干、烧杯、量筒、培养皿、NAA、蒸馏水等。(2)配制溶液：配制浓度依次为_____________________________________________(溶液浓度梯度为0.5ppm)的NAA溶液9份，并编号1～9。(3)实验步骤：第一步：______________________________________________________________；第二步：______________________________________________________________；第三步：一天后取出枝条分别进行扦插；第四步：每天对扦插枝条的生根情况进行观察记录。(4)请设计本实验的观察记录表。(5)该实验应控制好两个主要的无关变量，具体方法是_____________、_____________。解析：根据预实验的结果，可确定进一步探究的浓度范围是2～6ppm，再根据题中要求浓度差为0.5ppm，可确定要配制的浓度梯度为2ppm、2.5ppm、3ppm，3.5ppm、4ppm、4.5ppm、5ppm、5.5ppm、6ppm共9个不同的浓度。填写实验步骤时，应遵循随机分组→浸泡→培养(扦插)→统计的思路进行解答。该实验的无关变量应从实验材料、处理时间、温度等方面考虑。答案：(2)2ppm、2.5ppm、3ppm、3.5ppm、4ppm、4.5ppm、5ppm、5.5ppm、6ppm(3)将迎春枝条随机均分为9份将9份枝条的基部分别浸泡在1～9号NAA溶液中(4)如下表：NAA浓度(ppm)生根条数天数22.533.544.555.56123…(5)各组枝条处理时间长短一致所用植物材料尽可能做到生长状况一致2．低温迫使植物细胞产生大量对细胞有害的过氧化产物，如脂质过氧化产物(MDA)。超氧化物歧化酶(SOD)能够消除过氧化产物，从而增强植物的抗冷性。研究人员进行了“水杨酸对水稻幼苗抗冷性的影响”实验，步骤及结果如表所示。据表回答下列问题：组别处理培养温度SOD活性[U/(g·min)]125℃的蒸馏水浇灌25℃7.32①②9.435℃的0.5mmol/L水杨酸浇灌5℃10.345℃的1.0mmol/L水杨酸浇灌5℃11.6组别处理培养温度SOD活性[U/(g·min)]55℃的1.5mmol/L水杨酸浇灌5℃13.665℃的2.0mmol/L水杨酸浇灌5℃8.575℃的2.5mmol/L水杨酸浇灌5℃7.985℃的3.0mmol/L水杨酸浇灌5℃6.5(1)表中①是________，②是________。实验设计时每组取50株水稻幼苗，而不是1株，目的是_____________________________________________________________________。(2)本实验需要控制的无关变量有___________________________________(至少写两点)。(3)组别1和2对照可得结论是_________________________________________________。组别2～8可得到的结论是__________________________________________________。在5℃条件下，2.0mmol/L的水杨酸对水稻幼苗抗冷性的影响是________(填“增强”或“减弱”)。(4)请根据5℃条件下的实验结果，完成水杨酸浓度与SOD活性关系的坐标折线图。解析：(1)2组与3～8组之间应形成对照，根据单一变量原则，表中①应为5℃的蒸馏水浇灌，②是5℃。实验对象多可避免偶然性，使实验结果更准确。(2)除自变量以外，对实验结果有影响的变量均为无关变量，比如蒸馏水和水杨酸的浇灌量、培养时间、幼苗发育情况等。(3)组别1与2之间的变量为温度，且低温时SOD活性较大，说明环境温度降低时，水稻幼苗自身可增强抗冷性。分析2～8组SOD活性可知，在一定范围内随着水杨酸浓度的增加，水稻的抗冷性增强，当水杨酸浓度增加到一定值时，水稻的抗冷性开始减弱。与2组比较可知，在5℃条件下，2.0mmol/L的水杨酸对水稻幼苗抗冷性的影响是减弱。(4)根据表格中的实验结果，在坐标图中描点连线即可，同时注意横纵坐标一定要标上。答案：(1)5℃的蒸馏水浇灌5℃避免偶然性，减少误差，使实验结果更准确(2)蒸馏水和水杨酸的浇灌量、光照强度、培养时间、幼苗的发育情况等(3)环境温度降低时，水稻幼苗自身可增强抗冷性在一定范围内，随水杨酸浓度的增加，水稻幼苗的抗冷性增强；当水杨酸浓度增加到一定程度时，水稻幼苗的抗冷性开始减弱(或水杨酸对水稻幼苗的抗冷性的影响具有两重性、1.5mmol/L左右的水杨酸增强水稻幼苗抗冷性的效果最好)减弱(4)如图本部分内容讲解结束按ESC键退出全屏播放