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实验技能一、细胞内有机物的鉴定1．通过颜色反应对化学物质或结构进行检测物质试剂预期实验结果蛋白质双缩脲试剂(先加A液再滴加B液，摇匀)紫色反应脂肪苏丹Ⅲ染液(或苏丹Ⅳ染液)橘黄色(或红色)还原糖斐林试剂(现配现用，水浴加热)砖红色沉淀淀粉碘液蓝色染色体(质)龙胆紫溶液或醋酸洋红液深紫色或紫红色DNA吡罗红甲基绿混合染色剂DNA被甲基绿染成绿色RNARNA被吡罗红染成红色2.有机物的检测流程(1)还原糖的检测选材→制备组织样液→加斐林试剂→水浴加热→出现砖红色沉淀。(2)脂肪的检测选材→制片→加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液染色→漂洗→镜检呈橘黄色(或红色)。(3)生物组织中蛋白质的鉴定制备样液(豆浆或蛋清稀释液)→鉴定样液(样液加A液1～2mL振荡摇匀，再加B液3～4滴，摇匀)→呈紫色。(4)观察DNA和RNA在细胞中的分布制片→用质量分数为8%的盐酸水解5min→用蒸馏水缓慢冲洗掉盐酸→用吡罗红甲基绿染色剂染色5min→观察→结果细胞核被染成了绿色，细胞质被染成了红色→结论：DNA主要分布在细胞核中，RNA主要分布在细胞质中。3．物质鉴定类试题的3个易错点一是不清楚实验试剂的作用对象，如将甲基绿与吡罗红的作用混淆等。二是不清楚鉴定试剂的使用方法，如还原糖与斐林试剂反应需要水浴加热，但双缩脲试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、碘液的使用条件则为常温。三是不清楚斐林试剂和双缩脲试剂的相关使用方法，前者是将甲液、乙液混合均匀后再加入样液，使用时需水浴加热，而双缩脲试剂是先加入A液，形成碱性环境后再滴加B液，使用时无需加热。1．(2018·青海西宁模拟)下列关于“可溶性还原糖、蛋白质和脂肪鉴定”实验的叙述，正确的是()A.常用番茄、苹果等组织样液作为鉴定植物组织内还原糖的实验材料B.脂肪鉴定中观察花生子叶切片细胞间不可能出现橘黄色小颗粒C.脂肪鉴定中50%的酒精是为了溶解组织中的油脂D.蛋白质鉴定中加入的0.1g/mLNaOH溶液可为反应提供碱性环境解析：斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色(沉淀)，番茄的红色会影响实验结果，A错误；切片时，被破坏的子叶细胞会释放出少量脂肪，细胞间会出现橘黄色小颗粒，B错误；脂肪鉴定中50%的酒精主要作用是洗去浮色，C错误；蛋白质在碱性环境中和铜离子反应产生紫色络合物，蛋白质鉴定中加入的0.1g/mLNaOH溶液可为反应提供碱性环境，D正确。答案：D2．下列关于食品安全问题的探究实验设计，正确的是()选项探究主题实验试剂预期实验结果结论A某“色拉油”是否含有脂肪苏丹Ⅲ染液被检测液体出现橘黄色不含有脂肪，但可能含有固醇B某“早餐奶”是否含有蛋白质双缩脲试剂被检测液体出现砖红色含有蛋白质，但含量少于淀粉C某“奶片”是否添加淀粉碘液被检测液体出现蓝色含有淀粉，不含有蛋白质D某“无糖”无色饮料中是否含有葡萄糖斐林试剂甲液和乙液被检测液体出现砖红色一定含有还原糖，但不一定是葡萄糖解析：苏丹Ⅲ染液可将脂肪染成橘黄色，结论中“不含有脂肪”的说法错误，A错；双缩脲试剂与蛋白质反应呈紫色，“被检测液体出现砖红色”的预测错误，结论无法得出，B错；用碘液检测，被检测液体出现蓝色，只能证明含有淀粉，不能证明不含蛋白质，C错；斐林试剂与还原糖在水浴加热条件下反应可以产生砖红色沉淀，所以砖红色出现只能证明还原糖的存在，而不能证明一定有葡萄糖，D正确。答案：D3．还原糖、脂肪、蛋白质和DNA四种有机物的鉴定实验中，选材或操作正确的是()A.用斐林试剂检测胡萝卜汁中的还原糖B.向花生种子匀浆中滴加苏丹Ⅲ染液检测脂肪C.将双缩脲试剂A液与B液混合，摇匀后检测豆浆中的蛋白质D.常温条件下，核糖核酸与甲基绿作用，呈现绿色解析：用斐林试剂检测还原糖时，需选用无色(或浅色)的材料，避免材料颜色对实验结果的干扰；脂肪的检测有两种方法，一种是组织液法，一种是切片法，选项B属于前者；用双缩脲试剂检测蛋白质时，需先加入A液，摇匀，再加入B液摇匀；甲基绿用于检验DNA，吡罗红用于检验RNA。答案：B4．下列实验过程，正确的是()A.观察细胞中DNA与RNA的分布：制片→冲洗→水解→染色→观察B.脂肪鉴定：切取花生子叶薄片→去浮色→染色→制片→观察C.蛋白质鉴定：将双缩脲试剂A液和B液混合→滴加到豆浆样液中→观察D.还原糖鉴定：将斐林试剂甲液和乙液混合→加入到苹果样液中→水浴加热→观察解析：观察细胞中DNA与RNA的分布实验过程：制片→水解→冲洗→染色→观察，故A错误。脂肪鉴定实验过程：切取花生子叶薄片→染色→去浮色→制片→观察，故B错误。蛋白质鉴定是先加双缩脲试剂A液，摇匀后再加B液，故C错误。答案：D5．某学校生物兴趣小组为进一步确定来源不同的A、B、C、D、E五种物质(或结构)的具体类型，进行了下列实验，实验现象与结果如下。①各种物质(或结构)的性质、染色反应的结果如表所示：比较项目ABCDE来源猪血蛙表皮马肝棉花霉菌水溶性＋＋－－＋灰分＋＋－－－染色反应甲基绿溶液－＋－－－斐林试剂－－－－－苏丹Ⅲ染液－－＋－－双缩脲试剂＋＋－－＋碘液－－－－－注：“＋”表示有，“－”表示无；灰分指物质充分燃烧剩下的部分。②A为红色，检测A的灰分后发现其中含有Fe元素。③将适量的E溶液加入盛有D的试管中，混合一段时间后，混合液能与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。根据以上实验现象和结果，推断出：A.____________；B.____________；C.____________；D.____________；E.____________。解析：由表中信息可知，猪血中的成分能与双缩脲试剂发生显色反应，双缩脲试剂是鉴定蛋白质的试剂，且由于A为红色，检测A的灰分后发现其中含有Fe元素，故A中含有的成分是血红蛋白。B能被甲基绿染色，说明含有DNA，还能与双缩脲试剂发生显色反应，说明含有蛋白质，而染色质(体)中含有DNA和蛋白质，故B为染色质(体)。C能被苏丹Ⅲ染液染色，说明C为脂肪。棉花的主要成分是纤维素，E能与双缩脲试剂发生显色反应，说明E中的成分为蛋白质，将适量的E溶液加入盛有D的试管中，混合一段时间后，混合液能与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀，说明有还原糖生成，故D为纤维素，E为纤维素酶。答案：血红蛋白染色质(体)脂肪纤维素纤维素酶