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专题七生物技术实践点清·线明·面广——专题主干知识整合理清—知识联系1．制作果酒、果醋、腐乳、酸奶(泡菜)利用的微生物分别是酵母菌、醋酸菌、毛霉(主要)和乳酸菌，异化作用类型分别是兼性厌氧型、需氧型、需氧型、厌氧型。2．制作果酒和果醋的实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵。记清—主干术语3．制作果酒和果醋的发酵装置中充气口的作用是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气，排气口是在酒精发酵时排出CO2，出料口用来取样。4．制作果酒时温度一般控制在18～25℃，时间为10～12d，前期需氧后期不需氧；制作果醋时温度控制在30～35℃，时间为7～8d，始终需氧。5．毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。6．腐乳制作的实验流程：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。7．加盐腌制时间约为8d，配制卤汤中的酒的含量一般控制在12%左右。8．用盐腌制时，注意控制盐的用量：盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味。食盐的作用：抑制微生物的生长，避免腐败变质；析出水分，使豆腐变硬，在后期制作过程中不易酥烂；调味作用，给腐乳以必要的咸味；浸提毛霉菌丝上的蛋白酶。9．配制卤汤：卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，直接关系到腐乳的色、香、味。酒的作用：防止杂菌污染以防腐；与有机酸结合形成酯，赋予腐乳风味；酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系，酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。10．微生物培养基的成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源及生长因子等。11．消毒指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。12．制备固体培养基的步骤包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等。在培养基冷却至50℃左右时，进行倒平板操作。13．纯化微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线法可以分离微生物但不能对微生物进行计数，稀释涂布平板法既可分离微生物也可以对微生物进行计数。14．平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。15．稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，即稀释涂布平板法一般分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。16．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法；对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。17．DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在浓度0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。18．DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质可溶于酒精，可利用冷却的酒精对提取的DNA进行纯化。蛋白酶具有专一性，能催化水解蛋白质，不能催化水解DNA，可利用蛋白酶对DNA进行纯化。19．在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液，可获取含DNA的滤液；切碎洋葱，加入一定量洗涤剂和食盐，搅拌研磨，过滤后收集滤液，可获取含DNA的滤液。20．处理植物组织时需要进行研磨，其目的是破碎细胞壁，使核物质容易溶解在NaCl溶液中；研磨不充分会使DNA的提取量减少，影响实验结果，导致得不到丝状沉淀物。21．用二苯胺鉴定DNA，在沸水浴的条件下呈现蓝色。22．目前常用的加酶洗衣粉的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。23．探究加酶洗衣粉与普通洗衣粉洗涤效果的实验自变量是洗衣粉的种类；探究加酶洗衣粉洗涤的最佳温度条件实验的自变量是水的温度。24．一般来说，酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定，而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞个大，而酶分子很小；个大的难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。25．酵母细胞固定化的步骤：酵母菌的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合→固定化酵母细胞。其中关键步骤是配置海藻酸钠溶液。26．如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。关注点1误认为兼性厌氧与“有氧、无氧”都一样[澄清]酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，进行无氧呼吸产生酒精和CO2，产生的酒精对其他微生物和酵母菌本身都具有毒害作用，所以在无氧条件下酵母菌不能大量繁殖。澄清—思维误区关注点2误认为酿酒和酿醋所利用的微生物类型相同[澄清]酿酒和酿醋所利用的微生物不同，前者为酵母菌——真核生物；后者为醋酸菌——原核生物。二者本质区别是有无以核膜为界限的细胞核。关注点3不明确腐乳前期发酵和后期发酵的作用[澄清]前期发酵的主要作用是创造条件让毛霉生长，使毛霉形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程，即通过各种辅料与腐乳的缓慢水解作用，生成腐乳的香气。关注点4误认为腐乳制作中食盐的作用只是调节风味[澄清]食盐在腐乳制作中的作用有：①析出豆腐中的水分，有利于豆腐块成形；②抑制杂菌；③形成腐乳的风味；④杀死毛霉等微生物，有利于菌体内蛋白酶、脂肪酶等发挥作用。关注点5不明确影响腐乳口味的因素有哪些[澄清]影响腐乳口味的因素有：①豆腐的含水量；②盐的用量；③酒的用量；④香辛料的种类和用量；⑤其他辅料的种类；⑥发酵温度和时间。关注点6不能区分选择培养基和鉴别培养基[澄清]按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴别培养基。选择培养基是指在培养基中加入或不加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。如在某培养基中加入青霉素，则能抑制细菌的生长，对真菌的生长无影响。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。如伊红美蓝培养基能指示大肠杆菌的存在。关注点7平板冷凝后，不明确平板倒置的目的[澄清]平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。关注点8不了解影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素[澄清]影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量，衣物的质料、大小及浸泡时间和洗涤的时间等。关注点9不明确酵母细胞固定化实验中，海藻酸钠和氯化钙的作用[澄清]海藻酸钠作为酵母菌的包埋剂。氯化钙能与海藻酸钠反应，形成凝胶珠。关注点10不明确DNA粗提取和鉴定实验中，两次使用蒸馏水的作用[澄清]第一次加蒸馏水，使鸡血细胞吸水涨破；第二次加蒸馏水，使含DNA的NaCl溶液浓度降低，析出DNA。关注点11不明确破碎动植物细胞的方法[澄清]破碎植物细胞的方法常用研磨法，在研磨之前，向研钵中加入食盐、洗涤剂和植物材料。破碎动物细胞的方法常用渗透涨破法，过程是在鸡血细胞液中加入蒸馏水，用玻璃棒进行快速搅拌。[判一判]下列说法正确与否？(1)条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸()(2)在果酒、果醋和腐乳的制作中，腐乳制作所需要的适宜温度最高()(3)果酒、果醋和腐乳制作过程利用的都是微生物胞内酶()(4)高压蒸汽灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖()(5)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上()(6)用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上()(7)培养基分装到培养皿后才能进行灭菌()√√×××××(8)平板划线法、稀释涂布平板法，都可以用于微生物的计数()(9)可用包埋法制备固定化酵母细胞()(10)固定化酵母细胞的凝胶珠颜色过浅，说明固定的酵母细胞数量少()(11)将海藻酸钠与酵母细胞的混合液缓缓注入蒸馏水中，即形成固定化细胞颗粒()(12)可用兔的成熟红细胞作材料提取DNA()(13)DNA溶液与二苯胺试剂混合，沸水浴后生成蓝色产物()(14)破碎植物细胞时，加入食盐的目的是分离DNA和蛋白质()(15)二苯胺试剂与斐林试剂一样，均需现配现用()×√√××√×√